桃果肉花色苷遗传多样性及红肉桃判定指标的探讨

运用比色法(UV)和高效液相色谱法(HPLC)测定68份桃品种果肉花色苷含量,比较2种测定结果的一致性,分析桃果肉花色苷的遗传多样性,初步提出红肉桃的判定标准。结果表明,2种方法测定白肉品种花色苷含量接近,可根据实际情况进行选择分析方法,而黄肉品种应尽可能选用高效液相色谱法(HPLC)。HPLC定性定量检测结果表明,48份材料检测出矢车菊-3-葡萄糖苷,是桃果肉中主要的花色苷种类,乌黑鸡肉桃,大果黑桃果肉中同时检测到矢车菊-3-芸香糖苷。根据高效液相色谱法测得花色苷含量将桃划分为5个等级,含量20 mg/100 g定为红肉桃的划分临界点。本研究中共鉴定出5份红肉桃品种,感官判定且风味为甜的红肉桃不符合上述判定标准,需要进一步研究完善。     

反相高效液相色谱法测定Bacillus claussi的DNA G+Cmol%

目的:为了建立细菌DNA G Cmol%的快速准确的测定方法,选用反相高效液相色谱法测定Bacillus claussiDNA的G C mol%。方法:以已完成全基因测序的Bacillus haloduransC-125作为标准菌株,作者实验室新分离鉴定的2株Bacillus claussi作为待测菌株。采用80 mmol/L磷酸二氢钾溶液(pH5.6)20%甲醇为移动相,检测波长260nm,流速1ml.min-1,在Kromasil C18柱上对4种碱基进行分离。结果:DNA碱基分离效果好,无杂峰干扰,以峰面积计算得到标准菌株Bacillus haloduransC-125的G C mol%为44.23%,待测菌株的G C mol%分别为45.75%、43.35%,经过统计学分析,与已经报道的G C mol%差异不显著。结论:实验结果充分显示高效反相液相色谱法测定细菌DNAG C mol%快速、准确、结果稳定,是细菌精确分类鉴定的一种可靠方法。     

拔毒消炎软膏质量控制研究

目的研究拔毒消炎软膏的质量控制方法。方法用薄层色谱法(HPLC)对制剂中大黄、黄柏进行定性鉴别,高效液相色谱法测定大黄酚的含量。结果定性鉴别薄层色谱斑点特征明显;高效液相色谱法测定含量,大黄酚在0.061~0.304μg/ml范围内呈良好的线性关系(r=0.9954),平均加样回收率为98.68%,RSD=1.39%。结论采用薄层色谱法定性、高效液相色谱法定量,简便准确、重现性良好,可有效控制该制剂质量。     

高效液相色谱和气相色谱在放线菌分类鉴定中的应用

随着新菌株不断被分离及已有的大量菌株,快速、准确的分类鉴定及高效排重对微生物资源开发日益重要,而快速发展的色谱技术使之逐渐成为可能.以标准菌株和标准品优化了色谱技术中的高效液相色谱(HPLC)和气相色谱(GC)在放线菌的DNA(G+C)mol%、甲基萘醌和脂肪酸中的鉴定方法及测定参数.优化的色谱鉴定方法不但有利于各个指征的分析更快,更精确,也有利于高效排重,甚至也可检验已有的分类鉴定是否正确而纠正错误属、种的划分.     

银耳多糖单糖组成分析的三种色谱方法比较

为选择一种准确快捷的方法测定银耳多糖的单糖组成,对薄层色谱法(TLC)、气相色谱法(GC)、高效液相色谱法(HPLC)三种色谱方法进行比较。结果表明,前两种方法的测定结果均不理想,而HPLC法,操作简便,灵敏度高,分离效果好,信息完整。测定结果为由葡萄糖、甘露糖、葡萄糖醛酸、木糖、岩藻糖组成,其摩尔比为0.24∶1.00∶0.06∶0.29∶0.25。HPLC法对酸性杂多糖组成糖分析是一种比较理想的选择。     

应用柱前衍生化高效液相色谱法开辟了一种简单、快速的DNJ产生菌的筛选途径

【目的】应用柱前衍生化高效液相色谱法筛选产1-脱氧野尻霉素(DNJ)菌株,并对其进行系统鉴定。【方法】利用芴甲氧酰氯(FMOC-Cl)柱前衍生化高效液相色谱法筛选DNJ产生菌;通过形态特征、培养特征、生理生化特征以及16S rRNA序列相似性分析等多项分类方法对DNJ产生菌进行鉴定;在10 L发酵罐水平进行发酵研究,利用FMOC-Cl柱前衍生化高效液相色谱法测定DNJ含量。【结果】从80株具有α-糖苷酶抑制剂活性的土壤放线菌中筛选得到一株DNJ产生菌,菌株编号为PW409,初步确定为戈壁三素链霉菌(Streptomyces gobitrici);发酵研究表明,DNJ为链霉菌PW409的次级代谢产物,发酵液中DNJ浓度为12.1 mg/L。【结论】首次将FMOC-Cl柱前衍生化高效液相色谱法应用于DNJ产生菌的筛选,并首次报道从戈壁三素链霉菌发酵液中鉴定到DNJ。     

