高效液相色谱法测定蔬菜中β-胡萝卜素的不确定度评定

建立高效液相色谱法测定蔬菜中β-胡萝卜素（β-carotene）的不确定度评定数学模型,计算β-胡萝卜素测量结果的不确定度。胡萝卜和菠菜中β-胡萝卜素的扩展不确定分别为0.684和0.444 mg/100g,k=2,P=95%。影响β-胡萝卜素HPLC法测定的不确定度来源主要是样品均匀性、前处理过程及HPLC仪器定量重复性,不确定度评定有利于完善测定结果的准确性。     

婴幼儿配方奶粉中3-氯丙醇酯的GC-MS法测定及暴露危险分析

目的：建立婴幼儿配方奶粉中3-氯丙醇酯的气相色谱—质谱联用（GC-MS）测定方法,并对部分市售婴幼儿配方奶粉中3-氯丙醇酯的含量进行调查。方法：用乙醚+石油醚（1∶1）提取奶粉样品中脂肪,以1 mL甲醇钠甲醇溶液（0.25 mol/L）将脂肪中的3-氯丙醇酯（3-MCPD酯）水解成3-氯丙醇（3-MCPD）并用硅藻土小柱净化后,经七氟丁酰基咪唑衍生,再用选择离子监测的气相色谱—质谱联用法测定,采用内标法定量。结果：3-MCPD酯在250～5 000 μg/kg范围内线性良好（r>0.999）,3个浓度水平下加标回收率为71.5%～99.6%,相对标准偏差为2.3%～6.0%。20份奶粉样品中,检出率65%,含量为0.26～0.97 mg/kg脂肪、0.042～0.22 mg/kg样品。不同阶段统计婴幼儿配方奶粉平均暴露量,一阶段 3.32 μg/（kg·bw）、二阶段 2.42 μg/（kg·bw）、三阶段 2.72 μg/（kg·bw）、四阶段 0.23 μg/（kg·bw）。结论：该方法灵敏度高、定量准确度,适合婴幼儿配方奶粉中3-氯丙醇酯的检测。     

免疫亲和-HPLC法测定婴幼儿配方乳粉中维生素B12

目的：建立免疫亲和-高效液相色谱法测定婴幼儿乳粉中维生素B12的方法。方法：样品经缓冲溶液提取、过滤,滤液过维生素B12免疫亲和柱净化后,洗脱液在60℃下氮吹定容上机。采用C18色谱柱,柱温为30℃,流动相为乙腈和水（15∶85）,梯度洗脱,流速为0.25mL/min,紫外检测器波长为361nm,外标法定量。结果：维生素B12在0.01～1μg/mL范围内呈良好线性关系,相关系数（r）为0.999 9。本方法的检出限为5μg/kg。在样品中添加不同添加量水平的标准物质,加标回收率为80%～89%;选择不同含量的样品,重复测定相对标准偏差（RSD）为0.3%～1.6%。结论：该方法较现行国标GB 5413.14—2010的微生物法操作简便,易于掌握,可提高工作效率。     

高效液相色谱法测定蓝莓叶中绿原酸的含量

采用高效液相色谱法测定蓝莓叶中绿原酸的含量。所用色谱柱为Eclipse XDB C18（250 mm×4.6 mm,2.5 μm）,以乙腈-0.1%磷酸（体积比为13:87）为流动相,检测波长327 nm,当绿原酸质量浓度为6～96μg/mL时,以绿原酸对照品溶液的峰面积比为纵坐标（Y）,绿原酸的质量浓度为横坐标（X）,二者呈良好的线性关系,线性方程为：Y=74.15X-432.3,R2=0.999,平均回收率为99.98%,RSD=0.506%（n=6）。按照以上色谱方法检测了三种蓝莓中绿原酸的含量,并与蓝莓果实中绿原酸的含量比较,结果显示三种蓝莓叶中的绿原酸含量远高于果实中的绿原酸含量。     

