三疣梭子蟹增养殖过程对野生种群的遗传影响——以海州湾为例

为探明三疣梭子蟹人工增殖与养殖活动对野生资源的遗传影响,本文利用20对SSR引物对海州湾三疣梭子蟹野生群体与两个养殖群体进行群体遗传结构和遗传分化研究。结果表明,野生种群遗传多样性明显高于养殖群体,其群体杂合度Ho为0.8509,而两个养殖群体的杂合度Ho分别为0.4525和0.5283。海州湾野生三疣梭子蟹的 Ne、Ho、He、PIC均显著高于两个养殖群体（P<0.05）但两养殖群体的 Ne、Ho、He、PIC均无显著差异（P>0.05）。以上结果说明海州湾天然三疣梭子蟹群体的遗传多样性显著高于养殖群体。三群体间遗传分化处于中度水平（Fst,0.1085~0.1448）,基因流Nm处于1.5-2.0间,野生群体与养殖群体的遗传分化比养殖群体内部之间大,基因流也较养殖群体内部之间要小,表明野生群体与养殖群体存在一定的分化,基因流处于中等程度。因此,当前海州湾天然三疣梭子蟹遗传状况良好,养殖活动和人工增殖放流对天然资源的遗传影响还很有限,这可能与海州湾人工养殖三疣梭子蟹时间较短、人工放流的规模较小、时间较短有关。     

野生及人工养殖中华鲟幼鱼肌肉营养成分的比较

对野生及人工养殖中华鲟幼鱼的肌肉营养成分和营养品质进行了分析比较.结果表明:野生中华鲟幼鱼肌肉中水分、粗蛋白和粗灰分含量均显著高于人工养殖中华鲟(P＜0.05),而粗脂肪含量显著低于人工养殖中华鲟(P＜0.05).野生和人工养殖中华鲟幼鱼的氨基酸组成基本一致,均含有18种氨基酸,必需氨基酸指数(EAAI)分别为72.02、66.21,其构成比例符合联合国粮农组织/世界卫生组织(FAO/WHO)的标准.脂肪酸中二十碳五烯酸(EPA)与二十二碳六烯酸(DHA)的含量野生中华鲟显著高于人工养殖中华鲟(P＜0.05),分别为22.99%、7.15%.矿物质含量丰富,微量元素含量野生中华鲟明显高于人工养殖中华鲟[动物学报 53(3):502-510,2007].     

三疣梭子蟹肌肉组织中甜菜碱、糖原及无机盐变化研究

为了探讨甜菜碱、糖原及无机盐含量对三疣梭子蟹肌肉口感品质的影响,采用可见分光光度法、蒽酮比色法和原子分光光度法,分别测定了3个发育阶段（8月份幼蟹阶段、10月份交配前和12月份交配后）的野生三疣梭子蟹肌肉组织中甜菜碱、糖原及无机盐含量。结果表明：1）肌肉中甜菜碱含量在第一阶段（8月幼蟹）甜菜碱含量最低,为172 mg/100 g,10月交配前雌蟹肌肉甜菜碱含量最高,达473 mg/100 g,但12月份交配后含量减半;雄蟹肌肉则表现为从第1到第3阶段逐渐升高趋势。2）幼蟹的糖原含量极低,仅为0.8μg/mg,交配前雌雄蟹仍保持较低水平,交配后糖原含量急剧升高,雌雄蟹分别上升至11.26μg/mg和9.61μg/mg,各是交配前的6.5倍和10倍。3）肌肉无机盐中K、Na是宏量元素,含量最高,K含量336~457 mg/100 g,Na含量131~185 mg/100 g,Fe为微量元素,含量最低,仅有1.12~1.26 mg/100 g。三疣梭子蟹肌肉中的甜菜碱含量远高于一般水产品,故蟹肉入口爽滑带有甜味,且随着肌肉中糖原含量不断增加,其风味也更佳。     

