雌激素诱导SD大鼠前列腺炎与内环境改变的关系

目的 通过雌二醇诱导SD雄鼠慢性前列腺炎,探讨SD雄鼠的内环境改变的关联性作用,为前列腺炎发生机制和治疗提供一条实验性途径.方法 3%戊巴比妥麻醉,无菌条件下去势手术;术后动物恢复5 d,30只雄鼠按照体重随机分组,每组10只.第6天低剂量组皮下注射0.25 mg/kg的雌二醇,高剂量组皮下注射1.25 mg/kg的雌二醇,溶媒对照组注射橄榄油,每天1次,连续30 d.结果 与溶媒对照组比较,低、高剂量组白细胞（WBC）、红细胞（RBC）、血红蛋白（HGB）和红细胞压积（HCT）均降低（P〈0.01）;前列腺酸性磷酸酶（PAP）明显降低（P〈0.01）;高剂量组睾酮含量明显增加（P〈0.01）,C-反应蛋白（CRP）在低、高剂量组也呈现增加的趋势,但差异没有统计学意义;溶媒对照组和给药组前列腺组织大体解剖表面未见明显差异,光学显微镜下,溶媒对照组前列腺组织结构完整、腺腔和间质无炎性细胞浸润,高剂量组和低剂量组的前列腺间质均可见炎细胞浸润;低、高剂量组大鼠脾脏均可见棕黄色颗粒沉淀,其余脏器无明显改变,胸腺、脾脏及其脏器系数均明显降低.结论 根据本实验结果,雌激素引起的慢性非细菌性前列腺炎可导致内环境血液学、血清生化,激素水平、脏器和脏器系数的一系列改变.     

大鼠睾丸组织固定法的优选研究

目的选择一种最优势、合理的固定方式以提高对睾丸组织制片效果,以配合不同种类的科学研究。方法选用10％甲醛溶液、NBF—Bouin’s、Bouin’s和改良Davidson’s四种不同的固定液对大鼠睾丸进行充分固定后,制作石蜡切片,进行HE染色,比较不同固定液中的睾丸组织学形态的差异;利用糖原特殊染色（PAS）,探讨不同固定液对睾丸糖原观察的影响;采用免疫组织化染色,测评睾丸组织内雄激素受体的固定效果。结果改良Davidson’8固定液较NBF—Bouin’s引起的曲细精管萎缩轻,形态更为清晰,用免疫组织化学方法检测雄激素更为敏感,并且改良Davidson＇s固定液在需要对精子发生进行分期时,其PAS染色的效果与Bouin＇s液固定后等同。结论与苴守圈常浦相№曲冉David0Rnn浦对女宙奥由的圈索特罩掂杯     

GLP机构档案室的建立和管理与科研档案管理之比较

档案的建立和管理在药物非临床安全性评价和科学研究中都起到非常重要的作用。我们通过查阅文献发现,关于GLP机构档案管理的文献综述极少,涉及到将它与科研档案管理作系统全面的比较的文章是没有的。现从资料档案保存机构的硬件设施、档案管理规范和应注意的问题3个方面详细介绍了资料档案管理的相关规定和经验,并将GLP档案管理规范与科研档案管理规范作比较,我们根据国家档案局发布的《科学技术研究档案管理暂行规定》和7年GLP档案管理经验以及多次国家食品药品监督管理局(SFDA)认证现场检查的经历,总结出两者在功能实现、硬件设施、温湿度要求、档案防护、制定SOP、档案管理人员资质、各方人员职责、归档范围、归档形式、资料档案的接收与审查、归档时间、保管期限、借阅返还规定、资料的书写规范性、进出记录和电子文件的保存这16个方面的异同之处,突出GLP档案管理规范的特点和重点。通过这一深入全面的比较分析,得出GLP档案管理更加明确、具体、细致和可操作。     

离体子宫平滑肌测定方法的改进

目的:探索离体子宫平滑肌测定方法中,使用增氧泵通气取代混合氧为离体子宫平滑肌供氧的可行性。方法:采用RM-6240BD多道生理信号采集处理系统,观察营养液内通入混合氧、增氧泵通气及无通气对离体子宫平滑肌活动力的影响。结果:与营养液内通入混合氧相比,离体子宫平滑肌的活动力在混合氧组与增氧泵通气组间无统计学差异(P0.05),不通气组的频率和活动力均有统计学差异(P0.05或P0.01)。结论:可以使用增氧泵通气为离体子宫平滑肌供氧,既满足了供氧,同时也可促进营养液流动,使离体子宫与营养液充分接触。     

睾丸酮对大鼠前列腺上皮细胞有丝分裂方向的影响

目的探讨丙酸睾丸酮（T）对大鼠前列腺上皮细胞染色体有丝分裂方向的影响及其差异基因表达。方法 SPF级SD雄性大鼠（110~130 g）20只,随机分为2组。深麻醉下对所有大鼠进行去势手术,恢复一周后,给药组大鼠皮下注射T,每只0.5 mg,每日1次,连续30d;对照组大鼠皮下注射橄榄油0.1 mL。取前列腺。通过免疫组化、HE染色观察结果。并做基因芯片检查差异基因表达谱。结果给药组大鼠前列腺发生形态学增生。前列腺腺腔扩张,腺上皮高度明显增高,前列腺增生。且前列腺上皮细胞染色体有丝分裂的方向与基底膜平行,而对照组前列腺上皮细胞有丝分裂的方向与基底膜垂直。AR免疫组化染色后发现给药组的前列腺上皮中,均可见到AR标记的阳性细胞,而对照组均为阴性。基因芯片和RT-PCR结果：促进细胞增殖的基因如雄激素受体相关蛋白（RAN）、TGM4和Wnt通道的WNT2等基因均上调,而抑制细胞增殖的基因如负调控Wnt通道的DKK3和促进细胞凋亡的Fas等基因下调。结论 T注射后改变了前列腺上皮细胞有丝分裂的方向,Wnt和AR信号转导通路参与了细胞增殖和有丝分裂方向改变。     

