二十碳五烯酸的菌种选育及发酵条件

利用含亚麻子油的斜面培养基连续传工和逐渐降低培养温度,诱导筛选的方法,从大量丝状真菌中选育到一株产二十碳五烯酸（ａｌｌ－ｃｉｓ－５、８、１１、１４、１７－ｅｉｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃ ａｃｉｄ）较高的被孢霉菌（Ｍｏｔｉｅｒｅｌｌａ ｓｐ．）ＳＭ４８１。研究得到最适培养基及最适培养条件。在最适培养及产二十碳五烯酸条件下,细胞干重和二十碳五烯酸产量分别为２８．８ｇ／Ｌ和０．１２７ｇ／Ｌ。     

链霉菌702产孢子固体培养基和培养条件的筛选

通过单因素实验、均匀设计和正交实验对链霉菌702产抱子培养基和培养条件进行筛选,筛选到的最佳培养基组成为：马铃薯2009／L,葡萄糖25g／L．最佳培养条件为培养温度37℃、培养时间5天和培养基初始pH值8．实验结果表明,采用优化后的培养基和培养条件,使链霉菌702产抱子数达到4．07亿,比原来培养基（高氏一号培养基）产抱予量提高了8．7倍,培养时间却从原来的7天缩短到现在的5天．     

白腐真菌AH28-2菌株发酵合成漆酶初步研究

从224个野外采集的真菌样品中筛选分离到一株产漆酶活性较高菌株AH28－2,经初步鉴定为白腐真菌,采用单因子相互比较法,研究了该菌株最适发酵产酶条件。应用添加有1g／LKraft木素的液体发酵培养基,接种量5％（V／V）,初始pH8．5,装液量为50％,28℃、150r/min摇瓶振荡培养4－5d,漆酶酶活水平达20184IU／L。     

新铁炮百合的离体快速繁殖

1植物名称新铁炮百合（Liliumlongiflorum×L．formosanum,铁炮百合和高砂百合的杂交种）。2材料类别鳞片。3培养条件以MS为基本培养基。（1）鳞片初次接种培养基：1／3MS＋6－BA1mg·L-1（单位下同）＋IBA0．02＋GellanGum（美国生产的微生物多糖培养基固化剂）2g·L-1;（2）增殖培养基：MS＋6－BA1．0～1．5＋IBA0．2;（3）球茎形成培养基：MS＋6－BA0．2～0．5＋IAA0．2＋NAA0．05;（4）生根培养基：1／2MS＋IBx0．5。培养基含蔗糖25g·L－1,除（1）外,其它培养基附加普通琼脂5．5g·L－1,pH5．8。培养温度22～25…     

一步法发酵菊芋产乙醇菌种的筛选及产酶条件、酶学性质的研究

从腐烂的菊芋及实验室保存的菌种中,选育到一株发酵菊芋产乙醇的菌株克鲁维酵母Kluyveromyces marxianus Y1。利用正交实验法对克鲁维酵母产菊粉酶的培养基组成及培养条件进行优化,确定培养基组成（g/L）为：菊粉40,酵母粉4,蛋白胨4,尿素1;初始pH5．0,温度30℃,150r／min条件下培养达到最佳产酶效果（57U／mL）。该菌株所产菊粉酶的性质测定结果表明：以菊粉为底物,该菊粉酶最适反应温度为55℃,在60℃以下稳定性很好,高于60℃时酶迅速失活;最适pH为5．0,pH4．6—5．2范围内酶稳定性很好;该酶属于外切型菊粉酶,体积分数为8％的乙醇对酶活力基本没有影响。     

手性拆分环氧氯丙烷菌株的筛选、鉴定及产酶条件研究

从土壤中筛选到5株环氧化物水解酶生产菌,并通过ITS序列鉴定了其中的C375菌,结果为黑曲霉（Aspergillus nigerZJB-09103）。考察了培养基不同碳源、氮源、金属离子和pH等对产酶的影响,得到了较佳的培养基条件：淀粉16g／L,豆饼粉3g／L,蛋白胨3g／L,KH2PO4 0．4g／L,K2HPO4 0．8g／L,MgSO4 0．2g／L,ZnSO4 0．03g／L,pH6．5。采用优化后的培养基条件,酶活力达到156．1U／L,比优化前初始发酵培养条件下的酶活提高了252％,当环氧化物水解酶催化时间为10h时,（s）-环氧氯丙烷的对映体过量值（e．e．）可达99．0％。产率为18．6％。     