青壳鸡蛋与褐壳鸡蛋品质及营养成分比较分析

为了比较青壳鸡蛋和褐壳鸡蛋品质的差异,以苏禽青壳蛋鸡和海兰褐壳蛋鸡2个鸡种为试验素材,采用笼养饲养方式,测定苏禽青壳蛋鸡和海兰褐壳蛋鸡鸡蛋的常规蛋品质和营养成分含量。结果表明：在常规蛋品质方面,苏禽青壳蛋鸡鸡蛋的哈氏单位和蛋黄色泽极显著高于海兰褐蛋鸡鸡蛋（P＜0.01）,蛋黄比率显著高于海兰褐蛋鸡鸡蛋（P＜0.05）,蛋重极显著小于海兰褐蛋鸡鸡蛋（P＜0.01）,蛋形指数、蛋壳厚度和蛋壳强度差异不显著。在营养成分方面,苏禽青壳蛋鸡鸡蛋的干物质、脂肪、胆固醇和卵磷脂含量均极显著高于海兰褐蛋鸡鸡蛋（P＜0.01）,蛋白质和氨基酸含量差异不显著。钙、镁、铜含量两者差异不显著,但苏禽青壳蛋鸡鸡蛋的铁、锌、锰、硒、磷含量均极显著高于海兰褐蛋鸡鸡蛋（P＜0.01）,可见鸡种对鸡蛋常规品质和营养成分均具有一定的影响。     

不同产地三疣梭子蟹的稳定同位素比值特征及原产地溯源

探索稳定同位素对三疣梭子蟹产地溯源的可行性,可为保护地理标志产品、追溯原产地来源提供理论依据。本研究以黄海、渤海和东海3个主产区海域的三疣梭子蟹为对象,分析了其碳、氮稳定同位素值差异性和不同组织中稳定同位素比值的相关性。结果表明: 不同产地的碳、氮稳定同位素比值有显著性差异,不同组织之间有明显的同位素分馏效应。利用建立的判别分析模型,通过三疣梭子蟹不同组织稳定同位素比值进行产地判别分析,采用肌肉和腮中碳、氮稳定同位素的产地判别正确率(>95%)明显高于肝胰性腺,说明肌肉和腮稳定同位素比值可以对不同海域的三疣梭子蟹进行有效区分。本研究填补了目前三疣梭子蟹稳定同位素溯源技术的研究空白。     

三疣梭子蟹Profilin基因全长cDNA的克隆与表达分析

三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）是我国沿海重要养殖品种之一,近年来养殖病害呈逐年上升趋势,制约了三疣梭子蟹养殖产业的健康可持续发展。克隆三疣梭子蟹免疫相关基因,研究免疫基因的功能和作用机制,可为三疣梭子蟹养殖病害的防治奠定基础。本研究从三疣梭子蟹血细胞全长cDNA文库中克隆了742 bp 的profilin基因全长cDNA。Profilin全长cDNA中开放阅读框长375 bp,编码125 aa。推导的三疣梭子蟹profilin理论等电点pI 5.87,氨基酸序列与冈比亚按蚊（Anopheles gambiae）profilin同源性最高,序列一致性为42.9%。荧光定量RT-PCR分析结果显示在正常的三疣梭子蟹机体中,血细胞profilin表达水平最高,其次为肝胰脏;在致病菌副溶血弧菌（Vibrio parahaemolyticus）诱导后,血细胞中profilin表达量显著上升（P<0.01）,表明profilin可能参与了三疣梭子蟹的免疫防御反应,是一个免疫相关因子。     

