一种检测新型生物高分子材料聚γ-谷氨酸的新方法

通过聚γ-谷氨酸（γ-PGA）与氯化十六烷基吡啶（CPC）的乙酸钠水溶液反应形成混悬液,采用分光光度计于波长680nm处比浊,研究γ-PGA浓度与吸收度之间的线性关系,并研究本方法测定γ-PGA的稳定性、重现性和回收率。在一定pH值和离子强度下,γ-PGA在12.5~50μg/ml范围内与CPC的乙酸钠水溶液生成的混悬液在波长680nm处的吸收度与其浓度呈线性关系,R2=0.9939.本方法在2h内吸收度保持稳定(RSD=0.154%,n=10 ),CPC法测定浓度为5,10和 40μg/ml时的平均回收率分别为86%,77%和99.75%,RSD分别为0.14%,0.23%和0.025%应用比浊法测定γ-PGA的含量方便、简洁、重现性好,可用于γ-PGA浓度的检测。     

隐甲藻深层培养产生二十碳五烯酸的研究

二十碳五烯酸 (Ｃ2 0 :5 ,Ｅｉｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃａｃｉｄ ,简称ＥＰＡ)是一种重要的ω 3系列人体必需多不饱和脂肪酸 (Ｐｏｌｙｕｎ ｓａｔｕｒａｔｅｄｆａｔｔｙａｃｉｄｓ,ＰＵＦＡ) [1～ 2 ] 。自从Ｄｙｅｒｂｅｒｇｅ等人报道了二十碳五烯酸对防止和治疗血栓、关节硬化、抗炎症、抗癌、促进脑组织发育等方面具有明显效果以来 ,人们对它的营养和医药价值及生产方法进行了广泛的研究[3～ 6] 。目前 ,二十碳五烯酸主要来源于深海鱼油 ,但其产量不稳定 ,纯化工艺复杂且含有难以消除的鱼腥味 ,难以满足市场的需求。由于二十碳五…     

二十碳五烯酸的菌种选育及发酵条件

利用含亚麻子油的斜面培养基连续传工和逐渐降低培养温度,诱导筛选的方法,从大量丝状真菌中选育到一株产二十碳五烯酸（ａｌｌ－ｃｉｓ－５、８、１１、１４、１７－ｅｉｃｏｓａｐｅｎｔａｅｎｏｉｃ ａｃｉｄ）较高的被孢霉菌（Ｍｏｔｉｅｒｅｌｌａ ｓｐ．）ＳＭ４８１。研究得到最适培养基及最适培养条件。在最适培养及产二十碳五烯酸条件下,细胞干重和二十碳五烯酸产量分别为２８．８ｇ／Ｌ和０．１２７ｇ／Ｌ。     

二十碳五烯酸的菌种选育及发酵条件

利用含亚麻子油的斜面培养基连续传代和逐渐降低培养温度,诱导筛选的方法,从大量丝状真菌中选育到一株产二十碳五烯酸（all－cis－5、8、11、14、17－eicosopnthenoicacid）较高的被孢霉菌（Motierellasp．）SM481。研究得到最适培养基及最适培养条件。在最适培养及产二十碳五烯酸条件下,细胞干重和二十碳五烯酸产量分别为28．8g／L和0.127g／L。     

冬虫夏草及人工虫草菌丝体的氨基酸营养

本文研究了天然虫草菌与人工虫草菌的氨基酸含量。结果表明,天然虫草菌、人工虫草菌的总氨基酸含量稍有差异,但中性、酸性、碱性氨基酸和必需氨基酸在总氨基酸中所占百分比的高低基本一致。     

灵芝氨基酸研究

采用日立８３５－５０型氨基酸自动分析仪,测定了泰山地区的五种灵芝成品的氨基酸含量。结果表明,除色氨酸被水解破坏而未检出外,其它１７种氨基酸含量丰富,其氨基酸的总含量最高为１２．８７％,低的为４．６７６％,并含有７种人体必需氨基酸,值得深度开发利用。     

灵芝菌丝体深层培养及多糖提取工艺研究

灵芝ＳＤ－２２菌株培养条件,培养基组分、ｐＨ、通气量、培养时间等对该菌的生物量和多糖含量均有影响。初步确定了灵芝多糖提取工艺。在优化条件下,生物量为１．８６ｇ／１００ｍｌ培养基,灵芝多糖产量为５１ｍｇ／１００ｍｌ培养基     

花生四烯酸高产突变株的选育及其发酵调控

以拉曼被孢霉（Mortierellaramanniana）SM541为原始菌株,经过紫外线复合氯化锂诱变处理,得到突变株SM541－9,其生物量由126g／L提高到28．8g／L,油脂含量由5．8g／L提高到15.7g／L。花生四烯酸含量由321mg／L增加到623mg／L。传代实验表明,SM541－9具有良好的遗传稳定性,以葡萄糖为碳源,硝酸钾为氮源的最适培养条件下,10L罐发酵,生物量和花生四烯酸含量较原始菌株分别提高了45．2％和109.5％。在液体发酵过程中,菌丝老化、增大溶氧量、间歇流加葡萄糖都有利于花生四烯酸的合成。     

聚γ—谷氨酸生产菌地衣芽孢杆菌的He—Ne激光辐射效应

应用He Ne激光对聚γ 谷氨酸生产菌地衣芽孢杆菌BacilluslicheniformisATCC9945A进行辐射处理。研究了不同剂量激光辐射对菌体生长的影响 ,0 .48mw·cm-2 、15min的剂量利于菌体的诱变。 2种激光辐射方式中 ,“生理盐水菌悬液”辐射方式诱变效果较好。延滞期的菌体细胞对激光辐射最敏感 ,随着菌体培养进程 ,其激光辐射抗性逐渐增强。另外 ,发现菌体的芽孢对激光辐射不敏感。经聚γ 谷氨酸发酵试验和菌体扫描电镜观察 ,发现He Ne激光对地衣芽孢杆菌具有明显的生物刺激效应和诱变作用 ,并初步筛选到产聚γ 谷氨酸含量有较大变化的辐射变异菌株 ;同时 ,通过对变异菌株的细胞外、胞周间、细胞内三位区的PGA、RNA、DNA分析和发酵过程检测 ,进一步证实了He Ne激光对聚γ 谷氨酸生产菌地衣芽孢杆菌的诱变作用。     

分支杆菌噬菌体D29 Lysin B的表达、纯化及酶学性质分析

克隆表达噬菌体D29 LysinB(LysB)并对其酶学性质进行研究。以噬菌体D29基因组为模板,用PCR方法扩增lysB基因,与表达载体pET22b连接,将重组质粒转化至Escherichiacoli BL21(DE3)中表达,镍柱亲和层析(Ni-NTA)纯化可溶性表达产物,并对重组蛋白的活性进行分析检测。结果表明:成功构建了pET22b-lysB表达载体,并从1L的LB培养物中获得了33.2mg高纯度重组蛋白(His-LysB);His-LysB具有分解脂肪的能力,属于脂肪酶;生物化学特性分析表明:丁酸对硝基苯(pNPB)为水解底物,His-LysB热稳定性不佳,30℃以下比较稳定,随着温度的升高,稳定性逐渐降低;该蛋白具有较高的pH值适应性,pH5.0~9.5范围内稳定性较高;在23℃和pH7.5时酶活力最高,其比酶活为1.3U/mg;金属离子Zn2+、Cu2+、Mg2+、Mn2+和苯甲基磺酰氟(PMSF)抑制剂对酶活具有强烈的抑制作用。本研究为开发新的治疗结核药物提供了一个新的选择。