山东省猪圆环病毒2型的分离鉴定及其ORF2基因遗传进化分析

该研究对山东省某猪场疑似患有断奶仔猪多系统衰竭综合征(postweaning multisystemic wasting syndrome,PMWS)的病猪进行了临床病理学检测和病理组织切片观察。PCR检测阳性的病料处理后接种PK-15细胞,通过连续传代培养分离到一株猪圆环2型病毒(porcine circovirus type 2,PCV2)(SDWF20107),并对其进行ORF2基因扩增、遗传进化分析以及氨基酸突变位点分析。序列分析表明,该毒株与其他参考毒株的核苷酸相似性介于77.2%~99.6%之间,氨基酸相似性介于82.1%~99.6%之间;分离株与2.1d亚型的毒株位于同一分支,表明分离毒株属于2.1d亚型。根据流行毒株的特征,该猪场改用高效圆环2型病毒疫苗并调整了免疫程序,使该猪场患病猪群症状很快消失,恢复正常生产水平。该研究结果为猪场中PCV2的基因分型及其变异情况提供了参考资料,也为今后PMWS的流行病学研究和防控提供理论依据。     

中国4省猪场猪盖他病毒感染调查及病原分离鉴定

为了解我国猪盖他病毒(Getah virus,GETV)流行情况,本研究利用RT-PCR和病原分离方法在国内首次对晋、冀、豫、皖4省231个猪场的801份猪脏器和组织进行GETV的病原学调查及部分基因序列分析。试验结果显示,从4省的猪群样品中均检出GETV,其中从231个猪场中32个阳性养殖场的病料中检出37份阳性样品,猪场阳性率为13.9%,样品阳性率为4.62%,并首次从种公猪精液中检出GETV。对该病毒Cap和NSP3基因扩增产物的进行序列分析,发现目前中国猪群中的GETV与日本近年猪源、马源及蚊源毒株亲缘关系最近,其次中国近年蚊源和韩国猪源毒株;遗传进化分析显示49个已知序列的GETV可分为3个群或谱系,其中75.5%的毒株属于2000年以后报道的Ⅲ群,具有明显的地域和年代特征且未发现物种特征。从样品中分离出两株GETV HNNY-1和HNJZ-S2,其全基因组均为11 689bp,且与Cap和NSP3基因序列分析结果基本一致,均与2012年以来的所有日本毒株亲缘关系最近。本研究首次揭示在我国4省份猪群中均有GETV存在且种公猪也可带毒,应引起人们重视。鉴于国内外目前均把该病毒看作是人兽共患病病原,因此有必要对其在中国猪群中的感染谱、传播途径、流行规律、致病性及防控措施等进行深人研究,为实时了解其在人畜间的感染和流行情况、制定有效防控措施提供科学依据。     

猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征混合感染的快速检测及地域流行性分析

呼吸道和繁殖障碍疾病是猪场最常见的两种疾病,严重影响猪群的健康和正常生产,已经给世界养猪业造成了很大的经济损失[1].而且这两种疾病的病原复杂多样,不同的猪场病因可能完全不同,从而给疾病的诊断与防治带来了极大的困难.     

54株猪源肠外致病性大肠杆菌血清型、系统进化群和基因型

摘 要:[背景]近年来,我国规模猪场着重加强了对猪繁殖与呼吸综合征、猪圆环病毒病、猪瘟、猪伪狂犬病、猪链球菌病、副猪嗜血杆菌病等疫病的防控,却忽视了由肠外致病性大肠杆菌(Extraintestinal Pathogenic Escherichia coli,ExPEC)对猪群健康产生的潜在危害性,了解和掌握猪源ExPEC流行特征意义显著。[目的]探究临床分离的54株猪源ExPEC血清型、系统进化群和基因型的分布及流行特征。[方法]应用玻板凝集试验和试管凝集试验鉴定O抗原血清型,采用PCR技术检测系统进化群鉴定相关基因、28个ExPEC相关毒力基因以及多位点序列分型相关基因。[结果]受试菌中有52株确定了O抗原血清型,其中40株为O38 (74.1%),为优势血清型;8株为O127 (14.8%),O93和O11均2株(各占3.7%)。受试菌中44株为B2群(81.5%),是主要系统进化群,D群和B1群均5 株(各占 9.3%);28 个 ExPEC 相关毒力基因中ompA、ibeA、fimH、traT、focD、papA、iroN、iutA、iucD、cvaC、tsh、kpsMT Ⅱ、iss和ompT出现的频率超过50%,其中ompA和ibeA检出率分别达100%和96.3%,为高度流行的毒力基因,未检到cnf1,而bmaE、malX和iha更倾向分布于D群菌株中。受试菌共呈现31种ST型,其中ST10和ST648均5株(各占9.3%),ST410和ST101均4株(各占7.4%)。[结论]猪源ExPEC优势血清型及系统进化群在不同地区、不同时段上的流行分布均存在一定差异,呈现动态过程,O38作为优势血清型目前尚未见报道,具有高致病性的B2群和D群菌株有逐渐增多的趋势。ST型复杂多样,呈现遗传多样性,在一定程度上与人源和禽源ExPEC具有相同的遗传背景。     

