高效液相色谱测定发酵液中1，3－二羟基丙酮（DHA）方法的建立

摘要：本文建立了简单且准确的测定1,3-二羟基丙酮（DHA）的高效液相色谱（HPLC）方法。以Alltima C18（5μm,250×4.6mm）为分离柱,5％甲醇水溶液（0.05％H3PO4调pH至3.0）,流速为1mL/min,用紫外检测器在200nm处检测DHA。结果测得DHA标准样品的保留时间为6.2min,并测得DHA的线性范围为0.1～10.0 g/L。用HPLC法测得以甘油为底物发酵产DHA发酵液中DHA含量为6.2 g/L。并证明高效液相色谱法可有效应用于产DHA发酵过程中产物的检测。     

2种检测灯盏花素血药浓度方法的比较

目的：建立测定Beagle犬血浆中灯盏花素浓度的反相高效液相色谱法和液相-质谱联用法,并将其进行多参数的两两比较。方法：采用液-液萃取法处理血清,反相高效液相色谱法测定,流动相为甲醇-水（pH3．0）=42：58,EclipseXDB-C18为固定相;将同样的样品用液相-质谱法开展平行检测;将所测得的数据做两两对比,采用SPSS统计软件进行分析。结果：2种方法测定的数据具有良好的相关性（r=0．982,P〉0．05）;最低检测限前者为0．05μg／mL,后者为0．01μg／mL,反相高效液相色谱法的最低检测限和灵敏度不及液相-质谱联用法。结论：反相高效液相色谱法可用于灯盏花素毒代动力学研究,与液相-质谱联用法检测结果无显著差异,且费用较低,不失为-种低成本且行之有效的检测方法。     

生化指标与2型糖尿病患者实验诊断及预后相关性研究

目的：研究BMI、HbA1c、病程、相关代谢指标与2型糖尿病（T2DM）诊断及预后的关系。方法：收集379例T2DM患者与383例健康体检者,采用生化分析仪分析二组人群的生化指标,采用高效液相色谱法检测T2DM组HbA1c水平,胰岛素及C肽采用电化学发光法检测。计量资料采用t检验、单因素方差及相关性分析,计数资料采用卡方检验分析。结果：对各组结果进行比较显示（1）T2DM患者的BMI、FBG、TG、LDL-C、BUN、uA、HbA1c水平明显高于正常对照组（P均〈0．01）,HDL-C、CREA水平明显低于对照组（P均〈0．01）;（2）TC、LDL—C、BUN、CREA及2hINS与年龄相关。（3）肥胖组的TG、CREA、UA、FCP、2hCP高于非肥胖组（P均〈0．05）;（4）初诊T2DM患者的FBG、TG、HbA1c、LDL-C水平明显高于5年以上患者（P均〈0．05）,而HDL-c低于5年以上患者（P〈0．05）;（5）HbA1c≥11％组的FBG水平明显高于HbA1c≤8％及HbA1c=8-11％组（P〈0．01）,而UA、FINS、FCP、2hINS、2hCP水平明显低于HbA1c〈8％组（P均〈0．01）;FBG、TG与HbA1c水平呈正相关（P〈0．05）;FINS、FCP、2hINS、2hCP、UA与HbA1c水平呈负相关（P〈0．01）;结论：BMI、FBG、TG、LDL-C、BUN、UA、HDL-C、CREA均可作为T2DM诊断的参考指标。其中LDL—C、BUN、CREA、2hINs指受年龄影响。TG、CREA、uA、FCP（空腹C-肽）、2hCP与肥胖相关。FBG、TG、HbA1c、LDL-C、HDL-C与病程相关;FBG、TG、HbA1c、FINS、FCP、2hINS、2hCP、UA与HbA1c相关。     

高效液相色谱法测定丙谷胺片的含量

丙谷胺是一种胃泌素拮抗剂,其含量测定方法《中国药典》2000年版二部及《中国药典》2005年版二部采用的是滴定法,本文试用高效液相色谱法（HPLC法）测定其含量,此法操作简便,重现性好,结果准确可靠。     

高效液相色谱法(HPLC)在微生物分析鉴定中的应用

高效液相色谱法(HPLC）是细菌化学分类鉴定的有效方法。本文就高效液相色谱法(HPLC)在细菌的DNA G C含量测定、枝菌酸分析、醌类测定和多胺分析在细菌分类鉴定中的应用进行综述。     

