经大豆DNA溶液处理的水稻后代种子的粗蛋白和氨基酸含量分析初报

以大豆为外源DNA供体,用浸种及幼苗期浇灌法和花粉管通道法直接将大豆总DNA导入受体水稻,经常规栽培获得水稻后代种子。采用微量凯氏定氮法和氨基酸自动分析仪进行水稻后代种子糙米的粗蛋白含量和氨基酸含量的测定。结果显示:三组经大豆DNA溶液处理获得的水稻后代种子糙米粗蛋白平均含量分别为16.42%、16.80%和19.87%,与对照组相比有明显提高,统计分析都达到极显著的差异(P < 0.01);在氨基酸含量测定中,有些材料的总氨基酸(除色氨酸以外)含量高达17.20%、16.86%和16.09%,其中赖氨酸的含量分别为0.60%、0.60%和0.57%,与对照组相比也有明显提高,统计分析差异也都达到极显著水平(P < 0.01)。本试验结果充分说明,利用大豆总DNA的导入方法有可能达到迅速有效地提高稻米蛋白质及赖氨酸含量的目的。     

导入反义蜡质基因改良水稻稻米的食味品质和营养品质

经PCR、Southern blot和稻米GUS检测,蜡质基因反义片段与gus构成的融合基因已整合到8株水稻基因组中,并能正确表达。通过稻米GUS染色追踪分析获得转反义蜡质基因纯合后代。将转基因植株的稻米送农业部稻米及制品质量监督检验测试中心进行糙米蛋白质含量和直链淀粉含量测定。结果显示：（1）在转反义蜡质基因纯合的超2-10粳稻后代中,大多数单株糙米在直链淀粉含量降低的同时,蛋白质含量有不同程度提高,糙米蛋白质含量和直链淀粉含量呈显著负相关关系;（2）对照糙米直链淀粉平均含量和糙米蛋白质平均含量分别为13.4%和9.5%。在转基因植株中,稻米直链淀粉含量最低的为11.4%,而蛋白质含量也相对最高,为13.5%。本试验结果表明在水稻中导入反义蜡质基因不仅能够降低水稻稻米的直链淀粉含量,还有可能提高水稻稻米的蛋白质含量。     

含不同Anti-Waxy基因拷贝数的稻米直链淀粉含量分析

将含单拷贝Anti-Waxy基因的纯合植株分别作为父本或母本进行正反交,获得两组含双拷贝Anti-Waxy基因的杂交后代,分析了未转基因对照、转基因亲本及两组杂交后代糙米直链淀粉含量以揭示不同Anti-Waxy基因拷贝数对降低稻米直链淀粉含量程度的影响.结果显示,2个单拷贝转基因水稻糙米直链淀粉平均含量分别为10.72%和11.13%,比对照分别降低17.98%和14.84%;两组正交和反交杂交后代糙米直链淀粉平均含量分别为8.96%和8.23%,其平均值为8.60%,比2个转基因杂交亲本糙米直链淀粉含量分别降低19.78%和22.73%,比对照降低了34.20%.结果表明,增加转基因水稻基因组中Anti-Waxy基因拷贝数在一定程度上能够进一步降低稻米直链淀粉含量,通过将独立转化获得同品种转基因植株之间杂交可以成为获得高表达转基因植物的途径.     

豌豆花DNA导入小麦后种子蛋白质组分变化的研究

豌豆花ＤＮＡ直接导入小麦体可诱导小麦种子蛋白质组分发生明显的变化,小麦种子蛋白质和总氨基酸含量都比对照增高２０％。这些变异性状能稳定遗传给后代。因此直接导入豌豆花ＤＮＡ技术可以为小麦品质改良和分子育种研究提供一条新途径。     

