雌激素诱导SD大鼠前列腺炎与内环境改变的关系

目的 通过雌二醇诱导SD雄鼠慢性前列腺炎,探讨SD雄鼠的内环境改变的关联性作用,为前列腺炎发生机制和治疗提供一条实验性途径.方法 3%戊巴比妥麻醉,无菌条件下去势手术;术后动物恢复5 d,30只雄鼠按照体重随机分组,每组10只.第6天低剂量组皮下注射0.25 mg/kg的雌二醇,高剂量组皮下注射1.25 mg/kg的雌二醇,溶媒对照组注射橄榄油,每天1次,连续30 d.结果 与溶媒对照组比较,低、高剂量组白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）和红细胞压积（HCT）均降低（P〈0.01）;前列腺酸性磷酸酶（PAP）明显降低（P〈0.01）;高剂量组睾酮含量明显增加（P〈0.01）,C-反应蛋白（CRP）在低、高剂量组也呈现增加的趋势,但差异没有统计学意义;溶媒对照组和给药组前列腺组织大体解剖表面未见明显差异,光学显微镜下,溶媒对照组前列腺组织结构完整、腺腔和间质无炎性细胞浸润,高剂量组和低剂量组的前列腺间质均可见炎细胞浸润;低、高剂量组大鼠脾脏均可见棕黄色颗粒沉淀,其余脏器无明显改变,胸腺、脾脏及其脏器系数均明显降低.结论 根据本实验结果,雌激素引起的慢性非细菌性前列腺炎可导致内环境血液学、血清生化,激素水平、脏器和脏器系数的一系列改变.     

大鼠睾丸组织固定法的优选研究

目的选择一种最优势、合理的固定方式以提高对睾丸组织制片效果,以配合不同种类的科学研究。方法选用10％甲醛溶液、NBF—Bouin’s、Bouin’s和改良Davidson’s四种不同的固定液对大鼠睾丸进行充分固定后,制作石蜡切片,进行HE染色,比较不同固定液中的睾丸组织学形态的差异;利用糖原特殊染色（PAS）,探讨不同固定液对睾丸糖原观察的影响;采用免疫组织化染色,测评睾丸组织内雄激素受体的固定效果。结果改良Davidson’8固定液较NBF—Bouin’s引起的曲细精管萎缩轻,形态更为清晰,用免疫组织化学方法检测雄激素更为敏感,并且改良Davidson＇s固定液在需要对精子发生进行分期时,其PAS染色的效果与Bouin＇s液固定后等同。结论与苴守圈常浦相№曲冉David0Rnn浦对女宙奥由的圈索特罩掂杯     

睾丸酮对大鼠前列腺上皮细胞有丝分裂方向的影响

目的探讨丙酸睾丸酮（T）对大鼠前列腺上皮细胞染色体有丝分裂方向的影响及其差异基因表达。方法 SPF级SD雄性大鼠（110~130 g）20只,随机分为2组。深麻醉下对所有大鼠进行去势手术,恢复一周后,给药组大鼠皮下注射T,每只0.5 mg,每日1次,连续30d;对照组大鼠皮下注射橄榄油0.1 mL。取前列腺。通过免疫组化、HE染色观察结果。并做基因芯片检查差异基因表达谱。结果给药组大鼠前列腺发生形态学增生。前列腺腺腔扩张,腺上皮高度明显增高,前列腺增生。且前列腺上皮细胞染色体有丝分裂的方向与基底膜平行,而对照组前列腺上皮细胞有丝分裂的方向与基底膜垂直。AR免疫组化染色后发现给药组的前列腺上皮中,均可见到AR标记的阳性细胞,而对照组均为阴性。基因芯片和RT-PCR结果：促进细胞增殖的基因如雄激素受体相关蛋白（RAN）、TGM4和Wnt通道的WNT2等基因均上调,而抑制细胞增殖的基因如负调控Wnt通道的DKK3和促进细胞凋亡的Fas等基因下调。结论 T注射后改变了前列腺上皮细胞有丝分裂的方向,Wnt和AR信号转导通路参与了细胞增殖和有丝分裂方向改变。     

雌/雄激素比例对去势大鼠前列腺体积及其脏器系数的影响

目的探讨雌/雄激素比例对去势大鼠前列腺体积及其脏器系数的影响。方法选用雄性SD大鼠随机分为37组,分别为:35个不同雌/雄激素比例组、正常和去势对照组。给药组分别注射不同配伍剂量的雌/雄激素、对照组均注射生理盐水各一个月。最后一次注药后24h取血、处死、取材,称取前列腺重量,测量体积,并计算脏器系数。结果当丙酸睾丸酮给药剂量分别为每只鼠0.02、0.5、2.5和12.5mg时,均未见器官增生程度与苯甲酸雌二醇注射剂量呈负相关。丙酸睾丸酮给药剂量每只鼠为0.1mg时,随着苯甲酸雌二醇注射量增加,前列腺体积及其系数均增大,而当每只鼠苯甲酸雌二醇注射量达到50μg/kg时,器官增生程度不再随苯甲酸雌二醇注射剂量增加而增加。结论雌激素发挥作用需以雄激素存在为前提,雌激素并非总是呈现对抗雄激素促进前列腺增生的作用,而是在一定范围内协同雄激素促进前列腺增生。     