猪瘟和猪繁殖与呼吸综合征混合感染的快速检测及地域流行性分析

呼吸道和繁殖障碍疾病是猪场最常见的两种疾病,严重影响猪群的健康和正常生产,已经给世界养猪业造成了很大的经济损失。而且这两种疾病的病原复杂多样,不同的猪场病因可能完全不同,从而给疾病的诊断与防治带来了极大的困难。多年的研究表明,呼吸道和繁殖障碍疾病的病原包     

猪圆环病毒2型（PCV2）核衣壳蛋白免疫原性的鉴定和应用及其多抗在PCV2感染诊断中的应用

猪圆环病毒2型ORF2编码与病毒毒力相关的结构蛋白--核衣壳蛋白(Cap),该蛋白可以用于PCV2感染的血清学调查,但不同区域的PCV2分离株的ORF2特别是其抗原表位序列存在一定的突变.本研究将PCV2浙江分离株ORF2的主要抗原表位以及PCV1 ORF2进行了原核表达,将分别纯化的融合蛋白Cap2s和Cap1s免疫SPF兔后制备多抗,并进一步分析了纯化蛋白的免疫原性和多抗的特性.Western blot结果表明无论Cap2s和Cap1s均能与两个多抗发生交叉反应,而PCV2或PCV1阳性猪血清只能分别特异性地识别Cap2s和Cap1s.IFA结果则证明两个多抗对于天然Cap蛋白无交叉反应性.利用Cap2s作为包被抗原对13个猪场的259份血清样品的PCV2抗体进行ELISA检测,平均阳性率为80.69%(209/259),而各猪场的阳性率差异较大(48.28%～100%).以上结果表明Cap2s可作为一个型特异性抗原用于浙江省本地猪场猪群血清中PCV2抗体的监控,而其多抗也可用于免疫组化对PCV2感染进行有效诊断.     

猪圆环病毒2型(PCV2)核衣壳蛋白免疫原性的鉴定和应用及其多抗在PCV2感染诊断中的应用

猪圆环病毒2型ORF2编码与病毒毒力相关的结构蛋白--核衣壳蛋白(Cap),该蛋白可以用于PCV2感染的血清学调查,但不同区域的PCV2分离株的ORF2特别是其抗原表位序列存在一定的突变.本研究将PCV2浙江分离株ORF2的主要抗原表位以及PCV1 ORF2进行了原核表达,将分别纯化的融合蛋白Cap2s和Cap1s免疫SPF兔后制备多抗,并进一步分析了纯化蛋白的免疫原性和多抗的特性.Western blot结果表明无论Cap2s和Cap1s均能与两个多抗发生交叉反应,而PCV2或PCV1阳性猪血清只能分别特异性地识别Cap2s和Cap1s.IFA结果则证明两个多抗对于天然Cap蛋白无交叉反应性.利用Cap2s作为包被抗原对13个猪场的259份血清样品的PCV2抗体进行ELISA检测,平均阳性率为80.69%(209/259),而各猪场的阳性率差异较大(48.28%～100%).以上结果表明Cap2s可作为一个型特异性抗原用于浙江省本地猪场猪群血清中PCV2抗体的监控,而其多抗也可用于免疫组化对PCV2感染进行有效诊断.     