转HSSP基因大豆的分子检测和遗传稳定性分析

HSSP是用大豆密码子改造的10 kD玉米醇溶蛋白基因。在前期研究中,从获得的转基因大豆中筛选到1份单拷贝转基因材料GSDH5。该研究采用染色体步移法获取转基因大豆GSDH5的T-DNA插入位点的左边界旁侧序列,对获得的左边界旁侧序列进行分析,设计特异性引物,建立转基因大豆GSDH5特异性检测方法;采用Real-time PCR检测外源基因在转基因大豆不同组织部位(根、茎、叶、花和种子)中的表达量,采用RT-PCR和Western blot检测外源基因在转录和翻译水平上的遗传稳定性,并对转基因大豆GSDH5中的粗蛋白、含硫氨基酸含量及主要农艺性状进行测定分析,为培育高含硫氨基酸转基因大豆新品种奠定基础。结果表明:(1)分子鉴定显示,外源基因HSSP和筛选标记基因Bar成功整合到受体大豆‘东农50’基因组中,且以单拷贝的形式整合到大豆基因组中。(2)HSSP基因成功插入到大豆基因组1号染色体非编码区52 873 883 bp处。(3)HSSP基因在转基因大豆GSDH5的种子中特异性表达,且在T_2～T_4代转基因大豆中能够稳定遗传并表达。(4)‘东农50’粗蛋白含量在41.53%～43.32%之间,GSDH5粗蛋白含量在40.18%～43.03%之间,两者相比无显著差异;GSDH5种子中硫氨基酸占种子干样的比例为1.35%,占种子蛋白的比例为3.14%,与转基因受体品种‘东农50’相比,占比显著升高,分别增加了11%和16%。(5)转基因大豆GSDH5植株与受体品种‘东农50’在单株荚数、百粒重、株高、结荚习性、花色、叶形等方面均无显著差异,证明HSSP基因的插入对大豆植株的生长发育无不良影响。研究认为,转基因大豆GSDH5材料具备进一步培育成高含硫氨基酸大豆新品种的潜力。     

利用多菌种混合发酵降解饼粕中粗蛋白的实验研究

对凝结芽孢杆菌、圆孢芽孢杆菌、短小芽孢杆菌和球形芽孢杆菌在菜籽饼粕中混合发酵降低其大分子粗蛋白含量提高游离氨基酸含量的发酵工艺进行了研究。结果表明其最佳发酵工艺条件：4种菌种接种量比例为(1：1：3：1),含水量60％,接种量15％,发酵25d,粗蛋白降解率达41．98％,游离氨基酸含量提高10．18倍。为工业上生产菌肥提供了理论基础。     

Taq DNA聚合酶功能区域的定位

通过参Ｕ法定点突变产生了ＴａｑＤＮＡ聚合酶Ｎ端分别缺失３个,２３５个,２８７个和４４３个氨基酸的４个缺失体,利用Ｂａｌ－３１连续缺失法产生了ＴａｑＤＮＡ聚合酶的Ｃ端分别缺失了２个、１６个、２９个、３２个、３４个氨基酸的５个缺失体．经ＤＮＡ聚合酶活性测定表明Ｎ端缺失３个,２３５个,２８７个氨基酸后活力和完整的Ｔａｑ相近,而缺失４４３个氨基酸后则失去了ＤＮＡ聚合酶活力;Ｃ端的５个缺失体都失去了ＤＮＡ聚合酶活性．据此ＴａｑＤＮＡ聚合酶的功能区域被定位在２８７～８３２氨基酸之间．     

转反义蜡质基因‘湘晴’及其杂交稻米的直链淀粉含量研究

利用根癌农杆菌介导将反义蜡质基因(anti-Waxy)导入三系恢复系湘晴水稻获得转基因植株.从T1代外源基因呈单拷贝整合的转基因湘晴水稻中选取3个稻米直链淀粉含量降低较明显的单株继续种植得到纯合后代.以纯合转基因植株及湘晴水稻(对照)为恢复系分别与寒丰不育系杂交,获得4组杂交稻后代(F2).3个T3代纯合转基因湘晴水稻糙米(T4)直链淀粉含量分别为14.42%、13.96%和14.72%,对照为16.04%;3组由转基因湘晴水稻为父本杂交制种后代(F2)糙米直链淀粉含量分别为14.53%、13.77%和14.64%,对照杂交稻(F2)为16.22%.研究表明,导入湘晴水稻中的反义蜡质基因不仅能够降低湘晴稻米直链淀粉含量,还能够进一步抑制杂交后代的稻米直链淀粉合成.     