海、淡水养殖日本鳗鲡肌肉和鱼皮营养分析比较

为了比较海、淡水养殖日本鳗鲡(Anguilla japonica)肌肉和鱼皮营养成分差异, 采用生物化学方法对海水与淡水养殖日本鳗鲡肌肉和鱼皮的一般营养成分、氨基酸含量、脂肪酸含量和矿物质含量进行测定与分析。结果显示, 海、淡水养殖日本鳗鲡鱼皮的水分、粗蛋白和灰分含量均显著性低于肌肉(P0.05), 但鱼皮粗脂肪含量显著高于肌肉(P0.05)。淡水养殖日本鳗鲡肌肉的粗蛋白含量显著性高于海水养殖日本鳗鲡(P0.05)。海、淡水养殖日本鳗鲡肌肉总氨基酸含量分别为50.22%和54.10%, 鱼皮总氨基酸含量分别为42.56%和45.80%。海、淡水养殖日本鳗鲡鱼皮呈鲜味氨基酸占氨基酸总量显著性高于肌肉(P0.05)。海、淡水养殖日本鳗鲡肌肉和鱼皮均以不饱和脂肪酸为主(65.96%67.51%), 并以单不饱和脂肪酸C18: 1n9含量为主(38.64%44.79%)。海水养殖日本鳗鲡肌肉矿物质元素(Fe、Ca、Cu、Na)和鱼皮矿物质元素(Fe、Mn、Na)的平均含量均显著高于淡水养殖日本鳗鲡(P0.05), 但Zn含量显著低于淡水养殖日本鳗鲡(P0.05)。研究表明, 不同养殖环境的日本鳗鲡肌肉和鱼皮营养成分丰富, 淡水养殖日本鳗鲡肌肉和鱼皮的氨基酸含量和脂肪酸组成方面稍优于海水养殖日本鳗鲡, 而海水养殖环境日本鳗鲡肌肉和鱼皮的矿物质元素含量得到较高的富集。       

不同饲养方式对各产蛋阶段鸡蛋品质的影响

目的：比较不同饲养方式对鸡蛋品质的影响,为蛋鸡产业化生产提供指导。方法：以如皋黄鸡为试验素材,采用笼养和平养两种饲养方式,测定不同产蛋阶段常规蛋品质、营养成分和矿物元素含量。结果：产蛋初期,平养条件下蛋黄色泽、脂肪和胆固醇含量极显著高于笼养（P＜0-01）,铜和铁含量显著低于笼养（P＜0-05）。产蛋中期,平养条件下蛋壳强度、蛋黄重量、蛋黄比率、蛋黄蛋白比均显著低于笼养（P＜0-05）;哈氏单位以及蛋白质、维生素E和氨基酸含量均显著高于笼养（P＜0-05）;蛋黄色泽、维生素A和胆固醇含量均极显著高于笼养（P＜0-01）,锰含量极显著低于笼养（P＜0-01）。产蛋后期,平养条件下胆固醇含量极显著高于笼养（P＜0-01）;蛋白质、维生素A和铜含量显著高于笼养（P＜0-05）;锰含量极显著低于笼养（P＜0-01）;硒含量显著低于笼养（P＜0-05）。结论：不同产蛋阶段,饲养方式对鸡蛋品质均有一定的影响。     

虹鳟(♀)×山女鳟(♂)杂交F1及其亲本肌肉营养成分和肌肉质地的比较

以虹鳟(Oncorhynchus mykiss)、山女鳟(O.masou masou)及其杂交F1(虹鳟♀×山女鳟♂)为研究对象,分别进行了肌肉营养成分和肌肉质地测定.结果显示,(1)杂交F1肌肉粗脂肪含量显著低于双亲(P＜0.05),含水率和粗蛋白含量介于双亲之间,其中含水率最高者为山女鳟,粗蛋白含量最高者为虹鳟,并且三者间差异显著(P＜0.05);(2)杂交F1肌肉氨基酸总量、必需氨基酸总量、非必需氨基酸总量和鲜味氨基酸总量均显著高于双亲(P＜0.05),其半必需氨基酸含量高于虹鳟,但低于山女鳟;(3)3种鱼肌肉营养品质评价结果表明,杂交F1肌肉必需氨基酸指数(77.77)明显高于虹鳟(63.67),略低于山女鳟(79.19);(4)杂交F1肌肉肉色(亮度、红度、黄度)和嫩度与双亲相比差异显著(P＜0.05),按肉色和嫩度测定值由高到低排列依次为山女鳟＞杂交F1＞虹鳟.研究结果表明,杂交Fl继承了山女鳟肉质优良的特性,肌肉品质优于虹鳟,这为虹鳟和山女鳟杂交育种提供了参考.     

