香蕉果实成熟软化时果皮和果肉中α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶活性的变化

阿拉伯糖是果实软化过程中变化最明显的细胞壁糖残基之一,α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶是导致细胞壁多糖中阿拉伯糖残基降解的主要糖苷酶。为阐明该酶在香蕉果实成熟软化中的作用,实验对香蕉贮藏过程中果皮和果肉中该酶活性以及果实硬度、呼吸强度和乙烯释放量的变化进行了研究。结果表明:α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶在果实初期的变化很小,到果实硬度开始急剧下降时达到最大,增加量达10倍以上,且果肉中的酶活性大于果皮中;乙烯吸收剂处理延缓了香蕉果实呼吸和乙烯高峰的出现时间,降低了果实硬度、果皮和果肉中α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶活性变化的速度和幅度。以上结果表明α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶起诱导香蕉果实成熟的作用,在果实的软化中起着十分重要的作用,且其活性受乙烯的调节。     

香蕉果实软化相关β-半乳糖苷酶基因的克隆及其表达分析

β-半乳糖苷酶（β-galactosidase）通过分解细胞壁半纤维素切除半乳糖键而参与果实软化。为了阐明香蕉（Musasp．）果实成熟过程中的软化与细胞壁代谢酶β-半乳糖苷酶基因表达之间的关系,采用RT-PCR方法,从成熟香蕉果实果肉中分离了编码β-半乳糖苷酶基因的部分cDNA（MA-Gal）,序列分析表明,MA-Gal包含927bp,编码309个氨基酸,包含5个β-半乳糖苷酶结构域（典型真核生物中β-半乳糖苷酶包含7个结构域）,推导的MA-Gal蛋白质中有β-半乳糖苷酶蛋白的催化活性部位GGPIILSQIENEY（F）;系统进化树分析结果表明MA-Gal属于第一类β-半乳糖苷酶基因（该类主要在果实中表达）;β-半乳糖苷酶活性和硬度的变化表明其与香蕉果实硬度变化密切相关;Northern分析显示,跃变前期的果肉中,MA-Gal基因的表达量很低,后随着果实的软化表达量不断增加,并在呼吸跃变后达到最高。所有结果表明,MA-Gal参与香蕉果实成熟过程中的软化。     

香蕉果实后熟过程中果肉软化差异的研究

对香蕉果实贮藏过程中内、外果肉相关生理生化指标及细胞结构的变化进行系统的观察分析,结果显示:(1)在贮藏初期香蕉果实内果肉的硬度小于外果肉,在贮藏过程中的同一时期,均表现出内果肉硬度小于外果肉,且内果肉硬度较外果肉先降到零;(2)在贮藏初期内果肉中多聚乳糖醛酸酶(PG)和淀粉酶的活性均高于外果肉,随着贮藏时间的延长,酶活性在内、外果肉均表现出不断增加,且这两种酶活性在内果肉中早于外果肉达到最高值,但其在内果肉中的最高值均略低于外果肉的最高值;而淀粉含量却相反,在贮藏初期内果肉中淀粉含量低于外果肉,且在贮藏过程中的降解速率高于外果肉;(3)超微结构显示,香蕉果实内果肉中淀粉粒和细胞壁结构的降解均早于外果肉.研究表明,香蕉果实的软化首先由内果肉细胞降解开始,并呈放射状向外逐步延伸.     

香蕉芒果果皮中酶活性与炭疽病菌潜伏侵染的关系

在树上正生长发育的香蕉果实,随着果实长大,果皮中过氧化物酶(POD)和多酚氧化酶(PPO)活性不断升高。采后的香蕉和芒果果实的果皮中,POD和PPO活性变化与呼吸代谢相关。苯丙氨酸解氨酶(PAL)主要分布在果皮中,并随着果实成熟度的提高,其活性呈极显著下降趋势。感病果实的果皮中三种酶活性均比健康果皮高。说明果皮中三种酶活性的变化与炭疽菌的潜伏侵染有关。     