山葵的离体培养和植株再生

CInvitroCultureandPlangtletRegenerationofEutremawasabiWANGGuang-Dong,LIShi-Jun(DepartmentofHorticulture,NanjingAgriculturalUniversity,Nanjing210095)1植物名称山葵（Eutremawasabi）,又名山嵛菜。2材料类别带侧芽的根状茎。3培养条件（1）诱导培养基：1／2MS＋6－BA0．2mp·L－1（单位下同）＋NAA0．05;（2）增殖培养基：MS＋6-BA0．2＋KT0．2＋NAA0．05;（3）生根培养基：1／2MS＋NAA0．05。培养基（1）附加琼脂粉5．0g·L－1,其余附加6.0g·L－1。（1）和（2）培养基加蔗糖30g·L－1,（3）加20g·L－…     

皇冠草叶片外植体的体胚发生和植株再生

PlantletReperationandSomaticEmbryogenesisfromYoungLeavesofEchinodorusosirisXINGDeng－Hui(Departmentofbiology,CapitalNormaluniversity,Beijing100037）1植物名称皇冠草（Echinoborusosiris）。2材料类别幼叶（长2～3cm）。3培养条件体胚诱导培养基：（1）MS＋ZT1mg／L（单位下同）＋6－BA1;（2）MS十ZT1＋6－BA1＋NAA0．5;（3）MS＋ZT1＋6－BA1＋NAA1。体胚萌发培养基：MS＋IAA1。以上培养基均含蔗糖30g／L,琼脂8g／L,PH5．8。光照度800lx,每天光照12h,于25℃恒温下培养。毛生长与分化情况叶片经常规…     

红酵母COS—5产胡萝卜素条件的研究

研究碳源、氮源和添加剂对红酵母（Rhodotorulasp．）COS－5产胡萝卜素的影响,并通过正交试验优化其产胡萝卜素的培养基组成。结果表明,COS－5产胡萝卜素的适宜培养基：蔗糖50g、蛋白胨5g、酵母膏5g、桔子皮15g、盐酸硫胺素0．002g、定容1L,pH6．0.250mL三角瓶装培养基30mL。在上述条件下28℃振荡培养96h,细胞生物量为27．5mg干重／mL发酵液,胡萝卜素含量达492．7μg／g干重细胞。COS－5胡萝卜素在474．4nm、338．6nm和310．2nm处有     

聚半乳糖醛酸酶高产菌的产酶条件研究

通过单因素及正交试验对米曲霉（Aspergillus orza）C491产生聚半乳糖醛酸酶的发酵条件进行了优化。该菌株的摇床发酵滤液以桔子果胶为底物时酶活力可达344．8U／mL。产酶最适培养基组成为：麦芽汁（糖度6％）中添加6％桔皮粉,2％硫酸铵（w/v）。最适培养条件：起始pH4（灭菌前）,30℃,r/min,培养112h。Tween80可以促进C－491产酶。     

海洋来源链霉菌MY0504产纤溶酶的发酵条件优化

【目的】以发酵液纤溶酶活力为指标,优化海洋来源的链霉菌菌株MY0504的发酵条件。【方法】在菌株生长曲线及单因素试验基础上,采用Plackett-Burman设计筛选影响纤溶酶活性的主要因素,进一步用最陡爬坡试验及Box-Behnken中心组合设计法优化发酵条件。【结果】纤溶酶活性最高的发酵条件为:葡萄糖21.68 g/L,酵母粉25.31 g/L,NaCl5.0 g/L,K_2HPO_4·3H_2O3.0 g/L,MgSO_4·7H_2O 0.5 g/L,FeSO_4·7H_2O 0.02 g/L,装液量50 mL(250 mL摇瓶),接种量10%(体积比),初始pH 7.5,温度24°C,转速200 r/min,培养时间4.5 d。发酵液纤溶酶活性可达2 190.6 U/mL。【结论】确定了MY0504菌株产纤溶酶的最优发酵条件,为该酶的进一步分离纯化及性质研究奠定基础。     

Optimisation of culture conditions for production of eicosapentaenoic acid byMortierella elongate NRRL 5513