白苏子和荠Lin子形态特征及其化学成分的研究

对白苏子和荠Lin子两种种子的脂肪油,氨基酸,矿质元素等化学成分进行分析,结果表明,两种种子均含有丰富的脂肪油,含量分别为40．18％和20．62％,其脂肪油的主要成分为：亚麻酸,亚油酸,油酸,棕榈酸,硬脂酸等,其中不饱和脂肪酸的含量分别为92．759％和92．990％,具有较高的营养价值,此外,还含有丰富的氨基酸和种类齐全的矿质元素,其种子形状大小,纹饰特征是两种种子鉴别的重要依据。     

离子束介导玉米DNA导入水稻引起遗传变异的RAPD分析

本实验采用４０ 个随机引物对低能离子束介导紫玉米全ＤＮＡ 转化水稻早籼２１３ 获得的８ 个玉米稻株系基因组ＤＮＡ 进行ＲＡＰＤ检测。其中３６ 个随机引物得到扩增图谱。统计分析图谱中的各类扩增带,其中变异株系与早籼２１３ 的相似率为９１．２—９５．５％ 。差异带占总带数的８．９—１７．７％ ,说明外源ＤＮＡ 导入受体细胞引起后代基因组ＤＮＡ 的显著变异,这些变异很可能是表型及生理性状变异得以稳定遗传的物质基础。     

海藻工业废料的组成及其利用价值

测定了海藻工业废料中粗蛋白、粗纤维和氨基酸的组成:在海带废渣中,粗蛋白含量达20％以上,江蓠经简单碱处理,可以提取粗蛋白总量中75％的氨基酸。这些废料中,富含人体及动物必需氨基酸,尤以赖氨酸、精氨酸和蛋氨酸的含量更为显著。本文讨论了这些废料的利用价值及途径。     

FT-NIRS技术应用于稻米直链淀粉含量分析研究

运用近红外光谱快速分析技术,使用偏最小二乘法建立了近红外光谱和水稻糙米直链淀粉含量的数学模型,并进行糙米直链淀粉含量预测.结果表明糙米近红外光谱与其直链淀粉含量具有良好的相关性,决定系数r2=0.8429,最大绝对误差4.82%,平均误差2.30%.该方法在不破坏样品的前提下快速分析水稻直链淀粉含量,可用于稻种资源的快速鉴定,对于水稻优质育种及其相关研究具有重要意义.     

双孢蘑菇子实体营养成分分析

测定了双孢蘑菇子实体中氨基酸、矿质元素、多糖、粗蛋白、粗脂肪、灰分、粗纤维、核苷酸、维生素C和SOD等含量。结果表明,粗蛋白含量为37．86％,在测定的18种氨基酸中含有17种氨基酸,8种必须氨基酸含量占氨基酸总量的42．30％;必需氨基酸与非必需氨基酸比值（E／N）为0．73。还含有丰富的多糖、纤维素、超氧化物歧化酶（SOD）和核苷酸类物质。     

用连续发酵工艺由味精废液制取单细胞蛋白

用谷氨酸发酵液经一步冷冻等电法提取后的废液生产饲料酵母,经15m3气升式反应器连续发酵试验,其菌体干物质浓度平均为24．88g／L,稀释率0.187h-1,生产干酵母能力为4．65kg／m3·h,发酵单位电耗2．872kW·h／m3,生产成本在1700元,吨(饲料酵母)左右。饲料酵母粗蛋白含量在60％以上,18种氨基酸齐全,氨基酸总量达50％,达到部颁一级饲料酵母的标准。味精废液经酵母菌处理后,COD去除率74．7％。经试验统计,每开废液中获得1g菌体干物质需消耗COD 1625mg／L。     

野生经济植物资源橡籽仁可利用价值的研究

以京白种鸡作鸡作试验动,以玉米、稻谷作对照,采用鸡真代谢能（ＴＭＥ）法研究野生经济植物资源橡胶籽仁的可利用营养价值。结果表明,橡籽仁１ｋｇ含量总能（ＧＥ）１６．５３ＭＪ,表观代谢能（ＡＭＥ）１１．１３ＭＪ,真代谢能（ＴＭＥ）１１．６６ＭＪ,,含粗蛋白（ＣＰ）１０．６３％,ＣＰ的表观利用率（ＣＰＡＡ）４５．５５％,真利用率（ＣＰＴＡ）４９．８３％,１７种氨基酸（ＡＡ）总含量９．２３％,必需氨基酸（Ｅ     