雌/雄激素比例对去势大鼠前列腺体积及其脏器系数的影响

目的探讨雌/雄激素比例对去势大鼠前列腺体积及其脏器系数的影响。方法选用雄性SD大鼠随机分为37组,分别为:35个不同雌/雄激素比例组、正常和去势对照组。给药组分别注射不同配伍剂量的雌/雄激素、对照组均注射生理盐水各一个月。最后一次注药后24h取血、处死、取材,称取前列腺重量,测量体积,并计算脏器系数。结果当丙酸睾丸酮给药剂量分别为每只鼠0.02、0.5、2.5和12.5mg时,均未见器官增生程度与苯甲酸雌二醇注射剂量呈负相关。丙酸睾丸酮给药剂量每只鼠为0.1mg时,随着苯甲酸雌二醇注射量增加,前列腺体积及其系数均增大,而当每只鼠苯甲酸雌二醇注射量达到50μg/kg时,器官增生程度不再随苯甲酸雌二醇注射剂量增加而增加。结论雌激素发挥作用需以雄激素存在为前提,雌激素并非总是呈现对抗雄激素促进前列腺增生的作用,而是在一定范围内协同雄激素促进前列腺增生。     

原代培养大鼠前列腺细胞建立前列腺增生筛药模型

目的建立原代培养大鼠前列腺上皮细胞体外筛药模型。方法无菌状态下取雄性SD大鼠腹侧叶前列腺,称量后,剪成1 mm3小块,经Ⅱ型胶原酶消化1 h后,过滤、离心获取前列腺细胞,接种于24孔板培养并对细胞进行形态学和免疫组织化学鉴定。获取的大鼠前列腺上皮细胞分别接种于96孔板和24孔板培养12 d后给予系列剂量(0.1～1000μmol/L)的他莫昔芬和阳性药物爱普列特处理72 h,利用CCK-8法检测前列腺上皮细胞存活率并计算药物IC50值,并进一步通过Giemsa染色后观察细胞生长及形态变化。结果细胞鉴定结果显示,获取的细胞具典型上皮细胞形态特征,细胞角蛋白和前列腺特异性抗原表达阳性,提示所获细胞为前列腺上皮细胞。爱普列特与前列腺上皮细胞孵育72 h后,CCK-8法检测结果显示能够明显抑制前列腺上皮细胞生长,其IC50值为42.7μM,进一步镜下观察结果显示,爱普列特未明显改变大鼠前列腺上皮细胞形态,但能导致存活细胞数减少。他莫昔芬则对大鼠前列腺上皮细胞生长无明显抑制作用,镜下观察前列腺上皮细胞数量和形态未见明显改变。结论利用原代培养SD大鼠前列腺上皮细胞可以成功建立前列腺增生体外筛选模型。     

2种检测灯盏花素血药浓度方法的比较

目的：建立测定Beagle犬血浆中灯盏花素浓度的反相高效液相色谱法和液相-质谱联用法,并将其进行多参数的两两比较。方法：采用液-液萃取法处理血清,反相高效液相色谱法测定,流动相为甲醇-水（pH3．0）=42：58,EclipseXDB-C18为固定相;将同样的样品用液相-质谱法开展平行检测;将所测得的数据做两两对比,采用SPSS统计软件进行分析。结果：2种方法测定的数据具有良好的相关性（r=0．982,P〉0．05）;最低检测限前者为0．05μg／mL,后者为0．01μg／mL,反相高效液相色谱法的最低检测限和灵敏度不及液相-质谱联用法。结论：反相高效液相色谱法可用于灯盏花素毒代动力学研究,与液相-质谱联用法检测结果无显著差异,且费用较低,不失为-种低成本且行之有效的检测方法。     

离体子宫张力测定在药物生殖毒性研究中的应用

目的:建立药物生殖毒性研究中孕鼠离体子宫平滑肌张力的测定方法。方法:SD大鼠于妊娠第6~15天(GD6-15)给予受试物,在妊娠第20天(GD20)取子宫平滑肌,分别给予不同浓度缩宫素和硫酸镁溶液刺激,选择试验的最佳条件。在此基础上,测定不同剂量组孕鼠离体子宫平滑肌张力的变化情况,采用RM-6240BD多道生理信号采集处理系统分析数据,统计结果。结果:选择0.007 U/m L缩宫素、0.008 mol/m L硫酸镁为最佳刺激浓度。随着受试物剂量的增加,加入缩宫素后,各组妊娠子宫平滑肌的频率和张力均呈逐渐上升的趋势,而加入硫酸镁后,各剂量组妊娠子宫平滑肌的活动幅度、频率和张力均呈现降低的趋势,但各剂量组与溶媒对照组相比均未见明显差异(P0.05)。结论:本研究建立了孕鼠离体子宫平滑肌张力的测定方法,该方法可以更好的反映受试物对孕鼠子宫肌的毒性作用,更加全面的评价受试物的生殖毒性。     

两种脱钙法植被鼠尾病理切片的比较

目的探讨制作大鼠尾巴标本石蜡切片的方法。方法采用盐酸脱钙液运用两种脱钙方法制作大鼠尾巴标本石蜡切片。结果两种方法制作的石蜡切片完整、无破碎,HE染色观察组织结构细胞形态完整,核浆分明,红蓝适度。结论两种方法都能制作理想大鼠尾巴标本石蜡切片,可保证病理诊断质量。