高效毛细管电泳

在过去十年里,应用重组DNA方法生产药用治疗蛋白推动了分析和鉴定生物分子新技术的发展。高效毛细管电泳(HPCE)使生物化学家、分析化学家以及层析工作者产生了极大的兴趣,现已成为一个分辨率极高的分离技术,其分离效率和应用广度胜于高效液相色谱法(HPLC)。人们预计,HPCE将成为生物技术产业,尤其是高度精确地鉴定重组DNA产物的一个重要工具。迄今为止,在此领域里应用最多的仍然是HPLC(蛋白质分析和纯化)和凝胶电泳(蛋白质及核酸分析)。     

射干中乳酸脱氢酶抑制剂的筛选分离与质谱分析

本研究采用高效液相色谱-电喷雾质谱联用技术(HPLC-ESI-MS)对射干提取物中异黄酮类化学成分进行分析鉴定,以乳酸脱氢酶作为生物靶分子,运用超滤质谱技术筛选出6种酶抑制剂,分别为鸢尾苷(tectoridin)、鸢尾新苷A(Iristectorin A)、野鸢尾苷(iridin)、鸢尾苷元(tectorigenin)、野鸢尾黄素(irigenin)和次野鸢尾黄素(irisflorentin),并采用半制备型高效液相色谱技术(Semi-prep·HPLC)分离纯化射干提取物中的活性成分。所得单体分离收集液经分析型高效液相色谱法检测,纯度均大于90%。结果证明利用液相色谱-超滤-质谱-半制备型高效液相色谱联用技术可以快速筛选、鉴定、分离射干中的活性物质。此方法对于筛选酶抑制剂有快速和灵敏等优势,具有广泛的应用前景。     

安徽省道地药材宣木瓜中槲皮素和芦丁的HPLC测定

采用高效液相色谱法（HPLC）测定安徽省道地药材宣木瓜中的槲皮素和芦丁的含量。分析结果表明,该法能同时测定槲皮素和芦丁两种物质的含量,重现性好,为道地药材宣木瓜质量标准的建立提供了方法学的依据,并为该药材HPLC指纹图谱研究提供色谱基础。     

高效液相色谱法测芽孢杆菌的DNA G+Cmol%

以往细菌分类鉴定都是以表形特征为基础,近年来开始对细菌的遗传物质进行研究,把细菌分类从人为的分类体系向自然的分类体系推进了一步.最先采用的方法是DNA G+Cmol%的测定.每种细菌都有其特定的G+Cmol%,而且其数值比较稳定,不受菌龄影响,也不因外界条件的改变而改变.据经验,一个种内各菌株间的G+Cmol% 不应相差5%以上,同一属不同种G+Cmol%不应相差15%以上. G+Cmol%用于芽孢杆菌分类,揭示了芽孢杆菌遗传上的异源性,结合其他方法,芽孢杆菌分类已由原来的一个属,发展到现在的七个属.本实验利用从神农架分离的芽孢杆菌,用高效液相色谱法测定了一些种的G+Cmol%,结果如下.     

桂北地区不同品种、不同产地鲜罗汉果中总甙、甙V含量测定

分别采用紫外分光光度比色法(UV-vis)和高效液相色谱法(HPLC)测定了不同产地,不同品种罗汉果中的总甙和甙V的含量。测定结果表明:同一品种不同产地罗汉果中总甙含量、甙V成分变化不大,不同品种的总甙、甜味成分V均有明显差别。     

反相HPLC法测定静注人免疫球蛋白中残余胆酸钠含量研究

用反相高效液相色谱法(R—HPLC)测定静注人免疫球蛋白(IVIG)中残余胆酸钠含量。首先用固相提取柱吸附、浓缩制品中残余胆酸钠,然后加入一定量胆酸钠,使样品中胆酸钠含量达到可检测水平后,依外标法进行测定。结果表明,用R—HPLC法测定胆酸钠准确性及重复性较好,是一种相对准确快速的方法。     

薄层色谱和高效液相色谱联用测定暗纹东方鲀肌肉中肌肽和谷胱甘肽的含量

通过薄层色谱(TLC)与高效液相色谱(HPLC)联用技术鉴定了暗纹东方鲀(Takifugu obscurus)肌肉中存在肌肽和谷胱甘肽,同时利用高效液相色谱法测定了肌肽和谷胱甘肽(GSH)的含量。薄层层析采用的展开剂为正丁醇:乙酸:水(4∶2∶1),层析板为硅胶板。高效液相色谱利用Kromasil C18反相柱分析,流动相为10%的纯乙腈和90%含有0.05%三氟乙酸的超纯水。结果表明:通过薄层色谱和高效液相色谱鉴定了暗纹东方鲀肌肉中肌肽和谷胱甘肽,其中暗纹东方鲀肌肉中肌肽含量约213μg/g(鲜重),还原性谷胱甘肽含量约211μg/g(鲜重)。本法样品无需衍生,操作简便,适合于暗纹东方鲀肌肉中肌肽和谷胱甘肽的测定。本文为生物体内肌肽和谷胱甘肽的研究提供借鉴意义。     

