幽门螺杆菌基因分型与胃病关系研究进展

幽门螺旋杆菌(Helicobacter pylori,Hp)已被国际癌症组织确认为胃部疾病最主要的致病因子。近年来对于Hp菌株的基因分型、流行病学和致病性等方面的研究逐步深入,越来越多的研究成果证实对Hp基因分型进行细化可为精准医疗提供依据。Hp可依照Cag A羧基末端磷酸化位点、Vac A信号区(s)中间区(m)过渡区(i)缺失区(d)和粘附因子(OMPs)进行基因分型。Hp基因型差异可导致不同毒性作用,从而引起不同临床结果和疗效预后。因此对Hp基因分型可为胃病的防治提供重要依据。本文就Hp基因分型方法、基因分型及其与胃部疾病研究进展进行如下综述。     

结直肠癌患者中IGF2 LOI以及表达的研究

目的:结直肠癌(CRC)在全球范围内位居恶性肿瘤的第3位,是我国最为高发的恶性肿瘤之一.作为表观调控的一种,基因组印记丢失(LOI)被证明在结直肠癌的发生发展中具有重要的作用.本次研究通过检测结直肠癌患者中胰岛样生长因子2(IGF2)基因组印迹丢失,探讨其在结直肠癌发生及其发展的病理过程中的作用.方法:采用聚合酶链式反应—限制性酶切片段多态性(PCR-RFLP)法筛选出47名结直肠癌患者的杂合子携带者,采用RT-PCR及PCR-RFLP法检测杂合子患者中IGF2 LOI.采用荧光定量PCR检测肿瘤患者体内肿瘤组织中IGF2的表达情况.结果:在31例的杂合子中,发现有11例肿瘤组织发生LOI.对患者的年龄、性别、吸烟史、肿瘤等级以及病理分期的比较结果显示,IGF2 LOI的患者与IGF2基因印记正常的患者中未发现存在显著差异无统计学意义(P＞0.05).IGF2 LOI的患者相比较,IGF2印记正常的患者更易出现肿瘤的转移(P＜0.05).IGF2 LOI患者的IGF2表达量明显高于IGF2印记正常的患者(P＜0.05).结论:本次实验表明IGF2 LOI在结直肠癌发生发展中具有重要作用,特别是结直肠癌伴转移的患者常常表现出IGF2 LOI这一现象.IGF2 LOI可以作为一个新的表现遗传学标志,用于临床结直肠癌的早期诊断,以及肿瘤转移的评估和预防.     

IGF2基因组印迹系统人重组腺病毒载体的构建与鉴定

目的:构建携带IGF2印迹系统的腺病毒载体,并验证其在肿瘤细胞及正常细胞中的功效,为IGF2印迹在肿瘤靶向治疗中的应用提供理论基础.方法:将人源的IGF2印迹系统启动子H19、增强子enhancer及甲基化区域CTCF克隆至穿梭质粒pDC-312中构建IGF2基因印迹系统,从pDC-315-EGFP质粒中扩增出EGFP片段插入到构建好的IGF2印迹系统中,然后与腺病毒骨架Ad5通过脂质体Lipofectamine2000介导共转染HEK293细胞,包装成有感染能力的腺病毒Ad-H19-CTCF-enlmncer-EGFP,命名为Ad-EGFP;构建好的腺病毒分别感染IGF2基因印记保持的细胞MCF-7和GES-1及IGF2基因印迹丢失的细胞HRT-18,荧光显微镜下观察EGFP在三种细胞中表达的差异.结果:转染腺病毒载体的HEK293细胞表达EGFP随着时间逐渐增强,并且出现明显的细胞病变效应,EGFP在HRT-18细胞中有大量表达,在MCF-7和GES-1细胞中不表达或仅有少量表达.结论:成功构建了携带IGF2基因印迹系统的腺病毒载体,证明其在IGF2基因印迹丢失的肿瘤细胞中特异性的表达,在正常细胞及IGF2基因印迹保持细胞中不表达,为IGF2基因印迹系统应用于肿瘤细胞的靶向治疗提供了理论基础.     