HPLC同步测定多种合成色素含量检测结果的不确定度评定

目的：分析高效液相色谱法（HPLC）同步测定多种色素含量的不确定度。方法：通过评定各不确定度分量,计算合成标准不确定度及扩展不确定度。结果：HPLC同步测定多种色素含量的扩展不确定度范围在3.97%~7.13% （k=2）;天平称量和提取回收率对合成色素的测量结果不确定度影响最大。结论：本研究建立了简便易行的HPLC同步测定肉制品中色素含量检测结果的不确定度评定方法。     

拔毒消炎软膏质量控制研究

目的研究拔毒消炎软膏的质量控制方法。方法用薄层色谱法(HPLC)对制剂中大黄、黄柏进行定性鉴别,高效液相色谱法测定大黄酚的含量。结果定性鉴别薄层色谱斑点特征明显;高效液相色谱法测定含量,大黄酚在0.061~0.304μg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.9954),平均加样回收率为98.68%,RSD=1.39%。结论采用薄层色谱法定性、高效液相色谱法定量,简便准确、重现性良好,可有效控制该制剂质量。     

反相高效液相色谱法测定色盐杆菌新种ST307的DNA G+C mol%含量

目的:使用反相高效液相色谱法测定色盐杆菌新种ST307的DNA G+C mol%含量.方法:以Escherichia coli DH5α为标准菌株,采用90%重蒸水10%甲醇为流动相,检测波长260nm,流速1ml·min-1,在Venusil MP C18柱上对四种碱基进行分离.结果:DNA碱基分离效果好,以外标法计算得到标准菌株DH5α的DNA G+C mol%含量为50.3%,待测菌株ST307的DNA G+C mol%含量为60.5%.结论:采用反向高效液相色谱法测定色盐杆菌的DNA G+C mol%含量准确可靠.     

高效液相色谱法测定蔬菜中β-胡萝卜素的不确定度评定

建立高效液相色谱法测定蔬菜中β-胡萝卜素（β-carotene）的不确定度评定数学模型,计算β-胡萝卜素测量结果的不确定度。胡萝卜和菠菜中β-胡萝卜素的扩展不确定分别为0.684和0.444 mg/100g,k=2,P=95%。影响β-胡萝卜素HPLC法测定的不确定度来源主要是样品均匀性、前处理过程及HPLC仪器定量重复性,不确定度评定有利于完善测定结果的准确性。     

蔬菜中有机磷农药残留的高效液相色谱分析

应用高效液相色谱法测定蔬菜中有机磷农药残留量。采用高效液相色谱法,C18色谱柱、流动相为甲醇：水(V：V)=70：30,用紫外检测器检测。测定了蔬菜中甲1605和久效磷两种常用有机磷农药的残留量。该法相关性好,线性范围广,精密度高,准确度好。     

生化指标与2 型糖尿病患者实验诊断及预后相关性研究

目的：研究BMI、HbA1c、病程、相关代谢指标与2 型糖尿病（T2DM）诊断及预后的关系。方法：收集379 例T2DM 患者与 383 例健康体检者,采用生化分析仪分析二组人群的生化指标,采用高效液相色谱法检测T2DM 组HbA1c 水平,胰岛素及C 肽 采用电化学发光法检测。计量资料采用t 检验、单因素方差及相关性分析,计数资料采用卡方检验分析。结果：对各组结果进行比 较显示（1）T2DM 患者的BMI、FBG、TG、LDL-C、BUN、UA、HbA1c 水平明显高于正常对照组（P均<0.01),HDL-C、CREA 水平明 显低于对照组（P均<0.01);（2 ）TC、LDL-C、BUN、CREA及2hINS 与年龄相关。（3）肥胖组的TG、CREA、UA、FCP、2hCP 高于非肥 胖组（P 均<0.05);（4 ）初诊T2DM 患者的FBG、TG、HbAlc、LDL-C 水平明显高于5 年以上患者（P均<0.05),而HDL-C 低于5 年 以上患者（P<0.05);（5 ）HbA1c≥ 11%组的FBG水平明显高于HbA1c≤ 8%及HbA1c＝8～11%组（P<0.01）,而UA、FINS、FCP、 2hINS、2hCP 水平明显低于HbA1c<8%组（P 均<0.01);FBG、TG 与HbA1c 水平呈正相关（P<0.05）;FINS、FCP、2hINS、2hCP、UA 与HbA1c 水平呈负相关（P<0.01);结论：BMI、FBG、TG、LDL-C、BUN、UA、HDL-C、CREA均可作为T2DM诊断的参考指标。其中 LDL-C、BUN、CREA、2hINS 指受年龄影响。TG、CREA、UA、FCP(空腹C-肽）、2hCP与肥胖相关。FBG、TG、HbAlc、LDL-C、HDL-C 与病程相关;FBG、TG、HbA1c、FINS、FCP、2hINS、2hCP、UA与HbA1c 相关。     