秦岭细鳞鲑野生种群与人工养殖种群肌肉营养成分的差异

秦岭细鳞鲑(野生种群)是国家Ⅱ级重点保护水生野生动物。为了揭示野生种群与人工养殖种群的性状差异，科学区分秦岭细鳞鲑野生种群与人工养殖种群，本实验探究了秦岭细鳞鲑野生种群和人工养殖种群肌肉营养成分的差异。结果表明：野生种群和人工养殖种群的肌肉一般营养成分占比、脂肪酸组成及含量、矿物质和微量元素含量等均存在显著差异，而氨基酸组成及含量总体上无显著差异；野生种群肌肉中水分、粗蛋白和粗灰分含量显著高于人工养殖种群(P<0.05),粗脂肪含量显著低于人工养殖种种群(P<0.05);C_12:0仅在野生种群中被检测到，野生种群饱和脂肪酸、单不饱和脂肪酸和多不饱和脂肪酸含量显著低于人工养殖种群(P<0.05),K、Na、Ca、Mg、P、Zn含量显著高于人工养殖种群(P<0.05)。综上，肌肉脂肪酸组成及含量、矿物质和微量元素含量差异较大，可作为野生种群与人工养殖种群鉴定的依据，为秦岭细鳞鲑的保护与管理提供参考。     

基于 DArT 标记的三疣梭子蟹地理种群遗传多样性分析

三疣梭子蟹是中国重要的水产养殖动物。目前,其养殖业的蟹苗主要还是依靠野生资源,但种质（生长速度、肌肉品质和抗病性）退化现象严重,因此迫切需要了解个体、种群和物种遗传多样性。报道了一种检测三疣梭子蟹多样性芯片技术（diversityarraystechnology,DART）。DArT技术采用芯片可同时检测数百个基因座,即使没有基因组DNA序列信息也可以分析遗传多态性。采用了风tL／TaqI复杂性降低方法,多态性效率为12．5％。利用多样性芯片杂交获得313个DArT标记。这些DArT标记用于点制多态性富集芯片,DArT标记具有较高的多态性信息含量（polymorphisminformationcontent,PIC）。最后根据0／1矩阵获得UPGMA系统进化树,结果表明样品间的遗传多样性与文献报道一致。芯片质量检测中包括赋值重复性为99．1％,同一样品不同个体间的差异不显著,其差异介于0．7％～1．6％。研究表明,DArT技术具有高通量和低成本的显著特点,该技术可为三疣梭子蟹资源保护和良种选育提供支持。     

新型花生沙配方优化研究

通过模糊数学感官评价法,结合单因素试验和正交试验对新型高营养花生沙的配方进行优化,并对优化配方后花生沙的营养品质（蛋白质、脂肪含量、淀粉的消化性）进行评价。结果表明：花生沙最佳配方为以花生质量为基准（100%）、低温花生粕粉添加量10%、木糖醇添加量15%、面粉添加量18%、菊粉添加量8%,以该配方制备的花生沙口感细腻绵软、色泽均匀、风味较佳,有良好的感官品质,且蛋白含量显著增加（P＜0.05）、脂肪含量显著降低（P＜0.05）、淀粉消化速率相对较慢,符合当代人的健康饮食需求。     

三疣梭子蟹腺苷酸转移酶(ANT)基因的克隆与分析

腺苷酸转移酶(Adenine nucleotide translocase,ANT)是线粒体内膜上负责能量分子传导的转运蛋白,在能量代谢中起着关键作用。为了研究ANT基因在甲壳动物蜕皮中的作用,采用RT-PCR和c DNA末端快速扩增技术(RACE技术)克隆得到三疣梭子蟹ANT基因的序列全长(Gen Bank登录号:KM921660),该序列全长1 414 bp,包括132 bp的5'端非编码区,352 bp的3'段非编码区,具有930 bp的完整开放阅读框(ORF),编码309个氨基酸。将该ANT基因序列推导的氨基酸序列与已公布的其他物种ANT序列进行系统进化树分析发现,三疣梭子蟹ANT基因与其他甲壳动物ANT基因聚为一支,其中与拟穴青蟹ANT一致性高达96%。通过氨基酸序列比对发现,三疣梭子蟹ANT序列具有3个保守的线粒体穿膜功能结构域,是形成能量分子传导的转运通道,催化细胞质中ADP和线粒体内ATP间进行跨膜交换。采用实时荧光定量PCR技术,分析三疣梭子蟹ANT基因的组织差异表达,结果表明ANT基因在三疣梭子蟹肌肉(Ms)中的表达量最高,在其他组织中表达量均较低,具显著差异(P0.05);在三疣梭子蟹蜕皮周期中,肌肉中ANT基因的表达量A期最高(P0.05),然后下降,至C期最低,随后又逐渐上升至D1期,在D1期出现第2个峰值后再逐渐下降。研究结果说明ANT基因与三疣梭子蟹肌肉活动密切相关,可能在蜕皮调控中发挥重要作用。     