联合检测血清F-PSA、T-PSA、F/T对前列腺癌的诊断意义

目的:探讨F-PSA、T-PSA及F-PSA/T-PSA(F/T)比值在前列腺癌诊断中的价值.方法:采用全自动免疫荧光分析仪检测50例正常健康体检者,78例前列腺癌患者(PCa)以及184例良性前列腺增生患者(BPH)血清中F-PSA、T-PSA及F/T比值,并对各组数值结果进行比较分析.结果:结果显示PCa组血清F-PSA、T-PSA高于BPH组及正常对照组(P＜0.01,P＜0.01);而F/T值低于BPH组及正常对照组(P＜0.01,P＜0.01).T-PSA处于4-10ng/ml时,PCa组T-PSA水平与BPH组比较无显著性差异(P＞0.05),但PCa组F/T值显著低于BPH组,两者间差异具有统计学意义(P＜0.01).结论:联合检测F-PSA、T-PSA及F/T比值对PCa的鉴别诊断及高危人群的筛查均具有重要意义.     

甲状腺功能异常患者血清同型半胱氨酸及血脂水平检测的临床意义

目的:研究原发性甲状腺功能减退症患者和甲状腺功能亢进患者血清同型半脱氨酸(Hey)、血脂水平与心血管疾病的关系.方法:检测29例原发性甲减者、35例甲亢患者以及30例健康体检者(对照组)的空腹血清游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、Hcy、甘油三酯(TG)、总胆固醇(Tch)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)水平,并对其进行相关分析.结果:原发性甲减患者Hcy、TG、Tch、LDL-C水平明显高于对照组(p＜0.01、0.01、0.01、0.01),而HDL-C水平却与对照组相比明显降低(p＜0.01);相关分析表明,甲减患者Hey与FT3、FT4水平间呈显著负相关(r=-0.432、-0.354,p＜0.01、0.01),与TG、Tch水平呈显著正相关(r=0.339、0.452,p＜0.01、0.01);而与HDL-C、LDL-C均无相关性.甲亢组Hcy和Tch水平较正常对照组明显降低(p＜0.01、0.01),Hcy与FT4水平间呈显著负相关(r=-0.408,p＜0.01).结论:血清同型半胱氨酸水平可能对判断甲状腺功能有辅助作用;甲状腺激素水平影响了Hcy及血脂水平的代谢;血清Hcy水平升高是甲减患者易患心血管疾病的危险因素.     

哮喘患者外周血Treg和Th1/Th2的变化及其与哮喘病情的关系

目的：探讨哮喘患者外周血调节性T细胞（Treg）以及辅助性T细胞（Th1/Th2）的比例的变化,探讨其在哮喘的临床治疗中的作用。方法：80例哮喘患者（哮喘组）按临床表现分为急性发作期组（54例）和缓解期组（26例）,同时选择50例健康体检者。应用流式细胞仪检测上述各组外周血CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg、CD4＋IFN-γ＋Th1和CD4＋IL-4＋Th2细胞水平,并进行统计学分析。结果：哮喘组CD4＋CD25＋Foxp3＋Treg水平亦明显低于正常对照组（P〈0.05。其中急性发作期组Treg水平明显低于缓解期组和正常对照组（P〈0.05）。而哮喘组Th1/Th2比值显著低于对照组（P〈0.05）,且在哮喘急性发作组中Th1/Th2比值显著低于缓解期组和正常对照组（P〈0.05）。结论：提示Treg和Th在哮喘的发生和发展中起着重要的作用。     

生化指标与2 型糖尿病患者实验诊断及预后相关性研究

目的：研究BMI、HbA1c、病程、相关代谢指标与2 型糖尿病（T2DM）诊断及预后的关系。方法：收集379 例T2DM 患者与 383 例健康体检者,采用生化分析仪分析二组人群的生化指标,采用高效液相色谱法检测T2DM 组HbA1c 水平,胰岛素及C 肽 采用电化学发光法检测。计量资料采用t 检验、单因素方差及相关性分析,计数资料采用卡方检验分析。结果：对各组结果进行比 较显示（1）T2DM 患者的BMI、FBG、TG、LDL-C、BUN、UA、HbA1c 水平明显高于正常对照组（P均<0.01),HDL-C、CREA 水平明 显低于对照组（P均<0.01);（2 ）TC、LDL-C、BUN、CREA及2hINS 与年龄相关。（3）肥胖组的TG、CREA、UA、FCP、2hCP 高于非肥 胖组（P 均<0.05);（4 ）初诊T2DM 患者的FBG、TG、HbAlc、LDL-C 水平明显高于5 年以上患者（P均<0.05),而HDL-C 低于5 年 以上患者（P<0.05);（5 ）HbA1c≥ 11%组的FBG水平明显高于HbA1c≤ 8%及HbA1c＝8～11%组（P<0.01）,而UA、FINS、FCP、 2hINS、2hCP 水平明显低于HbA1c<8%组（P 均<0.01);FBG、TG 与HbA1c 水平呈正相关（P<0.05）;FINS、FCP、2hINS、2hCP、UA 与HbA1c 水平呈负相关（P<0.01);结论：BMI、FBG、TG、LDL-C、BUN、UA、HDL-C、CREA均可作为T2DM诊断的参考指标。其中 LDL-C、BUN、CREA、2hINS 指受年龄影响。TG、CREA、UA、FCP(空腹C-肽）、2hCP与肥胖相关。FBG、TG、HbAlc、LDL-C、HDL-C 与病程相关;FBG、TG、HbA1c、FINS、FCP、2hINS、2hCP、UA与HbA1c 相关。     