柿果实采后氧化还原电位与乙烯合成和相关酶活性的关系

该研究以广西特色柿品种‘恭城月柿''为材料,在采后贮藏过程中对其氧化还原电位(ORP)、乙烯生物合成量、硬度、色差、抗氧化酶及细胞壁降解酶活性的变化进行了测定,初步探讨柿果实氧化还原电位与乙烯生物合成和相关酶活性的关系。结果表明:贮藏期果实的硬度整体呈下降趋势,乙烯利处理果实的硬度从采后3 d即急速下降,至贮藏末期始终显著低于对照。贮藏前14 d果实转色较缓慢,采后15 d乙烯利处理果实的总色差ΔE值快速上升至29.6,转色完全,显著高于对照的11.9。在贮藏前期处理和对照果实的ORP均稳定在7.5 mv·g^-1,采后15 d乙烯利处理果实的ORP快速上升至11.9 mv·g^-1,是对照组的1.4倍。乙烯利处理果实的乙烯生物合成量在贮藏前期呈较低水平,采后15 d乙烯生成量急剧增加至0.372 μL·kg^-1·h^-1的高峰,对照乙烯生成量则始终维持在0.033 μL·kg^-1·h^-1的较低水平。可见,乙烯生成量的增加与ORP的上升关系密切。此外,抗氧化酶中的过氧化物酶(POD)和细胞壁降解酶中的β-D-半乳糖苷酶(β-D-Gal)活性与ORP呈极显著正相关,表明二者受果实ORP变化的影响。因此,经乙烯利处理柿果实的ORP贮藏末期显著上升,促进乙烯生物合成量的急剧增加,诱导抗氧化酶POD和细胞壁降解酶 β-D-Gal活性增强,导致果实急速后熟软化。柿果实ORP可能作为开关调控1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)生成乙烯这一生物化学反应,即打破ORP的稳定状态引发乙烯合成的启动。     

PRO—LONG涂膜处理对后熟香蕉果实乙烯形成以及其它有关生…

香蕉果实采后以商业上推荐使用的１．５％Ｐｒｏ－ｌｏｎｇ溶液处理,贮藏于２０℃和７５％相对湿度下,分别测定果实的ＡＣＣ含量、ＭＡＣＣ含量、ＥＦＥ酶活性、乙烯释放、叶绿素含量的变化和果实的硬度变化。结果表明,ＰＲＯ－ＬＯＮＧ处理延缓了香蕉果实果皮的叶绿素降解、硬度的下降以及乙烯释放的增加。在后熟过程中,处理果实的ＡＣＣ含量发生积累。ＡＣＣ含量的高峰在乙烯释放高峰和ＥＦＥ酶活性高峰之前出现。与对照比较,     

香蕉果实XET cDNA的克隆及其在成熟软化的果实果皮和果肉中的表达分析

木葡聚糖内糖基转移酶(Xyloglucan endotransglycosylase,XET)通过分解细胞壁半纤维素多糖的主要成分--木葡聚糖而参与果实软化.为了阐明香蕉(Musa acuminata.Colla cv.GrandNain)果实成熟过程中的软化与细胞壁代谢酶XET基因表达模式的关系,采用RT-PCR和RACE-PCR方法,首次从成熟香蕉果实果肉中分离了编码XT基因的全长cDNA(MA-XET1,全长1 095 bp).序列分析表明,MA-XET1的5'端和3'端的非翻译区分别为66 bp和1 89bp,该片段含有一个完整的开放读码框,编码280个氨基酸,推导的MA-XET1蛋白质中存在XET蛋白的催化活性部位DEIDFEFL.Southern杂交表明,MA-XET1在香蕉基因组中由多拷贝基因编码.Northern分析显示,跃变前期的果肉中,不能检测MA-XET1基因的表达,跃变期的果实果肉中MA-XET1表达增加,跃变后期该基因表达略有减弱;在跃变前期的果实果皮中,MA-XET1的积累较低,跃变期的果实果皮中积累大幅增加,而后迅速下降.Propylene(丙烯,乙烯的类似物)处理降低香蕉果实果皮和果肉的硬度,而且propylene促进MA-XET1在果皮和果肉中的积累.这些结果表明,MA-XET1参与香蕉果实成熟过程中的果皮和果肉软化,并且,MA-XET1的表达在转录水平上受乙烯调控.     