2种检测灯盏花素血药浓度方法的比较

目的：建立测定Beagle犬血浆中灯盏花素浓度的反相高效液相色谱法和液相-质谱联用法,并将其进行多参数的两两比较。方法：采用液-液萃取法处理血清,反相高效液相色谱法测定,流动相为甲醇-水（pH3．0）=42：58,EclipseXDB-C18为固定相;将同样的样品用液相-质谱法开展平行检测;将所测得的数据做两两对比,采用SPSS统计软件进行分析。结果：2种方法测定的数据具有良好的相关性（r=0．982,P〉0．05）;最低检测限前者为0．05μg／mL,后者为0．01μg／mL,反相高效液相色谱法的最低检测限和灵敏度不及液相-质谱联用法。结论：反相高效液相色谱法可用于灯盏花素毒代动力学研究,与液相-质谱联用法检测结果无显著差异,且费用较低,不失为-种低成本且行之有效的检测方法。     

两种脱钙法植被鼠尾病理切片的比较

目的探讨制作大鼠尾巴标本石蜡切片的方法。方法采用盐酸脱钙液运用两种脱钙方法制作大鼠尾巴标本石蜡切片。结果两种方法制作的石蜡切片完整、无破碎,HE染色观察组织结构细胞形态完整,核浆分明,红蓝适度。结论两种方法都能制作理想大鼠尾巴标本石蜡切片,可保证病理诊断质量。     

低剂量双酚A灌胃对去卵巢小鼠子宫的增生作用

目的观察小鼠经消化道途径给予低剂量环境内分泌干扰物双酚A对子宫的作用及机制。方法雌性ICR小鼠切除双侧卵巢,恢复性饲养1周,剔除异常个体后,50只动物随机分成5组,每组10只动物,依次皮下注射(sc)10.0μg/(kg·d)17β-雌二醇,灌胃(ig)0、20.0、60.0和180.0μg/(kg·d)BPA,连续7d。动物每3d称量体重一次,于最后一次给药24h后,阴道涂片检测角化上皮细胞,颈椎脱臼处死动物,取子宫,称其干湿重,计算子宫脏器指数,组织切片,HE染色后利用图像分析系统测量子宫上皮高度和宫腔面积。免疫组化法分析子宫雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)表达。结果①与对照组相比,雌二醇和BPA低剂量组动物体重增加,BPA中高剂量组动物体重无明显差异。②阴道涂片结果显示,处于动情期动物数分别为:对照组0/10,雌二醇组10/10,BPA低剂量组2/10,BPA中剂量组1/10,BPA高剂量组0/10;③BPA低剂量组动物子宫湿重和含水量较对照组增加,脏器系数增大,BPA中高剂量组子宫湿重和脏器系数较对照组降低明显(P0.05);④病理组织学及显微图像分析结果显示,BPA低剂量组动物子宫腔面积较对照组增大,中高剂量组子宫腔面积明显减小(P0.01);低剂量组动物子宫上皮高度较对照组增高(P0.01),中高剂量组子宫上皮高度降低明显(P0.01)。⑤免疫组化结果显示,低剂量BPA能增强小鼠子宫ER和PR表达,但随剂量增加,ER表达下降。结论BPA经消化道途径给予ICR小鼠,人环境暴露剂量下具有雌激素活性,但雌激素活性随BPA剂量增大呈现下降趋势。     

人OC-3-VGH卵巢癌细胞裸小鼠肿瘤模型的建立

目的建立人OC-3-VGH细胞株卵巢癌裸小鼠模型并观察该肿瘤生物学生长特性。方法OC-3-VGH细胞株复苏后加入10 mL RPMI-1640培养液,放入培养箱,传2～3代后,取细胞悬液,均以4×106个细胞,每只0.2 mL分别接种至BALB/c雌性裸小鼠皮下,2月后处死取材,观察肿瘤生长特性和转移情况。结果皮下接种一周后,裸鼠长出肿瘤,并随时间而增大,体积呈指数增长,第42天始,明显增大（P〈0.05）。组织学检查发现裸鼠皮下肿瘤细胞均细胞体积较大,细胞核大而染色深,核分裂相较多、异型性明显,接种2个月时,未发生其他组织转移。结论建立了新的卵巢癌动物模型,并初步研究了其生物学特性,为卵巢癌治疗方法的研究拓宽了道路。     

度他雄胺对大鼠附睾精子成熟和生育的影响

目的通过度他雄胺对大鼠附睾精子和生育的影响,探索调节雄性生育的睾丸后作用靶点。方法使用度他雄胺20和40 mg/(kg.d)大鼠灌胃给药,连续2周。给药结束后雄雌鼠按1∶2合笼,计算生殖指数;采用计算机辅助精子分析系统分析精子活力和形态;采用SYBR-14和PI双重荧光染色计算精子存活率;采用Elisa法测定大鼠睾酮(T)和双氢睾酮(DHT)血清浓度;采用HE染色法对各组睾丸、附睾进行组织学分析。结果度他雄胺低、高剂量组双氢睾酮浓度均显著下降,分别为0.54和0.28 nmol/L(P<0.01),精子活力明显降低,分别为39.0%和28.7%(P<0.01),畸形率分别增加为10.3%和15.6%(P<0.05),最后受孕率分别降为62.5%和38.4%。而睾酮水平和交配指数均无明显变化(P>0.05),睾丸和附睾亦无明显病理学改变。结论度他雄胺通过抑制DHT生成,影响附睾精子成熟而导致大鼠不育,为今后男性避孕和不育药物研发提供了新思路。