Summary WhenMortierella elongata NRRL 5513 was cultured in shake flasks at 25°C, mycelial growth reached a stationary phase at 48 h but maximum eicosapentaenoic acid (EPA) production was observed at 6 days. When incubated at 11°C, EPA production also continued to rise during the stationary phase of growth, reaching a maximum after 10 days. An initial culture pH of 6.1 was found to be optimum for EPA production. The effect of temperature on EPA production was dependent on medium constituents. In glucose and linseed oil supplemented media, optimum temperature for EPA production was 11 and 15°C respectively. A maximum EPA yield of 0.61 g/l was obtained in linseed oil (2%), yeast extract (0.5%) supplemented basal medium. Maximum EPA content as a percentage of lipids (15.12%) was observed when the latter medium was supplemented with 0.25% urea.     

植物乳杆菌CLP0279发酵生产低温SOD培养基的优化

【目的】提高植物乳杆菌CLP0279发酵生产低温超氧化物歧化酶(superoxide dismutase,SOD)的能力。【方法】在单因素实验基础上,采用Plackett-Burman (PB)设计、Box-Behnken (BB)设计和响应面分析法(RSM),对发酵培养基进行优化。【结果】植物乳杆菌CLP0279产低温SOD最佳发酵培养基(g/L)：玉米粉25.000,磷酸二氢钾2.600,磷酸氢二钾1.830,硫酸铜0.011,硫酸锌0.014。在最佳培养基条件下产酶活力达到194.82 U/ml,是优化前的1.36倍。【结论】通过响应面分析,对植物乳杆菌CLP0279发酵生产低温SOD的培养基进行优化,明显提高了产酶能力。确定了磷酸氢二钾、硫酸铜和硫酸铵为发酵培养基中影响酶活的3个关键因子。研究结果为SOD的发酵放大提供了依据。     

嗜中高温嗜酸古菌Ferroplasma thermophilum的培养条件优化

在中高温和较低pH条件下, Ferrroplasma spp. 是进行硫化矿生物浸出的重要微生物。Ferroplasma spp.为古菌,无细胞壁, 对矿浆浓度、搅拌剪切力以及溶液中的重金属离子等敏感, 很难得到高密度的纯培养, 给大规模的工业应用带来了一定难度。研究了F. thermophilum摇瓶培养时的最佳生长条件, 单因素考察结果表明最适培条件为: 温度50oC, 初始pH 0.5, 250 mL的摇瓶装液量为50 mL, 无机氮源(NH4)2SO4。通过正交试验确定了FeSO4·7H2O、酵母粉和蛋白胨最适组合为FeSO4·7H2O 40 g/L, 酵母粉0.3 g/L, 蛋白胨0.2 g/L。优化培养后, F. thermophilum 浓度达到了6.3×107个/mL, 40 g/L的FeSO4·7H2O在72 h内全部氧化完全。该结果可为该类古菌的扩大培养以及工业应用提供参考。     

嗜中高温嗜酸古菌Ferroplasma thermophilum的培养条件优化

在中高温和较低pH条件下, Ferrroplasma spp. 是进行硫化矿生物浸出的重要微生物。Ferroplasma spp.为古菌,无细胞壁, 对矿浆浓度、搅拌剪切力以及溶液中的重金属离子等敏感, 很难得到高密度的纯培养, 给大规模的工业应用带来了一定难度。研究了F. thermophilum摇瓶培养时的最佳生长条件, 单因素考察结果表明最适培条件为: 温度50oC, 初始pH 0.5, 250 mL的摇瓶装液量为50 mL, 无机氮源(NH4)2SO4。通过正交试验确定了FeSO4·7H2O、酵母粉和蛋白胨最适组合为FeSO4·7H2O 40 g/L, 酵母粉0.3 g/L, 蛋白胨0.2 g/L。优化培养后, F. thermophilum 浓度达到了6.3×107个/mL, 40 g/L的FeSO4·7H2O在72 h内全部氧化完全。该结果可为该类古菌的扩大培养以及工业应用提供参考。     

Production of mycelial biomass and exo-polymer by <Emphasis Type="Italic">Hericium erinaceus</Emphasis> CZ-2: Optimization of nutrients levels using response surface methodology