PRO－LONG涂膜处理对后熟香蕉果实乙烯形成以及其它有关生理变化的影响

香蕉（ＭｕｓａａｃｕｍｉｎａｔａＣｏｌｌａｃｖ．ＤｗａｒｆＣａｖｅｎｄｉｓｈ）果实采后以商业上推荐使用的１．５％Ｐｒｏ－ｌｏｎｇ溶液处理,贮藏于２０℃和７５％相对湿度下,分别测定果实的ＡＣＣ含量、ＭＡＣＣ含量、ＥＦＥ酶活性、乙烯释放、叶绿素含量的变化和果实的硬度变化．结果表明,ＰＲＯ－ＬＯＮＧ处理延缓了香蕉果实果皮的叶绿素降解、硬度的下降以及乙烯释放的增加．在后熟过程中,处理果实的ＡＣＣ含量发生积累．ＡＣＣ含量的高峰在乙烯释放高峰和ＥＦＥ酶活性高峰之前出现．与对照比较,处理果实的ＡＣＣ含量和ＥＦＥ酶活性的高峰延迟了５ｄ出现．在后熟过程中,以Ｐｒｏ－ｌｏｎｇ处理果肉四片,其ＥＦＥ酶活性受部分抑制（抑制率为１９．４５％至４０．５１％）．果实ＭＡＣＣ含量在贮藏起初处于一个较显著水平,随着后熟的发展而逐步增加,但与ＡＣＣ含量的明显增加相比变化是微小的．我们的研究进一步阐明了ＰＲＯ－ＬＯＮＧ涂膜对香蕉果实后熟的影响主要是通过减少氧的供给,部分地抑制了ＥＦＥ酶活性,延缓了乙烯的形成和释放,从而延长了后熟过程．     

不同温度下后熟香蕉果实果皮生理与颜色变化

香蕉果实经乙烯利处理后,比较20℃和30℃下后熟期间的果皮色泽、淀粉转化及几种细胞壁降解相关酶活性的变化。在20℃下,香蕉果实能正常褪绿和软化,而30℃高温则明显抑制了褪绿转黄,加速了果皮软化。与20℃后熟比较,30℃促进了香蕉果皮中淀粉向可溶性糖的转化,提高了多聚半乳糖醛酸酶、纤维素酶、果胶甲酯酶等的活性。讨论了香蕉果皮可溶性糖含量与青皮熟形成之间的可能关系。     

梨贮藏过程中乙烯和钙调素动态及其与贮藏性的关系

对两个梨品种不同成熟期果实贮藏过程中,整个果实以及果皮、果肉、果心的乙烯释放变化及果肉、种子的钙调素(CaM)含量进行测定。结果表明:(1)黄花品种完整果实及不同部位乙烯释放量都高于耐贮藏的湘南品种,且启动乙烯生成和形成乙烯峰值的时间也早于湘南品种;(2)果实不同部位形成峰值的顺序均依次为果心、果肉、果皮;(3)果实呼吸跃变过程中,CaM含量伴随乙烯释放量的上升而升高,乙烯峰值过后,CaM含量下降,果实衰老。     

果实膨大期喷布磷酸二氢钾对三月红荔枝果实贮藏性的影响

在三月红荔枝(Litchi chinensis cv.Sanyuehong)果实膨大期对树冠喷施0.2%磷酸二氢钾(KP)水溶液,以探讨磷酸二氢钾对荔枝果实贮藏性的影响。结果表明:(1) KP处理的果实在贮藏期前17d,失重率及果肉可溶性固形物、酸、VitC、花色素苷等指标的变化趋势与对照基本相似;(2) KP处理的果肉可溶性蛋白质含量变化与对照有明显差异,而果皮的可溶性蛋白质含量在贮藏期前10d变化动态与对照一致,此后呈相反的变化趋势;(3)果皮POD活性显著高于果肉,KP处理和对照的果肉POD活性在贮藏第3d后、果皮POD活性在第17d前分别具有相似变化趋势;(4)果肉中CAT活性在贮藏第3~17d期间都显著或极显著高于果皮,KP处理和对照果肉、果皮CAT活性动态变化均为单峰曲线。     

三个脐橙品种果实主要细胞壁酶动态变化研究

以罗伯逊脐橙、丰脐、纽荷尔脐橙果实为试材,对其果皮和果肉的果胶甲酯酶(PE)、多聚半乳糖醛酸酶(PG)、β-葡萄糖苷酶和纤维素酶(CX)的动态变化进行研究。结果表明,三个品种PE活性均为果肉明显高于果皮,其中纽荷尔和罗脐分别在果实膨大期、转色期和成熟期出现三个峰值;PE活性变幅纽荷尔大于罗脐,丰脐变化较平稳。PG活性果肉略高果皮,且皆在转色期开始快速升高。首次对脐橙果实β-葡萄糖苷酶研究表明,该酶活性微弱,成熟期活性最高,纽荷尔高于丰脐和罗脐;动态变化中果皮和果肉无明显差异。酶活性高峰出现的时间为PE早于PG和β-葡萄糖苷酶;PE和PG是影响脐橙果实发育的主要酶,β-葡萄糖苷酶可能是PE和PG的补充。     