角结膜缘上皮良、恶性病变细胞核DNA原位图像定量分析

应用真彩色医学图像分析技术,对５１例角结膜缘上皮良、恶性病变（其中上皮增生１９例,不典型增生６例,原位癌１４例,鳞状细胞癌１２例）进行了ＤＮＡ原位定量分析研究．结果显示：原位癌和鳞状细胞癌ＤＮＡ含量明显增加,多为高倍异倍体细胞,ＤＮＡ直方圆明显右移,峰值主要位于＞５Ｃ处,≥５Ｃ细胞分别占７８．８９％和７８．３１％;上度增生病变ＤＮＡ含量较低,多为低倍整倍体细胞,ＤＮＡ直方图峰值位于２Ｃ～４Ｃ处,２Ｃ～４Ｃ细胞占８８．５９％;上皮不典型增生病变ＤＮＡ含量介于良性病变和癌之间,ＤＮＡ直方图逐渐右移,２Ｃ～４Ｃ细胞占５８．６２％,≥５Ｃ细胞占４１．３８％。以上数据经统计学处理各组间有显著性差异。表明ＤＮＡ倍性程度与肿瘤的增殖程度呈正相关,高倍异倍体细胞随肿瘤恶性程度的增高而增多。作者认为ＤＮＡ原位图像定量分析可为角结膜缘上皮良、恶性病变的诊断、分级及早期发现癌变趋势提供一个可靠的参考指标。     

大豆辐射育种的研究

采用X、钴~(60)-γ射线照射大豆干种子能引起后代生育期、含油量、丰产性、抗倒伏性等的变异。生育期的变异一般以M_2生育期的变异起主导作用,在M_2发生成熟期变异后,有传递给后代的性能。从钴~(60)-γ射线5,000伦琴照射东农4号中选出比对照早熟25天的极早熟类型。用X、γ射线照射大豆干种子能诱发后代子实内粗脂肪含量的变异,通过选择能选出含油量高的品种,如从X射线照射满仓金的后代中选出黑农6号,四年平均粗脂肪含量为23.25％,比对照满仓金的粗脂肪含量四年平均为22.25％提高1％。X、γ射线照射大豆种子对后代的产量及抗倒伏性均有影响,通过选择能选出抗倒伏及丰产的大豆品种,并能分离出新的变异类     

盒子草氨基酸和糖类成分分析

本文通过对盒子草氨基酸和糖类成分分析,结果表明：总氨基酸含量为１１．３３％,其中人体必需氨基酸为４．９１％,碱性氨基酸为１．８３％,中性氨基酸为６．８２％,酸性氨基酸为２．６８％。总糖含量为１３．１３％,其中多糖为５．２９％,低聚糖为４．６８％,还原糖为３．１６％。     

水稻籽粒游离氨基酸含量及其产量的种子和母体遗传效应分析

本文利用朱军等提出的禾谷类作物种子数量性状平均数遗传模型,探讨了水稻籽粒游离氨基酸含量及其产量的遗传效应．结果表明：籽粒游离氨基酸含量、游离氨基酸产量除受控于种子直接加性效应外,还受母体植株加性效应和显性效应的作用,且母体效应比种子直接加性效应更重要,其中尤以母体显性效应最重要．2个性状种子直接遗传率和母体遗传率均达显著或极显著水平,狭义遗传率均较高,基因累加选择的同时不能忽视杂种优势利用．游离氨基酸含量与游离氨基酸产量细胞质效应、母体显性效应间存在极显著相关性．     

秸秆发酵液对大豆种子萌发的影响

用大豆、玉米和水稻秸秆,自然发酵1、3、5d的发酵液,浸泡大豆(Glydnne,max)种子8h,置于室温下培养。结果显示玉米秸秆自然发酵5d的发酵液浸种,大豆种子的发芽指数比对照组增加了31．70％,活力指数是对照组的1．86倍。玉米秸杆发酵液有效地促进了大豆种子的萌发。