市售大豆油中维生素K1的含量

目的：测定29种市售大豆油中维生素K1含量,分析比较不同原料、工艺及等级大豆油之间维生素K1含量的异同。方法：采用SPE硅胶柱萃取油脂中维生素K1,用高效液相色谱-紫外检测法测定每种样品中维生素K1含量。结果：大豆油中维生素K1含量范围由未检出至215μg/100g,其中三级大豆油维生素K1平均含量为145.94±36.05μg/100g、一级大豆油维生素K1平均含量为126.69±24.44μg/100g,三级显著高于一级（P=0.019）。原料为转基因大豆与非转基因大豆、生产工艺为浸出法和压榨法间大豆油中维生素K1含量差异无统计学意义。结论：深色的三级大豆油中维生素K1含量丰富。     

超高效液相色谱-串联质谱法同时测定血清中维生素A、E的方法研究

目的：建立超高效液相色谱 串联质谱（UPLC MS/MS）同时测定血清中维生素A、E的方法。方法：取标准系列工作溶液、空白替代血清样品（4% BSA牛血清白蛋白溶液）各50 μL,经硫酸锌、沉淀剂（甲醇/乙腈=50/50,V/V）沉淀蛋白,振荡,12 000 r/min离心5 min,取上清,低压离心挥干,复溶振荡,12 000 r/min离心5 min,取上清待测。采用Waters BEH Phenyl色谱（2.1 mm×100 mm,1.7 μm）分离,以0.1%甲酸 水溶液和0.1%甲酸 甲醇溶液为流动相等度洗脱,电喷雾（ESI）正离子模式、多反应监测模式（MRM）下检测,内标法定量。结果：UPLC MS/MS检测血清维生素A、α 维生素E、β 维生素E线性关系良好,相关系数分别为0.999 3、0.999 3、0.999 7;维生素A、α 维生素E、β 维生素E定量限分别为0.213、0.240、0.070 ng/mL,检出限分别为0.064、0.072、0.021 ng/mL;维生素A、E在低、高浓度加标回收率范围分别为89.7~107.4、97.6~118.1,RSD分别为2.45%~3.43%、1.48%~5.40%。结论：本研究建立的人血清维生素A、E超高效液相色谱 串联质谱法灵敏度高、准确稳定、重现性好,对血清中维生素 A 和维生素 E 的测定具很好的的应用价值。     

应用SRAP标记分析金丝瓜（Cucubitapepo L.）种质资源遗传多样性与亲缘关系

本研究应用SRAP分子标记技术对56份金丝瓜和32份南瓜属（包括西葫芦美洲南瓜、中国南瓜、印度南瓜）种质资源遗传多样性与亲缘关系进行分析。结果表明：（1）从285对SRAP引物中共筛选出50对多态性引物对供试品种基因组DNA进行PCR扩增,获得713条清晰可辨的标记,其中多态性条带634条,多态性比率达88.92%,说明出南瓜属种间遗传多样性较丰富;（2）在56份金丝瓜品种中,共扩增出586条清晰可辨条带,多态性条带350条,多态性比率为59.73%,说明金丝瓜品种间的遗传相似性较高;（3）通过分子聚类分析可将供试金丝瓜品种划分为5个亚类群。金丝瓜与西葫芦美洲南瓜的亲缘关系较近,与中国南瓜的亲缘关系较远,而与印度南瓜的亲缘关系最远;根据分子聚类分析结果证实初步鉴定应可以明确将金丝瓜划归为南瓜属中西葫芦美洲南瓜的一个变亚种。     