纽荷尔脐橙留树和低温贮藏效果比较

以纽荷尔脐橙(citrus sinensis'Newhall')果实为试材,对50%留果量的留树贮藏和果实6℃低温贮藏过程中不同时期的果肉硬度、果皮总色差、O2产生速率、脯氨酸(Pro)含量、相对电导率、丙二醛(MDA)含量及脂氧合酶(LOX)、超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化氢酶(CAT)活性进行测定.结果表明:两种贮藏方式下果肉硬度均下降,果皮总色差上升;LOX活性增加,SOD、CAT活性下降;O2、MDA、Pro积累,细胞膜受到伤害,导致胞内物质外流,细胞电导率增加.贮藏47d时,两种贮藏方式各指标基本上没有显著差异;贮藏47d至75d,留树贮藏的果实无论外观(果肉硬度、色泽)还是细胞膜的完整性都显著优于低温贮藏.     

龙眼果实采后果肉自溶过程中细胞壁组分及其降解酶活性的变化

在(10±1)℃下贮藏的‘福眼’龙眼果实果肉自溶指数和自溶程度随着贮藏时间的延长而增加。果肉细胞壁干重、原果胶、纤维素、半纤维素和细胞壁蛋白含量不断减少。果肉果胶酯酶(PE)活性下降;多聚半乳糖醛酸酶(PG)活性在贮藏6～12d以及纤维素酶活性在贮藏0～12d期间均明显增强,到第12天达到活性高峰,之后下降。但在贮藏0～24d期间,PE、PG和纤维素酶仍然保持较高活性,贮藏24d之后快速下降。β-半乳糖苷酶活性在贮藏0～24d期间略有下降,而在贮藏24d后,活性增强,尤其是贮藏30d后,活性急剧升高。     

荔枝果实在发育和采后的乙烯产生及其生理作用

荔枝果实在发育与成熟过程中呼吸作用和乙烯的产生不断下降。 成熟荔枝果皮的乙烯产生量约为果肉和种子的86倍。外源乙烯处理能提高荔枝果皮多酚氧化酶和过氧化物酶活性。 在5℃下,荔枝果实的呼吸和乙烯产生受到强烈抑制,只有常温(25℃)下的1/10或更低,但进入常温后则很快上升,果实内部乙烯最高可达17.6 ppm。     

枇杷冷藏过程中果肉木质化与细胞壁物质变化的关系

“大红袍”和“解放钟”枇杷果实在 1℃下贮藏时 ,细胞壁物质代谢异常 ,果肉硬度持续升高而出汁率逐渐降低 ,果胶酯酶 (PE)和多聚半乳糖醛酸酶 (PG)活性和水溶性果胶含量下降 ,原果胶含量、苯丙氨酸解氨酶(PAL)活性及木质素和纤维素含量不断增加。约经 3周贮藏后 ,果实出现果皮难剥、果肉质地变硬、粗糙少汁的异常劣变现象。在 12℃下贮藏的枇杷果实 ,细胞壁物质代谢正常 ,果肉硬度增加少 ,PE和PG活性及水溶性果胶含量较高 ,无原果胶增加现象 ,PAL活性呈下降趋势 ,木质素和纤维素含量变化不大 ,果实不出现木质化败坏。这些结果表明冷藏枇杷的木质化败坏可能是一种低温失调现象     