先天性白内障大鼠血液生化及血液流变学分析

目的：测定先天性白内障大鼠血液常规、生化正常值及血液流变学变化。方法采用XS-800i血常规分析仪和OLYMPUS AV2700生化自动分析仪对185～211 g大鼠共计90只进行血液常规和生化检测及用SA-6600自动血流变测试仪对血液进行流变学的测定。结果血像检测结果是白内障与正常对照同性比较无差异显著性（P ＞0.05）;小眼白内障与正常对照同性比较红细胞宽度（RDW）间差异显著（P ＜0.01或 P ＜0.05）。血生化检测结果是白内障大鼠与正常对照组同性间比较白蛋白（ALB）差异显著（P ＜0.01或P ＜0.05）雌性与对照组比较尿素（Ure）差异显著（P ＜0.01）,小眼白内障雌性与正常对照比较肌酐（Cr）差异非常显著（P ＜0.01）。白内障、小眼白内障大鼠的红细胞是雄性的低于雌性（P ＜0.05,P ＜0.01）而血小板是雄性的高于雌性（P ＜0.01）,肌酐是雄性低于雌性P ＜0.01）,正常组雄雌间无差异;血液流变学各组间无差异显著性。结论白内障大鼠与正常组大鼠间某些血常规及生化指标有一定的差异,该数据为该鼠在这领域的使用提供参考。     

池塘循环水养殖对混养草鱼食用品质的影响

为探究养殖模式对草鱼(Ctenopharyngodon idellus)鱼肉品质的影响,实验对两种养殖模式下(传统池塘养殖和池塘循环水养殖)草鱼的食用品质进行了差异比较。结果表明,循环水养殖草鱼肌肉白度和弹性高于传统池塘养殖的草鱼,且其不饱和脂肪酸和必需氨基酸含量均显著高于传统池塘养殖;其中, n-3和n-6系列不饱和脂肪酸含量显著高于传统池塘养殖草鱼,是其1.2倍,使得草鱼的肌肉品质和营养品质更佳。此外,循环水养殖可降低草鱼中带有土腥味和青草味的己醛、庚醛和1-辛烯-3-醇等物质的含量,且鲜味核苷酸(IMP)含量高于传统池塘养殖草鱼,使得草鱼的风味更鲜美、浓厚。研究表明,循环水养殖草鱼的肌肉品质和营养特性均优于传统池塘养殖。     

三疣梭子蟹蜕壳周期肝胰腺、外壳和鳃中钙含量的变化

研究测定了三疣梭子蟹蜕壳周期肝胰腺、鳃和外壳中的钙含量。结果显示,在不同时间,鳃中钙含量变化较小,各时间点差异不显著;蜕壳前期至蜕壳刚完成阶段三疣梭子蟹(软壳蟹)肝胰腺中钙含量最高,蜕壳后第4 d肝胰腺中钙含量最低。三疣梭子蟹外壳中钙含量随着外壳的硬化(钙化)逐渐增加,完全硬化后外壳中钙含量达到最高。研究表明,蜕壳后三疣梭子蟹肝胰腺中钙含量的降低与外壳的钙化之间具有关联性,肝胰腺在三疣梭子蟹蜕壳后钙的储存中起着重要作用,而鳃在钙离子储存中所起的作用可能小于钙转移的作用。     

