不同人群精液质量现状的分析

通过对 434例有生育力、346例生育力不明男性的精液质量进行检测 ,并与同实验室 80年代前期 1 1 0例的数据相比较 ,评价目前男性精子质量的现状。结果表明 ,精子质量均明显降低 ,以精子数目中的计数和总数的降低最为明显 ,分别降低 5 4 .2 %～ 98.9%和 39.7%～ 1 1 4.5 % ;出现异常指标的异常百分率以精子活动性中的活动率、a级活力、a +b级活力最高 ,分别达到 1 8.4%～ 42 .3%、37.5 %～ 68.1 %、39.5 %～ 75 .2 % ;各指标在正常值范围内的比率仅占 33.6%和 2 6.0 %。因此 ,提出精液质量的普遍降低应引起足够重视。     

男性不育患者精液细菌感染对精液常规指标及动态学参数影响的研究

目的 了解男性不育患者精液细菌感染率及菌群分布、细菌感染对精液常规指标及动态学参数的影响、精液白细胞(WBC)数与细菌感染率的相关性.方法 对405例我院男科门诊就诊的不育患者进行精液细菌培养鉴定,并采用SQIAS-2000精子质量图文分析系统对精液进行常规分析,采用正甲苯胺蓝过氧化物酶法对精液中WBC进行定量分析.结果 男性不育患者精液细菌感染率为43.2％,其中革兰阳性菌占86.3％,以葡萄球菌属细菌为主;细菌感染组与对照组的精液相关参数在精子密度、精子活率、a+b级精子活力、畸形精子率、曲线速度、直线速度、平均路径速度、平均移动角度、直线性、前向性、鞭打频率等方面差异有统计学意义(P＜0.05);当精液WBC≥5×106/mL时,细菌感染率为91.3％.结论 男性不育患者精液细菌感染率较高,且细菌感染可引起精子数量减少、运动质量和能力减弱,进一步证实了生殖道细菌感染是男性不育的重要原因.     

精液细菌L型感染与男性不良的关系

作者对２２例溶脲脲原体培养阴性的精液进行细菌及Ｌ型培养,其中６例分离出金黄色葡萄球菌及其Ｌ型,占２７．２７％。精液常规分析显示,分离出金葡萄菌及其Ｌ型的精液,白细胞计数５例超过正常达１０－１５个／高倍视野;２例精子的活动率与活动力分别是５０％以下和Ⅱ级。     

SPANX蛋白的研究进展及其与男性生育力的相关性

男性不育症病因十分复杂,遗传、环境、内分泌等许多因素都会导致男性不育。而现今临床上多依据精液常规分析对男性不育做出诊断和治疗,但仅依赖精液常规参数存在一定局限性。探寻男性生育力的潜在生物标志分子是当前男性不育的迫切需求。精子X染色体核结合精子蛋白(The sperm protein associated with the nucleus on the X chromosome,SPANX)是在精子中表达的一类小分子蛋白,SPANX蛋白家族基因定位在X染色体上,它随精子的成熟而迁徙,参与精子结构的形成,在精子成熟的不同时期,蛋白定位和蛋白表达均存在差异。在精液参数正常的不育男性和自发弱精症的男性中,SPANX表达下调;同时在活性氧自由基(reactive oxygen species,ROS)阴性的精子中,SPANXC表达降低,在DNA碎片率低的精子中,SPANX表达增高;这些表明SPANX与男性生育力存在一定的相关性,但其与生育力的影响极其相关机制还需要进一步的研究。     

不同禁欲时间对少精、弱精精液质量的影响

目的:了解不同禁欲时间对少精、弱精精液质量的影响,为临床治疗不育提供参考。方法:对正常精液、少精症、弱精症患者分别根据禁欲天数随机分成两组,禁欲2-4天为A组,禁欲5-7天为B组,对上述各组进行精液分析。结果:在正常组、少精组及弱精组中,A组的精液量、精子密度及精子总量低于B组,A组a b级精子百分率高于B组,差异有统计学意义。在少精组及弱精组中A组精子正常形态率高于B组,差异有统计学意义。结论:正常精液及弱精症患者禁欲2-4天的精液质量最好,少精症患者禁欲5-7天的精液质量最好。     

睾丸保留与否对单侧睾丸扭转患者远期生育能力的影响

本研究旨在回顾性分析单侧睾丸扭转患者手术切除睾丸与保留睾丸之间远期生育能力的差异。通过对2016年1月至2018年12月南华大学附属南华医院收治的36例单侧睾丸扭转患者(其中睾丸切除22例,手术复位保留睾丸14例)进行病例资料分析和生育结局随访,同时选取同时期25名正常男性志愿者与手术切除睾丸和手术复位保留睾丸患者进行精液分析,比较他们的精液质量差异,发现追访其婚育史,两组患者在平均结婚年龄、性生活满意程度方面均未出现显著差异。切除组中,现有11例患者的配偶正常生育后代,生育率为64.7%,平均妊娠时间为2.1年。保留睾丸复位组中,7例患者配偶正常生育,生育率70%,平均妊娠时间1.9年。上述两组均未出现有统计学差异的存在。精液质量对比中:复位组在精子活率及a+b级精子(前向运动精子)方面降低。睾丸扭转发生后切除或者保留睾丸对患者平均结婚年龄、性生活满意程度影响不大。但是在精液质量方面复位保留睾丸出现了精子活率及a+b级精子(前向运动精子)方面降低,本研究建议如果发生了睾丸扭转超过一定时限,还是以手术切除睾丸较保留为好。     