HPLC法测定葛花中鸢尾苷的含量

目的：测定8个产地葛花中鸢尾苷的含量,建立葛花中鸢尾苷含量测定的HPLC方法。方法：采用GRACEC18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速为0.8mL/min,紫外检测波长为265nm;柱温为室温。结果：鸢尾苷的峰面积（Y）与浓度（X）在11.8～236.4μg/mL范围内具有良好线性关系,Y=34920X-1156.5,r=0.9995（n=7）;平均加样回收率为103.66%,RSD〈2%（n=9）;测得8批不同产地的葛花药材中鸢尾苷含量在37.00～113.1mg/g。结论：建立了高效液相色谱法测定葛花中鸢尾苷含量的方法,该法准确、可靠,可用于葛花中主要成分鸢尾苷的含量测定;不同产地葛花中均检测到鸢尾苷,但其含量有一定区别。     

HPLC法测定南瓜中β-胡萝卜素

目的：建立高效液相色谱法（HPLC）测定南瓜中β-胡萝卜素含量的方法,并对12份南瓜样品中β-胡萝卜素含量进行测定。方法：色谱柱：Eclipse XDB-C18柱（4.6mm×250mm,5μm）;流动相：水（A）+丙酮（B）;检测波长：450nm。结果：南瓜中β-胡萝卜素在35 min内得到较好分离,重复性好（RSD=5.11%）,精密度高（RSD=0.70%）,稳定性好（RSD=2.73%）,加标回收结果准确可靠（RSD=2.06%）。12份南瓜样品中β-胡萝卜素含量差异较大（8.9～94.4 μg/g）,印度南瓜16296-1中β-胡萝卜素含量最高,其次为中国南瓜9132、印度南瓜16291-2和16167-8,这3种南瓜中β-胡萝卜素含量较接近（均≥76 μg/g）,含量最低的为印度南瓜16185-6。结论：建立了一种快速测定南瓜中β-胡萝卜素的高效液相色谱方法,该方法准确、可靠;12份南瓜样品中β-胡萝卜素含量差异较大。     

HPLC法同时测定鸡矢藤中熊果酸和齐墩果酸的含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定鸡矢藤中熊果酸和齐墩果酸的含量。方法：色谱柱为DiamonsilTM C18（250×4.6 mm,5滋m）,流动相为甲醇-0.05mol.L-1磷酸溶液（93∶7）为流动相,检测波长210 nm,进样量10滋L。结果：熊果酸在21.28滋g.mL-1～212.8滋g.mL-1范围内线性关系良好（r=0.9997）,平均回收率为97.79%（RSD=1.30%）;齐墩果酸在24.02滋g.mL-1～240.2滋g.mL-1范围内线性关系良好（r=0.9996）,平均回收率为98.36%（RSD=1.11%）。结论：该方法简便、灵敏、准确,可用于鸡矢藤药材的质量评价。     

银耳多糖单糖组成分析的三种色谱方法比较

为选择一种准确快捷的方法测定银耳多糖的单糖组成,对薄层色谱法(TLC)、气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)三种色谱方法进行比较。结果表明,前两种方法的测定结果均不理想,而HPLC法,操作简便,灵敏度高,分离效果好,信息完整。测定结果为由葡萄糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、木糖、岩藻糖组成,其摩尔比为0.24∶1.00∶0.06∶0.29∶0.25。HPLC法对酸性杂多糖组成糖分析是一种比较理想的选择。     