HPLC法同时测定鸡矢藤中熊果酸和齐墩果酸的含量

目的：建立高效液相色谱法同时测定鸡矢藤中熊果酸和齐墩果酸的含量。方法：色谱柱为DiamonsilTM C18（250×4.6 mm,5滋m）,流动相为甲醇-0.05mol.L-1磷酸溶液（93∶7）为流动相,检测波长210 nm,进样量10滋L。结果：熊果酸在21.28滋g.mL-1～212.8滋g.mL-1范围内线性关系良好（r=0.9997）,平均回收率为97.79%（RSD=1.30%）;齐墩果酸在24.02滋g.mL-1～240.2滋g.mL-1范围内线性关系良好（r=0.9996）,平均回收率为98.36%（RSD=1.11%）。结论：该方法简便、灵敏、准确,可用于鸡矢藤药材的质量评价。     

红酵母超高压突变体的类胡萝卜素提取及特性研究

采用酸-热法破壁和丙酮为提取溶剂,在所优化的最佳组合条件下,从红酵母超高压突变株提取类胡萝卜素,平均提取率可达718.1μg/g干细胞。色素粗提物采用柱色谱分离纯化后,通过薄层色谱（TLC）、紫外光谱和HPLC进行分析,发现该酵母突变体的发酵产物至少含β-胡萝卜素、园酵母素和红酵母红素等3种色素,其中β-胡萝卜素含量最多,超过50%的比例。该色素提取物的光热稳定性好于先前报道的同类色素;体外清除自由基实验也表明该类胡萝卜素提取物具有良好的抗氧化活性。因此,利用该突变株发酵生产类胡萝卜素值得进一步研究和开发。     

HPLC法测定葛花中鸢尾苷的含量

目的：测定8个产地葛花中鸢尾苷的含量,建立葛花中鸢尾苷含量测定的HPLC方法。方法：采用GRACEC18（250mm×4.6mm,5μm）色谱柱,流动相为乙腈-水梯度洗脱,流速为0.8mL/min,紫外检测波长为265nm;柱温为室温。结果：鸢尾苷的峰面积（Y）与浓度（X）在11.8～236.4μg/mL范围内具有良好线性关系,Y=34920X-1156.5,r=0.9995（n=7）;平均加样回收率为103.66%,RSD〈2%（n=9）;测得8批不同产地的葛花药材中鸢尾苷含量在37.00～113.1mg/g。结论：建立了高效液相色谱法测定葛花中鸢尾苷含量的方法,该法准确、可靠,可用于葛花中主要成分鸢尾苷的含量测定;不同产地葛花中均检测到鸢尾苷,但其含量有一定区别。     

HPLC法测定重组人干扰素α1b粉雾剂的含量

采用高效液相色谱法测定重组人干扰素α1b粉雾剂的含量及均匀度。结果表明溶液中重组人干扰素α1b浓度在92.50~462.50μg/ml时峰面积（Y）与相应浓度（X）呈线性关系,（r=0.999 9）。并且在成品的含量测定时,重组人干扰素α1b的色谱峰峰形良好,杂质与流动相无干扰。本方法精密度、准确度高,稳定性良好,能够准确、迅速的测定重组人干扰素α1b粉雾剂成品中的主药含量及均匀度。     

一种检测新型生物高分子材料聚γ-谷氨酸的新方法

通过聚γ-谷氨酸（γ-PGA）与氯化十六烷基吡啶（CPC）的乙酸钠水溶液反应形成混悬液,采用分光光度计于波长680nm处比浊,研究γ-PGA浓度与吸收度之间的线性关系,并研究本方法测定γ-PGA的稳定性、重现性和回收率。在一定pH值和离子强度下,γ-PGA在12.5~50μg/ml范围内与CPC的乙酸钠水溶液生成的混悬液在波长680nm处的吸收度与其浓度呈线性关系,R2=0.9939.本方法在2h内吸收度保持稳定(RSD=0.154%,n=10 ),CPC法测定浓度为5,10和 40μg/ml时的平均回收率分别为86%,77%和99.75%,RSD分别为0.14%,0.23%和0.025%应用比浊法测定γ-PGA的含量方便、简洁、重现性好,可用于γ-PGA浓度的检测。     

