抗肿瘤药阿霉素诱导Wnt通路抑制因子的表达

研究抗肿瘤药阿霉素对Wnt通路抑制因子FrpHE(frizzled-related protein)和DKK-1(Dickkopf-1)表达的作用.将抗肿瘤药阿霉素加入到人肝癌HepG2(HepG2,含野生型p53;Hep3B,p53缺失)、人大肠癌(Lovo,含野生型p53)和人神经胶质瘤细胞(U251,p53突变)细胞株中.以RT-PCR技术检测阿霉素对Wnt通路抑制因子FrpHE和DKK-1的表达调节作用,以流式细胞术检测在肿瘤细胞中Wnt通路的关键调节因子β-catenin的表达.在加入阿霉素24h后FrpHEmRNA表达水平在人肝癌细胞(HepG2,含野生型p53;Hep3B,p53缺失)中与对照组相比表达水平显著增加.在人大肠癌细胞(Lovo,含野生型p53)和人神经胶质瘤细胞(U251,p53突变型)细胞中,未见FrpHE mRNA表达.DKK-1mRNA表达水平在人肝癌细胞(HepG2,含野生型p53;Hep3B,p53缺失)、人大肠癌细胞(Lovo,含野生型p53)和人神经胶质瘤细胞(U251,p53突变型)中与对照组相比表达水平显著增加.β-catenin的阳性细胞百分比强度和平均荧光量强度与对照组相比,表达水平降低.提示化疗药阿霉素能明显诱导抑制剂FrpHEmRNA和DKK-1mRNA的表达.     

盐酸洛拉曲克在体内、外对S-180细胞株的抗增殖作用

研究合合成新型胸苷合成酶抑制剂盐酸洛拉曲克在体内、外对S－180细胞株及正常人胚肾HEK293细胞的抗增殖作用;使用MTT法测定抑制率,以提高荷腹水瘤小鼠存活时间及荷实体瘤瘤重减轻情况为指标考察盐酸洛拉曲克对S－180所致肿瘤的治疗作用。结果表明：在体外盐酸洛拉曲克对S－180肿瘤细胞株有较强的细胞毒作用,对正常细胞HEK293抑制作用较弱（P＜0.05）;体内实验显示盐酸洛拉曲克可明显提高荷腹水瘤小鼠的存活时间,减轻荷实体瘤小鼠的瘤重,疗效与氟尿嘧啶（10mg/kg）相当（P＞0.05）或更好（P＜0.05）。可见,盐酸洛拉曲克在体内、外对S－180肿瘤细胞有显著的抗增殖作用,在体外对肿瘤细胞 具有选择性的抗增殖作用。     

米糠多糖的提取纯化及其成分结构和活性分析

研究米糠多糖（ｒｉｃｅ ｂｒａｎ ｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ,ＲＢＳ）的提取纯化方法,并对其进行组成成分,化学结构和物理性质分析以及活性测定,热水抽提法从稻糠中制取粗制ＲＢＳ多糖,层析分离纯化得到精制多糖,对精制多糖进行元素分析、糖和蛋白含量测定、红外特征吸收光谱测定和碳谱磁共振测定,以及对Ｂａｌｂ／ｃ小鼠同源Ｍｅｔｈ－Ａ纤维肉瘤抑瘤活性测定等。测定结果显示ＲＢＳ多糖为一种以α－１,４和α－１,     

白细胞介素-1β对骨髓基质细胞膜电位及细胞内Ca2+和pH的影响

采用荧光染料 Ｄｉ Ｂ Ａ Ｃ４（３）, Ｆｌｕｏ３／ Ａ Ｍ 和 Ｓ Ｎ Ａ Ｌ Ｆ Ｃａｌｃｅｉｎ／ Ａ Ｍ 分别标记小鼠骨髓基质细胞（ Ｂ Ｍ Ｓ Ｃ）,在激光扫描共聚焦显微镜下直接监测重组人白细胞介素１β（ Ｉ Ｌ１β）刺激后细胞膜电位,细胞内游离 Ｃａ２＋ 浓度和胞浆 ｐ Ｈ 的实时动态变化． 结果发现： Ｉ Ｌ１β加入测定体系后浓度依赖性地引起 Ｂ Ｍ Ｓ Ｃ 膜电位的迅速改变． 低浓度时发生去极化反应,高浓度时发生超极化反应． 非受体方式作用的 Ｉ Ｌ１β肽段 １６３１７１ 对膜电位无影响． Ｉ Ｌ１β不影响细胞内 Ｃａ２＋ 的浓度和胞浆ｐ Ｈ． 研究表明膜电位的变化为 Ｉ Ｌ１ 受体后早期事件,它与细胞内 Ｃａ２＋的浓度和胞浆 ｐ Ｈ 的调节无关．     

贵州小型猪主要病原微生物与寄生虫的控制

封闭群实验用贵州小型猪Sus scrofa domestica var. mino guizhounensis Yu是目前国内最主要的实验用小型猪种群之一(甘世祥, 1994).开展实验动物微生物与寄生虫的控制与监测,对保证实验动物和动物实验的质量和维护人类健康具有重要意义(孙靖,2005).本研究探索了环境消毒、体内外驱虫、疫苗接种等措施对贵州小型猪病原生物的携带和免疫状况的影响.     