The Doehlert experimental design was used to optimize the production of mycelial biomass and exopolymer from Hericium erinaceus CZ-2 in this study. Statistical analysis showed that the linear and quadric terms of 3 variables: corn flour, yeast extract, and corn steep liquor had significant effects. The optimized combination of these 3 variables was confirmed through validation experiments. The optimal conditions for higher production of mycelial biomass (19.92 g/L) were estimated when the media composition concentrations were set as: 30.85 g/L, corn flour; 2.81 g/L, yeast extract; 16.9 mL/L, corn steep liquor; 10 g/L, glucose; 1 g/L, KH₂PO₄; and 0.5 g/L, MgSO₄·7H₂O; while a maximal exo-polymer yield (1.653 g/L) could be achieved when setting concentrations of: 32.71 g/L, corn flour; 2.35 g/L, Yeast extract; 14.42 mL/L, Corn steep liquor; 10 g/L, glucose; 1 g/L, KH₂PO₄; and 0.5 g/L, MgSO₄·7H₂O. The upscale production was also investigated using a 15 L fermentor using the optimized medium.     

产低温脂肪酶菌株CZW001发酵培养基优化研究

【目的】研究产低温脂肪酶菌株CZW001发酵培养基。【方法】在单因素试验的基础上, 采用Plackett-Burman (P-B)设计, Box-Behnken (B-B)设计和响应面试验设计(RSM), 在20 °C、pH 8.0、160?r/min发酵2 d条件下, 对发酵培养基进行优化。【结果】该菌株最适产酶培养基为(g/L): 葡萄糖7.68, 橄榄油21.93, 硫酸铵2.0, 磷酸二氢钾1.0, 硫酸镁0.27, 氯化钙0.3, 氯化钠20.0, 吐温-80 1.0。其最高酶活为62.8 U/mL, 比优化前提高了3.14倍。【结论】通过对产低温脂肪酶菌株CZW001发酵培养基优化研究, 明显提高低温脂肪酶活力。     

被孢霉菌发酵产生花生四烯酸的研究

研究了温度、培养基初始pH、碳源、氮源对被孢霉(Mortierella sp.)产生花生四烯酸的影响。正交试验结果表明,Mortierella sp.M10最佳培养基组成为(g/L):葡萄糖100,酵母膏10,KNO_3 4.0,KH_2PO_4 2.0,CaCl_2·2H_2O 0.1,MgSO_4·7H_2O 0.5,FeCl_3·6H_2O0.015,ZnSO_4·7H_2O 0.0075,CuSO_4·5H_2O 0.0005。采用最佳培养基及发酵条件,细胞干重和花生四烯酸产量分别为33.51g/L和0.827g/L。同时对摇瓶发酵过程进行了分析。     

抗肿瘤银杏内生真菌Aspergillus oryzae YX-5发酵 培养基的优化

【目的】对一株具有抗肿瘤活性的银杏内生真菌Aspergillus oryzae YX-5的发酵培养基进行优化。【方法】以发酵后的菌体干重、粗提物质量和粗提物抗肿瘤活性为指标,通过单因素实验选出合适的碳源和氮源,再以选出的碳源、氮源以及K2HPO4、MgSO4·7H2O、KCl共5个因素进行正交实验,确定出最适宜的发酵培养基配方。【结果】YX-5的最佳发酵培养基配方为葡萄糖45 g/L,蛋白胨8 g/L,K2HPO4 0.5 g/L,MgSO4·7H2O 0.2 g/L,KCl 1 g/L,FeSO40.01 g/L。优化后菌体干重、代谢物的产量和抗肿瘤活性分别提高了41.88%、226.52%和19.31%。【结论】通过对米曲霉菌(Aspergillus oryzae)YX-5的发酵培养基进行优化,明显提高了粗提物产量和抗肿瘤活性,这对后期规模化发酵中减小发酵规模和降低工作量十分有利。     

红曲多糖液态发酵工艺条件的优化

实验研究红曲多糖的液态发酵条件,得出优化后红曲菌ZKOA发酵工艺条件：蔗糖40g/L,酵母粉4．5g／L,KH2PO4·3H2O3．5∥L．MgSO40．4g／L,植物油2mL／L,接种量8％,种龄30h,发酵液起始pH5．0,发酵时间90h,在此条件下,摇瓶和中试发酵罐中的粗多糖质量浓度分别为7．6g／L和7．34g/L。