青海蚕豆中原花青素和左旋多巴的含量测定和品种间差异的比较

目的：建立青海蚕豆中左旋多巴和原花青素含量测定方法,测量22批样品的含量。方法：采用紫外分光光度法测量原花青素的含量,检测波长为554nm。采用HPLC法检测蚕豆中L-多巴含量：色谱柱：汉邦ODS-2（250mm×4-6mm,5μm）,流动相：甲醇-0-1mol/L冰醋酸溶液（5∶95）;流速：0-8 mL/min;测定波长：280 nm;柱温：25/3℃;进样量：20μL。结果：原花青素在75~375μg/mL范围内线性良好、L-多巴在75~375μg/mL范围内线性良好。结论：青海蚕豆中左旋多巴和原花青素含量测定方法稳定可靠。     

保健食品中番茄红素测定方法的建立

本实验对保健品中番茄红素的提取净化及液相色谱检测方法进行研究。样品用没食子酸叔丁酯（TBG）-二氯甲烷溶液溶解,超声波辅助提取,用PTFE滤膜过滤。采用C18色谱柱(250 mm×4.6 mm,5μm)分离,以乙腈和甲醇溶液洗脱测定,外标法定量。番茄红素在5.00-200 μg/mL浓度范围的相关系数为0.993,检出限为0.5μg/mL,方法的回收率为81%-96%,相对标准偏差为3.1%-5.9%。该方法简便、准确,适用于保健品中番茄红素的检测。     

应用UE-SPE-HPLC/FLD法检测养殖业畜禽粪便中雌激素

本研究建立了超声提取(UE)-固相萃取净化(SPE)-高效液相色谱法(HPLC/FLD)测定畜禽粪便中雌激素(雌三醇、17β-雌二醇、炔雌醇和双酚A)的分析方法.粪便样品用乙酸乙酯超声提取30 min,C₁₈固相萃取柱净化,经Inertsil ODS-SP-C₁₈(150 mm×4.6 mm, 5 μm)反相色谱柱分离4种雌激素,高效液相色谱/荧光检测器(HPLC/FLD)检测,流动相采用甲醇/乙腈/水(体积比为20∶30∶50),激发/发射波长为280/310 nm,流速0.8 mL·min^-1,柱温40 ℃,进样量20 μL.结果表明: 4种雌激素在1.00～1000.00 μg·L^-1范围内线性良好(相关系数均大于0.9995),粪便中雌三醇、双酚A、17β-雌二醇和炔雌醇的检出限分别为3.35、5.01、2.13和1.12 μg·kg^-1;粪便样品在雌激素浓度为0.05、0.40、1.00 μg·kg^-1的添加水平下,猪粪、牛粪和鸡粪中4种物质的平均回收率分别为75.1%～91.1%、78.4%～117.0%和78.6%～97.8%;各物质的相对标准偏差RSD(n=6)均小于6%.采用此方法检测了南京市部分规模化养殖场的猪粪、牛粪和鸡粪样品,结果显示,利用本方法得到4种雌激素检测平行性好、检出限低,适用于畜禽粪便中雌激素的检测分析.     

高效液相色谱法检测果蔬汁中五种添加剂

目的：运用高效液色谱法对果蔬汁中苯甲酸、安赛蜜、脱氢乙酸、糖精钠以及山梨酸添加剂进行检测。方法：色谱柱：Kromasil 100-5 C18（250mm×4.6mm,5μg）;流动相：甲醇∶0.02mol/L乙酰胺溶液=5∶95（V∶V）;流速：1.0mL/min;进样量：20μL;柱温：30℃;波长：230nm。结果：苯甲酸、安赛蜜、脱氢乙酸、糖精钠以及山梨酸在0.00~0.1mg/mL浓度范围内,均表现为良好的线性关系（r=0.97、r=0.98、r=0.96、r=0.98、r=0.98）。山梨酸、安赛蜜、糖精钠、苯甲酸、脱氢乙酸RSD分别为1.13%、1.01%、1.51%、1.05%、1.18%;平均回收率分别为98%~99%。结论：在液果蔬汁添加剂检测中,高效液相色谱法快速准确,且灵敏度较高,可满足检查需要。     