Leifsonia sp.ZF2019中一种新型耐木糖β-木糖苷酶的表达与特征

【目的】从栀子灰蝶幼虫分离的Leifsonia sp. ZF2019菌株中克隆表达出一种新型β-木糖苷酶Xyl4900,并研究其酶学性质,以期为开发适用于工业生产的β-木糖苷酶提供参考。【方法】采用生物信息学分析技术分析Leifsonia sp. ZF2019菌株的β-木糖苷酶Xyl4900基因并在大肠杆菌中表达了该基因,纯化并研究了其酶学性质。【结果】Xyl4900与GH3家族的β-葡萄糖苷酶同源性高,但带有β-木糖苷酶结构域,可特异性水解对硝基苯基β-D-吡喃木糖苷（p NPX）,是一种新型β-木糖苷酶。酶学特性分析显示,Xyl4900在45℃和pH 7.0的条件下酶活性最高,且在pH 6.0–9.0的范围内孵育14 h,仍保持80%以上的酶活力。除Cu²⁺外,其他金属离子（2.5 mmol/L）对Xyl4900酶活力无明显影响,且对低浓度有机溶剂（5%V/V）有较强耐受性。此外,在20%（W/V） NaCl或100mmol/L木糖溶液中Xyl4900的酶活性仍高于50%,表现出较好的盐和木糖耐受性。动力学参数分析显示,Xyl4900的K_m     

嗜碱芽孢杆菌C-125木糖苷酶基因的表达与酶特征鉴定

嗜碱芽孢杆菌(Bacillus halodurans)C-125菌株的基因组中,一个编码木糖苷酶的基因(BH1068)被克隆并在大肠杆菌中获得高效表达。通过全面分析纯化蛋白,确证了它的木糖苷酶功能。该酶在pH4～9的范围内保持稳定,最适pH值为中性,有较宽的最适温度(35°C～45°C),且能在45°C范围内保持稳定。这些特性使得该酶可在较为宽广的条件下对木聚糖进行酶促降解。该酶对人工合成底物对硝基苯-β-木糖苷(p-nitrophenyl-β-xylose,pNPX)的比活力为174mU/mg蛋白质,且木糖对其反馈抑制较弱(抑制常数Ki为300mmol/L)。结果显示该酶是活性较高且较耐木糖抑制的细菌源木糖苷酶。该酶与商品化的木聚糖酶一起水解山毛举木聚糖(Beechwood xylan)时显示了增效作用,且水解率可获40%。该酶最适pH为中性,对木糖耐受等特性与大多数来源于真菌、最适pH为酸性、对木糖敏感的木糖苷酶将有较好的互补。结果表明该酶在木聚糖或含木聚糖多糖的单糖化过程可能发挥重要作用。     

一氧化氮处理对香蕉多聚半乳糖醛酸酶及MaPGs基因表达的影响

为了解多聚半乳糖醛酸酶（PG）在香蕉采后软化中的分子调控机制,采用40 μL/L NO熏蒸处理绿熟期的‘巴西’香蕉果实3 h后,在20℃和相对湿度为85%的条件下贮藏,研究NO对香蕉果实乙烯释放量、硬度、PG活性及MaPGs基因表达的影响。结果表明：NO处理降低了果实乙烯释放量,延缓了果实硬度的下降,抑制了PG的活性;降低了MaPG2、MaPG3和MaPG4基因的表达,延缓了香蕉果实的软化。     

挥发性香气物质和乙烯生产在"湖景蜜露"桃果实发育过程中的变化

以"湖景蜜露"水蜜桃(Prunus persica L.)为试材,检测了果实从未成熟到成熟发育过程中乙烯生成、呼吸速率及挥发性香气性物质的变化;同时对果实大小、果皮色泽、果肉硬度、可溶性固形物、可滴定酸进行了测定;对与果实乙烯产生密切相关的1-氨基环丙烷-1-羧酸(ACC)含量、ACC合成酶活性、ACC氧化酶活性也进行了测定.结果表明,随果实成熟度的增加,果实大小、果皮L*值、可溶性固形物含量增加,而果实硬度、果皮h°值、可滴定酸含量减少.在未成熟的果实中,C6的醛类(反式-2-己烯醛)和醇类(顺式-3-己烯醇)是主要的成分;乙烯生成量很低;呼吸速率较高.到跃变阶段C6～C12的内酯类物质明显增加,尤其是γ和δ-内酯类成为果实主要的香气挥发性物质.推测果实乙烯、呼吸作用等基本的生理变化可能调节着内酯类物质的生成.在乙烯跃变上升时果肉中ACC氧化酶的活性下降,ACC含量和ACC合成酶活力的变化与乙烯生成量变化的趋势一致.根据以上结果可以认为桃果实主要的香气挥发性物质的形成与乙烯、呼吸跃变的开始密切相关.香气物质形成速率动态变化可能是桃果实发育过程中成熟度的另一个生理学指标.