HPLC法测定复方止咳清肺胶囊中有效成分含量的研究

首次采用高效液相色谱法对中药复方止咳清肺胶囊中的有效成分—芥子碱硫氰酸盐进行了含量测定研究,由此建立了该复方的HPLC法质量分析方法。     

化学模式识别分析白及不同采收期次生代谢产物动态变化特征

为研究白及栽培品不同采收期特征差异次生代谢产物及其动态变化规律。采用高效液相色谱法(HPLC)建立白及指纹图谱并测定gastrodin、militarine含量,利用主成分分析(PCA)及最小偏二乘分析(PLS-DA)对指纹图谱进行化学模式识别,从16个共有峰中识别7个特征化学成分为不同采收季节主要特征差异成分。利用高效液相-高分辨质谱技术(HPLC-HRMS)鉴定为葡萄糖苷类成分(gastrodin)、苄酯类成分(blestroside、militarine、gymnosideⅤ)以及菲类成分(4-甲氧基菲-2,7-二醇、benzylhydrophenanthrene 3、coelonin)。结果显示7个主要差异成分随季节呈现不同动态变化规律,gastrodin和militarine在不同采收期含量差异较大。本研究为指导白及采收时期及内在质量评价提供理论依据。     

元素分析法鉴定细菌初报

细菌分类鉴定的方法,越来越趋向于与现代化的分析仪器相结合,如细菌裂解气相色谱法(PGC),细菌DNA中G+C mol%测定法等,已成为现代细菌分类鉴定的常用方法。     

两种方法检测糖化血红蛋白的临床应用

目的由于免疫层析法具有方法简单、快速、灵敏和准确等特点,便于临床使用,与经典的高效液相色谱法进行比较,以评价二者的相关性。方法应用高效液相色谱法（HPLC）和免疫层析法分别测定40例糖尿病患者糖化血红蛋白（HbA1C）水平,并对其结果进行配对t检验及相关分析。结果HPLC法和免疫层析法测定HbA1C差异没有显著性（P〉0.05）,二者的相关性良好,Y=0.97X＋0.21;r=0.9633;P〈0.01。结论HPLC法和免疫层析法显著相关,二者检测HbA1C的能力接近,具有可比性。提示免疫层析法检测HbA1C的结果是准确可靠的,可以在临床实验室推广使用。     

荧光物质(MFA、MFB)的分离、结构鉴定及金华地区高产菌株的筛选

采用硅胶柱层析及制备型液相色谱仪对红曲米中两种荧光物质进行分离纯化,使用高效液相色谱法(HPLC)检测荧光物质纯度,然后使用高分辨质谱(ESI-HRMS)对两种荧光物质进行分析,得到两种荧光物质的分子量分别为356和384,ESI-MS/MS二级质谱把两者鉴定为monasfluore A (MFA)和monasfluore B (MFB);从金华地区红曲米中分离得到10株红曲菌株,经固态发酵采用HPLC法分析,筛选获得1株高产MFA、MFB的菌株WZWZ,该菌株发酵制得红曲米中MFA含量为3.63 g/kg,MFB含量为7.29 g/kg,对WZWZ菌株进行外观形态学及显微观察、ITS基因序列测定与分析,最终将菌株WZWZ鉴定为紫色红曲霉(Monascus purpureus)。     

三种方法测定鲨鱼硫酸软骨素钠含量的比较

利用酶解高效液相色谱法、高效液相色谱法及氯化十六烷基吡啶电位滴定法对鲨鱼硫酸软骨素钠含量进行检测,并对检测结果进行对比分析,结果显示,酶解高效液相色谱法不适用于鲨鱼硫酸软骨素钠含量的测定;而氯化十六烷基吡啶电位滴定法检测鲨鱼硫酸软骨素钠含量稍高于高效液相色谱法;相比之下,高效液相色谱法较适用于检测鲨鱼硫酸软骨素钠含量。     

曲美他嗪人血浆蛋白结合率的测定

目的:建立测定曲美他嗪与人血浆蛋白结合率的高效液相色谱法(HPLC),测定曲美他嗪在人血浆中的蛋白结合率。方法:采用平衡透析法,结合HPLC测定曲美他嗪在人血浆中的蛋白结合率。结果:低、中、高3个浓度下,曲美他嗪的血浆蛋白结合率分别为14.7%,16.2%和15.5%。结论:本方法灵敏度高,重现性好,操作简单,能满足生物样品分析的要求。曲美他嗪与血浆蛋白结合率较低。