蒜头果的濒危原因研究

蒜头果是我国特有的常绿阔叶树种 ,形态解剖上既有原始性状 ,又有较进化的特征 ,对研究铁青树科的分类有一定意义。它的种仁油脂可作为合成麝香酮的理想原料 ,被列为国家二级保护植物。目前已陷入易危的境地。本文对天然蒜头果的地理分布与资源、生物学和生态学特性及其环境因子影响等方面进行了分析讨论 ,试图揭示其濒危原因。研究结果表明 ,蒜头果固有的生物学特性不利于种群的发展 ,动物对蒜头果果实的取食和危害又使得本来就有限的种子数量大为减少 ,人类活动的破坏不仅直接减少了蒜头果资源 ,同时也破坏了蒜头果的适生环境 ,从而不利于蒜头果的生长和天然更新。     

多层螺旋CT测量成年贵州小型猪活体肾参考数据

目的通过测量成年贵州小型猪肾脏各种径线值及体积,建立贵州小型猪肾脏数据。方法采用西门子双源CT对12头成年贵州小型猪(雄性6头,雌性6头)进行薄层容积扫描,原始数据经Aquarius iNtuition4.4软件进行MRP及VR重组,在横断位正中层面测量双肾前后径及左右径,在冠状位最大面测量双肾长径及短径,计算小型猪体积及双肾体积,双肾长径与短径比值,采用统计学软件对肾长径、长短径比值与肾脏体积,肾脏体积与小型猪体积及体重做相关性分析,P0.05为差异有统计学意义。结果左肾前后径及左右径分别为(40.40±1.67)mm及(27.47±1.40)mm,长径及短径分别为(80.36±2.74)mm及(31.79±1.99)mm,左肾体积为(52.78±2.25)cm3,左肾长径与短径比值为(2.42~2.71)∶1;右肾前后径及左右径分别为(40.95±1.43)mm及(26.90±0.65)mm,长径及短径分别为(79.03±2.38)mm及(32.04±2.34)mm,右肾体积为(51.91±2.25)cm3,右肾长径与短径比值为(2.33~2.77)∶1。双肾长径与肾脏体积呈高度正相关(r左=0.92,P0.05;r右=0.88,P0.05),肾脏体积与小型猪体积呈正相关(r左=0.90,P0.05;r右=0.81,P0.05),与体重也呈高度正相关(r左=0.96,P0.05;r右=0.98,P0.05),但肾脏长短径比值与体积呈负相关(r左=-0.51,P0.05;r右=-0.67,P0.05)。结论多层螺旋CT及其后处理软件可准确测量贵州小型猪活体肾脏的多项影像学数据,为人类肾脏疾病的动物模型研究提供参考。     

外源性p53诱导肝癌细胞Wnt通路抑制因子Dickkopf-1的表达

研究p53对Wnt通路抑制抑制因子Dickkopf-1(DKK-1)表达的调节作用,将携带p53基因的复制缺陷型腺病毒载体(Adp53)导入到p53缺失的人肝癌细胞株Hep3B中,以RT-PCR技术检测p53对DKK-1表达的调节作用．检测结果表明DKK-1 mRNA水平在转染p53 20h后即有明显升高,其中以32h达最高水平,随后逐渐降低,量效关系研究表明在转染剂量为0、5、5、50pfu／cell的Adp53时DKK-1mRNA表达均有显著增高,尤以50pfu／cell时表达水平最高。提示p53能明显诱导Wnt通路抑制因子DKK-1的mRNA表达。     

药物靶点的选择和验证

药物靶点的选择和验证是药物开发研究中一个重要的环节.随着现代分子生物学技术的发展和人类基因组计划的完成,出现了大量可供治疗干预的新型分子靶点,对这些新型分子靶点进行验证成为药物开发科学家所面临的重要任务.为此,就药物靶点及其选择、验证所需的分子技术基础作一简要综述.     

二咖啡酰奎宁酸对成纤维细胞增殖与功能的影响

探讨二咖啡酰奎宁酸（IBE5）对成纤维细胞活力,增殖及功能的影响。研究IBE5抗肝纤维化的机制,实验采用体外培养的NIH／3T3细胞作为成纤维细胞的替代模型,常规培养,质量深度为250,125,62.5,31.25,15.6,7.8mg/L的IBE5加入细胞中培养24h;[^3H]-TdR掺入法测定细胞增殖率;[^3H]-Pro掺入法测定细胞活力;[^3H]-Pro掺入,胶原酶消化法测定细胞内外胶原生成率,结果显示以上6个浓度的IBE5对细胞均无毒性,各组均可显著抑制细胞增殖,促进细胞活力,明显抑制胶原和透明质酸的合成,以250mg/L为最佳浓度,IBE5能显著抑制3T3细胞增殖,胶原和透明质酸合成并对细胞活力有促进作用,IBE5在 外具有显著的抗肝纤维化作用,对于防治肝纤维化可能有一定的临床意义和应用前景。