仔猪副轮状病毒(C群)的检出

利用聚丙烯酰胺凝胶电泳法,从某猪场的20份仔猪腹泻标本中检出具有副轮状病毒(C群)RNA电泳图型者11份,其检出率高达55％。该病毒经口服接种未吮初乳的新生仔猪,可致急性水样腹泻,并排出大量病毒。经轮状病毒(A群)ELISA和副轮状病毒(B群)对流免疫电泳检测证明,它与轮状病毒(A群)和副轮状病毒(B群)均无血清学交叉。本文首次证实在我国猪群中存在有与国外报道的相同的猪副轮状病毒(C群),且可引起仔猪爆发流行,是仔猪腹泻不可忽视的病原之一。     

猪圆环病毒2型及猪繁殖与呼吸综合症病毒的快速检测

呼吸道疾病是猪场最常见的疾病之一,严重影响猪群的健康,已经给世界养猪业造成了巨大的经济损失[1,2].呼吸道疾病的病原复杂多变,不同的猪场病因可能完全不同,从而给疾病的诊断与防治带来了很大的困难.多年的研究表明,呼吸道疾病的病因可能包括猪繁殖与呼吸综合症病毒(Porcine reproductive and respiratory syndrome virus, PRRSV)、猪流感病毒、猪肺炎支原体(Mycoplasma hyopneumoniae,MH)、伪狂犬病病毒、猪圆环病毒2型(Porcine circovirus, PCV2)及猪链球菌或沙门氏菌等[3～8].其中PRRSV与PCV2为近几年新发现的猪重要的传染性病原,且呈不断的蔓延趋势,在呼吸道疾病发生过程中所起的作用日益增强[9,10].     

猪戊型肝炎病毒防控及研究策略分析

戊型肝炎为人畜共患病病原, 猪是主要的病毒储库。我国猪场戊肝病毒流行情况复杂, 猪感染率高, 同一地点存在3型或/和4型两种基因型混合污染。病毒存在基因重组和准种现象, 为病毒遗传进化提供了遗传基础。当前猪戊肝感染人的主要媒介为污染的猪肉及其制品, 其他感染机制和途径还有待进一步阐明。应加强对猪HEV与猪场其他流行病原体相互关系的研究, 同时应加强猪HEV相关信息的积累分析包括对猪HEV感染特性和遗传特性进行实时监测, 将猪HEV流行情况纳入兽医公共卫生预警体系, 实现常态跟踪。     

猪戊型肝炎研究进展

自从1997年发现猪戊型肝炎病毒（SHEV）以来,人们对猪戊型肝炎病毒已有一定的研究。就猪戊型肝炎病毒的病原学和分子生物学水平、传染途径、猪场中戊型肝炎病毒的存在情况、与猪接触的人群感染情况,以及诊断方法、研究概况作一综述,并提出了猪戊型肝炎病毒研究方面存在的问题及对猪戊型肝炎病毒研究的前景做了展望。     

传代人淋巴细胞免疫猪的免疫效果初探

目的用传代人淋巴细胞替代人T淋巴细胞进行猪的免疫,用于试制抗人T细胞猪免疫球蛋白(anti-human T lymphocyte porcine immunoglobulin,P-ATG)免疫猪血浆,并评价其免疫效果。方法大量培养传代人淋巴细胞至免疫所需浓度及数量,采用常规猪免疫程序进行2次基础免疫及1次加强免疫,获得免疫猪血浆,用E玫瑰花环形成抑制试验和淋巴细胞毒试验进行效价检测。结果 3批免疫猪血浆的E玫瑰花环形成抑制试验结果均达到1∶1 000(花环形成率均小于对照组平均花环形成率的75%),淋巴细胞毒试验结果均达到1∶500(淋巴细胞死亡率均大于20%),效价均达到《中华人民共和国药典》2015版(三部)中生产用免疫猪血浆的效价标准。结论传代人淋巴细胞可作为人T淋巴细胞的替代免疫原进行猪的免疫,获得了效价合格的免疫猪血浆,用于P-ATG的制备。     

分析建设研究型医院的探索与实践

研究型医院是以医疗技术及医学知识为基础,坚持以临床医疗工作及科研教学为基本任务,以此来创新科学研究、培养优秀人才,不断地推动人类健康与卫生事业的持续稳定发展、推动临床的诊治水平,并且以完善及制定临床医学规范与标准为标志的新型医院.研究型医院在实践过程中要努力完成人才队伍的建设,对后勤服务保障进行优化,坚持教、医、研的发展齐头并进以及累积经验等.发展永远都是硬道理,离开了发展或者是发展的慢了,那么就谈不上科学发展,但要想快速发展,就必须建立在提高质量、优化结构等方面的基础上,这样才能实现结构、效益、质量以及速度统一的可持续发展状态.因此,我们要立足快速发展,发展中的战略机遇要紧紧抓牢,要着眼实现跨越并坚持科学发展,这样我们与世界顶尖水平的差距才能快速缩小.文中对建设研究型医院的一些主要措施以及基本发展思路进行了表述,以供相关参考.     