白刺链霉菌（Streptomyces albospinus）CT205产环己酰亚胺含量测定方法的建立

建立白刺链霉菌（Streptomyces albospinus）CT205代谢产环己酰亚胺含量的检测方法,为菌株CT205的开发利用提供技术支持。采用高效液相色谱法（HPLC）、生物活性法和分光光度法等三种检测手段分别测定菌株CT205发酵上清液及粗提物中活性物质环己酰亚胺(Cycloheximide)的含量。三种方法测定环己酰亚胺标准品均具有较好的线性关系,其中相关系数R²_HPLC法（0.999 2）>R²_{生物活性法}（0.993 7）≈R²_{分光光度法}（0.996 5）。HPLC法及生物活性法分别测定CT205发酵液及粗提物中活性物质含量分别为72.87、1 555.70及66.15、1 259.00μg/mL,HPLC法与生物活性法测定的发酵上清液中活性物质含量误差在+6.72 μg/mL。HPLC检测方法的准确性及灵敏度均高于生物活性法,适用于样品含量的准确测定,生物活性法适用于菌株诱变筛选及条件优化实验产生的大批量样品的测定及比较,分光光度法不适用检测杂质含量较多的样品。     

泥胡菜中芦丁含量分析

建立高效液相色谱法测定泥胡菜中芦丁的方法,优化芦丁的提取工艺。使用Diamonsil（TM）C18柱,流动相：乙腈-0．4％磷酸溶液（20：80）,检测波长：255nm,流速：1ml／min,柱温：30℃。样品用50％乙醇超声提取30min提取率最高为0．166％;芦丁在0．1～2．0μg范围内与峰面积呈良好的线性关系（r=0．9994）,平均加样回收率99．3％（RSD=0．8％,n=5）。该方法准确、快速、重现性好,可作为控制泥胡菜质量的有效测定方法。     

高效液相色谱检测聚乙二醇化天花粉蛋白方法比较

目的：建立聚乙二醇化天花粉蛋白纯度的检测方法。方法：使用分子筛色谱法和反相高效液相色谱法测定了聚乙二醇天花粉蛋白。结果：聚乙二醇天花粉蛋白纯度分别为100％和98．14％。结论：高效液相色谱法简单易行、准确、灵敏度高,适用于聚乙二醇化天花粉蛋白纯度检测。     

反相高效液相色谱法对大鼠体内菲达司他的药代分析

建立反相高效液相色谱（RP—HPLC）测定大鼠血浆中菲达司他浓度的方法,在此基础上对菲达司他在大鼠体内的药代动力学进行初步研究。菲达司他的血浆样品利用乙酸乙酯提取法进行处理,色谱检测条件为用安捷伦Zorbax Eclipse XDB C18色谱柱,紫外检测波长200nm,流动相中v（水）：v（甲醇）为72．28,流速1mL／min,柱温30℃。建立的RP—HPLC法线性范围为0．8～400ug／mL（R=0．9997）。提取回收率大于95％,日内、日间精密度相对标准差（RSD）小于2％。本法简便、准确,适用于菲达司他药代动力学的研究;菲达司他在大鼠体内的药代动力学过程二室模型．     

尿蛋白定性与定量检测结果的差异性和相关性分析

目的：探讨尿液干化学法及免疫透射比浊法检测尿白蛋白结果的差异性及相关性。方法：对514例住院患者随机尿标本进行尿液干化学法及免疫透射比浊法尿蛋白的检测。结果：尿液干化学法阳性率为82．1％,免疫透射比浊法阳性率为72．8％。两种方法检测结果均为阴性标本的符合率为98．9％,为（±）的标本二者符合率为69．7％,为㈩的标本二者符合率为75．6％,为（＋＋）的标本二者符合率为67．2％,为（卅）标本中二者符合率为42．5％,为（＋＋H）标本二者的符合率为37．5％。两种方法的检测结果有显著性差异（P〈O．05）;UmAlb／Ucr、NAG、和NAG／Ucr与UmAlb具有显著相关（P〈0．05）,且UmAlb／Ucr与UmAlb的相关性最高。两种方法所得等级结果比较,＋＋～卅之间差异有统计学意义（P〈0．05）,-～±、±～＋、＋～＋＋、＋＋＋～＋＋＋＋之间差异均无统计学意义（P〉0．05）。结论：尿蛋白定性与定量检测结果存在显著性差异,而UmAlb／Ucr与UmAlb相关性较高。在泌尿系统疾病的诊断中,检测尿中UmAlb比尿常规更有意义。