生化指标与2型糖尿病患者实验诊断及预后相关性研究

目的：研究BMI、HbA1c、病程、相关代谢指标与2型糖尿病（T2DM）诊断及预后的关系。方法：收集379例T2DM患者与383例健康体检者,采用生化分析仪分析二组人群的生化指标,采用高效液相色谱法检测T2DM组HbA1c水平,胰岛素及C肽采用电化学发光法检测。计量资料采用t检验、单因素方差及相关性分析,计数资料采用卡方检验分析。结果：对各组结果进行比较显示（1）T2DM患者的BMI、FBG、TG、LDL-C、BUN、uA、HbA1c水平明显高于正常对照组（P均〈0．01）,HDL-C、CREA水平明显低于对照组（P均〈0．01）;（2）TC、LDL—C、BUN、CREA及2hINS与年龄相关。（3）肥胖组的TG、CREA、UA、FCP、2hCP高于非肥胖组（P均〈0．05）;（4）初诊T2DM患者的FBG、TG、HbA1c、LDL-C水平明显高于5年以上患者（P均〈0．05）,而HDL-c低于5年以上患者（P〈0．05）;（5）HbA1c≥11％组的FBG水平明显高于HbA1c≤8％及HbA1c=8-11％组（P〈0．01）,而UA、FINS、FCP、2hINS、2hCP水平明显低于HbA1c〈8％组（P均〈0．01）;FBG、TG与HbA1c水平呈正相关（P〈0．05）;FINS、FCP、2hINS、2hCP、UA与HbA1c水平呈负相关（P〈0．01）;结论：BMI、FBG、TG、LDL-C、BUN、UA、HDL-C、CREA均可作为T2DM诊断的参考指标。其中LDL—C、BUN、CREA、2hINs指受年龄影响。TG、CREA、uA、FCP（空腹C-肽）、2hCP与肥胖相关。FBG、TG、HbA1c、LDL-C、HDL-C与病程相关;FBG、TG、HbA1c、FINS、FCP、2hINS、2hCP、UA与HbA1c相关。     

CD147-shRNA对胃癌细胞CD147表达的抑制作用

目的:构建CD147-shRNA重组质粒并检测其对胃癌细胞SGC7901内源性CD147表达的抑制作用。方法:构建靶向CD147的siRNA表达载体pSilencer-CD147siRNA,稳定转染至SGC7901细胞中,通过Real-time PCR和Western blot法检测转染细胞中CD147表达水平的变化。结果:酶切鉴定和测序证实成功构建pSilencer-siRNA1,pSilencer-siRNA2和pSilencer-negative,转染后SGC7901中CD147表达水平显著降,而以pSilencer-siRNA2抑制作用最为显著。结论:构建pSilencer-CD147siRNA成功,并筛选出基因抑制效果抑制最佳的pSilencer-siRNA2,为进一步实验打下了基础。     

消化道肿瘤患者外周血调节性T细胞的变化及其意义

目的:通过测定外周血CD4+CD25+Foxp3+调节性T(Treg)细胞比例,探讨其与消化道肿瘤发生、发展的关系.方法:采用流式细胞术(FCM)检测156例消化道恶性肿瘤患者(消化道恶性肿瘤组)与50名健康体检者(对照组)的外周血中CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的水平,并进行比较分析.结果:消化道肿瘤患者CD4+CD25+Foxp3+Treg比例明显高于对照组(P<0.01),且随疾病进展恶性肿瘤患者外周血CD4+CD25+Foxp3+Treg细胞的比例升高.结论:CD4+CD25+Foxp3+Treg在消化道肿瘤患者外周血中比例升高,提示其可能是癌症患者细胞免疫功能削弱的机制之一,与消化道肿瘤的发生和发展密切相关.