免疫检查点阻断剂促进T细胞应答的影响因素

抑制免疫调节检查点,比如PD-1/PD-L1与CTLA-4,是癌症免疫治疗的前沿科学。然而这样的免疫疗法只对少部分患者的癌症形成有效。本文通过分析肿瘤的成瘤原因、微环境及其自体相关因素后发现这些因素均会导致免疫检查点阻断剂在体内失去T细胞免疫应答。因此,本文描述了免疫系统与宿主肠道微生物群可调控癌症免疫治疗的应答,并且在使用免疫检查点阻断剂的同时或之前调节肠道微生物群可以优化治疗效果。     

γδT细胞相关的趋化因子受体

γδT细胞是一群异质性的免疫活性细胞,根据表面标志和功能可将其分为不同亚群。γδT细胞表达的趋化因子受体各异,趋化因子受体的表达与γδT细胞在抗感染、抗肿瘤和自身免疫中的功能发挥密切相关,现就近年来与γδT细胞相关的趋化因子受体研究进展作一综述。     

新淮猪若干数量性状遗传特性的研究

新淮猪是由当地淮猪和大型约克夏杂交育成的新猪种。自1954年至1961年已获得符合原订育种指标的理想型核心群。最近十多年来,尤其是通过无产阶级文化大革命,积极开展群众性的选育活动,新淮猪不仅在数量上有了很大的发展,而且在质量上也有明显的提高。 近年来,国外应用遗传参数来预测选择效果,改进选种方法,在猪育种和提高猪群生产方面取得了一定的成效,但还不臻完善。我国畜牧工作者也结合国内的实际情况进行了这方面的研究,并在改进选种方法上有了新的进展。 对于新淮猪质量性状的遗传特性已有研究。本研究旨在测定新淮猪数量性状的遗传力和遗传相关等遗传参数,以期预测选择效果,并结合我国劳动人民的选种经验,改进新淮猪的选种方法,从而加速新淮猪的育种进程和生产性能的提高。     

贵州小型猪主要病原微生物与寄生虫的控制

封闭群实验用贵州小型猪Sus scrofa domestica var. mino guizhounensis Yu是目前国内最主要的实验用小型猪种群之一(甘世祥, 1994).开展实验动物微生物与寄生虫的控制与监测,对保证实验动物和动物实验的质量和维护人类健康具有重要意义(孙靖,2005).本研究探索了环境消毒、体内外驱虫、疫苗接种等措施对贵州小型猪病原生物的携带和免疫状况的影响.     

生饲干喂养猪

一、生饲干喂提高了猪群生产水平 对繁殖猪群(包括种公猪、检定母猪、成年母猪)采取混合精料面、干草粉、切碎的野菜或青贮“三合一”加水湿润分顿次生干喂,另设常备饮水槽。 对育成猪群(吃乳仔猪、断乳仔猪、后备猪、育肥猪)采取混合精料面、干草粉“二合一”食槽内不分顿次常备料,分顿补喂青饲料,另设常备饮水槽。十多年来,不论大猪、小猪、怀胎猪、泌乳猪,均用上法喂养近万头猪群的产仔、成活、增重指标不断提高。出现过一窝产     

浙江省某猪场暴发Ⅱ型猪链球菌感染及病原诊断和药敏试验

报告2003年秋季浙江省某猪场Ⅱ型猪链球菌感染猪群的微生物学检查和药物敏感试验结果,以及采取的控制疫情措施及其效果.从112头病、死猪中分离出71株猪链球菌疑似菌株,经革兰染色镜检、生化反应和特异性诊断血清的玻片凝集,均鉴定为Ⅱ型猪链球菌.上述Ⅱ型猪链球菌分离株对阿莫西林等5种抗生素敏感,但对庆大霉素等7种抗生素耐药.采取饲养环境和饲料消毒、发病猪隔离、阿莫西林和环丙沙星治疗、未发病猪疫苗接种等措施,有效地控制了疫情,未发生人的感染.     

猪胞内劳森菌感染的免疫应答与检测技术研究进展

胞内劳森菌(Lawsonia intracellularis, LI)常引起猪精神不振、食欲减退、血样下痢或突然死亡,严重损害养猪业。猪群感染该菌在肠道诱导免疫应答的研究较少。因该菌胞内寄生,基于细菌不同感染阶段动物免疫应答特点,检测方法会有所侧重。本文重点阐述了胞内劳森菌感染后机体免疫应答的特点,并对其检测技术进行综述,以期为新型检测技术研发及疫病防控提供参考。