三疣梭子蟹的第二次卵巢发育规律

2005年3—5月，在室内养殖条件下对第二次卵巢发育的三疣梭子蟹进行连续采样，系统研究了其第二次卵巢发育期间的卵巢指数（GSI）、肝胰腺指数（HSI）、卵巢外部特征、卵巢发育分期及其组织学变化。结果表明：① 三疣梭子蟹第二次卵巢发育过程可以分为4期,Ⅰ期卵巢为乳白色或者淡黄色细带状,卵巢中主要为卵黄合成期的卵母细胞和内源性卵黄合成前卵母细胞；Ⅱ期为淡黄色或橘黄色，主要为外源性卵黄合成期的卵母细胞；Ⅲ期卵巢为橘红色，主要为外源性卵黄合成期的卵母细胞和近成熟期的卵母细胞；Ⅳ期卵巢发育基本成熟，肉眼可见卵粒，主要为成熟期的卵母细胞；② 三疣梭子蟹第二次卵巢发育期间，GSI显著增加，HSI变化不显著，GSI和发育天数呈显著正相关性，HSI和GSI的变化没有显著的相关性。     

恩诺沙星在三疣梭子蟹主要组织中的代谢动力学

应用反相高效液相色谱法（RP-HPLC）研究了三疣梭子蟹（portunus trituberculatus）经口灌10 mg/kg恩诺沙星后体内的药代动力学规律。结果表明口灌给药后,三疣梭子蟹肝胰腺、肌肉和血淋巴组织中的恩诺沙星达峰速度快,肝胰腺和血淋巴在给药24h都有双峰现象出现。恩诺沙星在肝胰腺、肌肉、血淋巴中的Cmax分别为11.235μg/g、0.850μg/g和0.858μg/g,Vd/F为7.954 L/kg、10.367 L/kg和0.345 L/kg。t1/2β分别为283.361 h、47.869 h和17.681 h,AUC分别为245.618μg/g.h、24.753μg/g.h和20.111μg/g.h。给药后5 min在肝胰腺中即可检测到恩诺沙星的代谢产物环丙沙星,而肌肉和血淋巴在给药后2 h才能检测到,其含量均处于较低水平。用3P97软件对各组织中的药时数据进行房室模型拟合,结果显示：三疣梭子蟹口灌给药后,恩诺沙星在血淋巴、肌肉和肝胰腺中的代谢过程均符合一级吸收二室开放模型,而环丙沙星不能用房室模型来描述。     

三疣梭子蟹两种养殖模式浮游植物与产量的比较

为获知三疣梭子蟹（Portunus trituberculatus）两种养殖模式浮游植物与产量是否存在差异,于2012年6月—12月在宁波市象山县东盛水产养殖有限公司进行。结果显示：浮游植物共7门32属57种。模式Ⅰ浮游植物7门30属54种;模式Ⅱ5门19属32种。藻类平均细胞密度、平均生物量均为模式Ⅰ〉模式Ⅱ。Margalef指数、Shannon-Wiener指数均值模式Ⅰ〉模式Ⅱ,Pielou指数均值模式Ⅰ〈模式Ⅱ。养殖前期（8月）、中期（10月）、起捕（12月）时,对三疣梭子蟹壳长、壳宽、体重测量取其平均值,均为模式Ⅰ〉模式Ⅱ。三疣梭子蟹产量模式Ⅰ〉模式Ⅱ。研究表明,模式Ⅰ优于模式Ⅱ。     

基于仿生技术对不同产地当归阿魏酸含量与滋味的关联性研究

目的：比较45个产地当归的滋味及阿魏酸含量差异,探讨滋味与阿魏酸含量的相关性,从而评价不同产地当归品质的优劣。方法：运用电子舌技术测定甘肃省45个县市当归样品的9种滋味,HPLC法测定阿魏酸含量,采用95%可信区间重叠法进行统计分析与比较味觉及阿魏酸差异,并将9种滋味与阿魏酸含量进行相关性研究,为当归药材的品质评价提供参考。结果：GS19（西宁县）阿魏酸含量最高（0.29%）,GS37（西当县）甜味值最高,GS38（高台县）苦味值最高,GS14（合水县）鲜味值最高。当归滋味与其品质相关,阿魏酸与鲜味值呈显著正相关（R=0.508,P=0.000,n=45）,与苦味、涩味、甜味、咸味、苦味回味、鲜味回味值无显著相关性。结论：不同产地当归的鲜味值差异反映阿魏酸含量的高低,故可用电子舌技术评价及快速鉴别药材的品质。