HPLC法测定赣南脐橙中维生素B1、维生素B2含量

目的：建立2种不同的HPLC法测定赣南脐橙中维生素B1及维生素B2含量,通过比较,得出适合赣南脐橙维生素B1及维生素B2含量测定的最佳方法。方法：色谱条件：色谱柱：C18反相色谱柱（粒径5μm,150 mm×4.6 mm）;流动相：0.05mol/L乙酸钠溶液-甲醇=65∶35（pH值4.6）;流速1.0 mL/min;柱温30 ℃;检测波长：维生素B1激发波长375nm、发射波长435nm;维生素B2激发波长462nm、发射波长522nm。结果：维生素B1和维生素B2线形范围是0.01～1.00μg/mL,最低检出限为0.001μg/mL;果皮、果肉维生素B1平均回收率分别为95.3%、92.98%;果皮、果肉维生素B2平均回收率分别为89.1% 、84.6% 。结论：此方法简单、准确,可用于测定赣南脐橙中的维生素B1及维生素B2含量。     

RP-HPLC法测定酸枣仁汤中芒果苷的含量

目的：建立测定酸枣仁汤中芒果苷含量的反高效液相色谱分析方法。方法：色谱柱：WatersC18（250nm×4.6mm,5μm）;流动相：乙腈-0.1%磷酸水溶液,梯度洗脱;流速：1.0ml/min,检测波长：257nm。结果：芒果苷在0.316μg-1.264μg范围内与峰面积线性关系良好（r=0.9999）,平均加样回收率为97.64%,RSD为0.36%。结论：本方法简便、准确、可靠、重复性好,可作为酸枣仁汤中芒果苷的含量测定方法。     

不同产地玛咖中酰胺含量分析北大核心CSCD

建立玛咖酰胺测定方法,测定不同产地玛咖切片中玛咖酰胺含量。采用HPLC法,色谱条件为Sepax Sapphire C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5μm）流动相：乙腈（A）-0.05%磷酸水溶液（B）,梯度洗脱：0-15 min,90%-95%A;15-50 min,95%A。检测波长208 nm,体积流量1.0 m L/min,柱温30℃。酰胺1、酰胺2、酰胺3分别在0.88-132μg/m L、0.85-128μg/m L、0.96-144μg/m L线性关系良好。酰胺1、酰胺2平均回收率分别为99.21%（RSD=1.64%）、98.59%（RSD=1.75%）。不同产地玛咖中玛咖酰胺含量差别较大,建立可靠、准确、重复性好的检测方法,有利于评价不同产地玛咖的质量。     

RP-HPLC法同时测定颐脑解郁颗粒中栀子苷和五味子醇甲北大核心CSCD

本实验建立了颐脑解郁颗粒中栀子苷和五味子醇甲的高效液相色谱测定方法。实验中采用Eclipse XDB-C18色谱柱（250 mm×4.6 mm,5 μm）,流动相甲醇-水,梯度洗脱,体积流量1.0 mL/min,柱温25 ℃,检测波长0-20 min为238 nm,20-40 min为250 nm。结果表明栀子苷在0.2864-2.8640 μg范围内线性关系良好,r=0.9997,平均回收率为98.82%,RSD为1.53%;五味子醇甲在0.1062-1.0620 μg范围内线性关系良好,r = 0.9999,平均回收率为 99.23%,RSD为2.29%;3批样品中栀子苷的平均含量为8.53 mg/g,五味子醇甲的平均含量为2.82 mg/g。该方法简便准确,专属性强,重复性好,可有效控制颐脑解郁颗粒的质量。