微波对人类生精作用远期效应的形态学观察

为了直接观察微波对人类生精细胞作用的远期效应,并了解微波节育的安全性和可逆性,本文对３０名微波节育志愿受试者,在停止微波照射２年后,用光镜和扫描电镜对其精液标本进行了形态学观察,并统计畸形精子的比率．光镜下,１５名志愿者的畸形精子率,范围为８．９％～２７．０％,平均为１７．６％±５．１％．扫描电镜下,另１５名志愿者的畸形精子率,范围是１７．５％～３３．７％,平均为２４．８％±４．６％．光镜下６名同龄的正常生育力男性的畸形精子率,范围为６．１％～１５．３％,平均为９．７％±３．４％．志愿者与正常生育力男性之间的光镜下畸形精子率差异十分显著（Ｐ＜０．０１）,但均在正常范围之内．结果显示在停止微波照射２年以后,志愿者的生精作用已基本恢复正常．．     

流式细胞术在哺乳动物精液质量检测中的应用

精液检测的首要目标就是快速准确地确定精子的生育力。同时具备多种特性和功能完整的精子才能受精,因而只有同时客观地检测多个指标,才能更好地反映精子的生育力。精子检测的传统方法费时费力,检测精子数量少,指标单一,而且易受操作者的主观影响,不能准确地反映精子功能。流式细胞术(FCM)为精子功能研究提供了一种快速、客观、多指标、大通量的检测手段;利用FCM检测精子的质膜完整性、顶体状态、染色质结构、线粒体功能以及细胞凋亡等,可以得知精子功能的相关情况。随着新的荧光探针、染色方法的不断开发和改进,FCM为精液质量检测提供了一种新的检测平台,应用前景极其广阔。     

大熊猫冷冻精液解冻速度和解冻液中添加Pentyoxyfilline对其解冻后活力的影响

建立大熊猫的精子库,进行远距离圈养大熊猫种群间的人工授精和遗传物质的转运,维持遗传多样性,是目前大熊猫遗传管理的优先方法。要成为最有效的工具,精子库保存的精子解冻后的活力必须很好。本文对大熊猫冷冻精液的解冻速度和解冻液中添加化学激活剂Pentyoxyfilline(PF)后的精子活力进行了试验。试验用的精液采自11只成年大熊猫,精液冷冻速度为每分钟-40℃～-100℃。试验Ⅰ:将冷冻精液放入3种不同温度的水浴中解冻:(1)22℃(慢速解冻);(2)37℃(中速解冻)(3)50℃(快速解冻)。将冷冻前精子活力(78 1±2 9%)和解冻后的平均精子活力进行比较,快速解冻后的精子活力(57 5±5 4%)显著地降低(P<0 05),而中速解冻的精子活力(67 5±3 1%)和慢速解冻的精子活力(73 33±2 1%)与冷冻前的活力接近。试验Ⅱ:使用中速解冻方法解冻精液后,分别加入最终浓度为0mM、1mM、5mM和10mM的PF,然后分别保温15min和24h。在PF(0mM、1mM、5mM和10mM)中分别孵育15min的解冻精子活力,运动状态,活率和顶体正常率在试验期的90min内都很相似(P>0 05)。在1mMPF中孵育24h的精子活力没有变化(P>0 05)。在5mM和10mMPF中孵育过的精子活力(5mM:24 0±4 7%;10mM19 5±3 6%)比没有加PF的对照组的精子活力(38 3±5 2%)显著地低(P<0 05)。而且,在10mM     

左卡尼汀配合复方玄驹胶囊对特发性少弱精子症的疗效观察

目的：观察复方玄驹胶囊联合左卡尼汀口服液治疗不同程度的特发性少弱精症的临床疗效。方法：选择2010年6月．2012年9月就诊于内蒙古医科大学第一附属医院的少弱精症者300例,其中重度少、弱精症者70例（治疗l组）,中度少、弱精症者110例（治疗2组）,轻度少、弱精症者120例（治疗3组）。另选择同期来我院进行健康体检者100例,将其作为对照纽。治疗组口服左卡尼汀口服溶液及复方玄驹胶囊,持续时间3个月。每一位被研究对象都在治疗前后定期进行血常规、尿常规、肝功能和肾功能四个方面的检查,同时观察服药患者在治疗过程中发生的不良反应。并对精液量、精子密度、A级精子等指标进行观察和比较。轻中度患者观察其（A＋B）级精子,重度患者观察其（B＋C）级精子,同时评价其治疗前后的生育能力,并与对照组比较。结果：与治疗前比较,治疗1、2、3组治疗后精液量[（3．7±1．6、3．7±1．1、3．8±1．2）mL]、精子密度[（3．4±1．4、23．2±1．8、39．6±14．2）（mol/L）]、A级精子[（3．6±2．5、15．6±6.3、28．6±9．6）％]、（A＋B）级精子、（B＋C）级精子比例、生育力指数（0．2±0．0、0．8±0．1、1．4±0．1）均升高明显,差异显著（P〈0．05）;与对照组比较,治疗1、2、3组治疗前均有所减少,治疗1、2组治疗后虽有所上升,但还是显著低于对照组（P〈0．05）,治疗3组治疗后与对照组差异不大,提示该方法对轻度少、弱精症者效果较重、中度好。结论：左卡尼汀配合复方玄驹胶囊对特发性少弱精子症效果显著。     

甘油浓度对蓝狐精子深低温冷冻保存的影响及冻融前后精子的超微结构

人工采取8只优质芬兰雄性蓝狐的精液,分别利用2％、4％、6％和8％甘油浓度的卵黄-Tris-果糖-柠檬酸钠稀释液进行稀释,制成细管冻精。在冻融后0、O．5、2、4、6h检测4种浓度组的精子运动度、质膜完整率、顶体完整率;并利用透射电镜观察冻融前后精子的超微结构变化。冻融后0h,4％甘油浓度组冻融精子的运动度、质膜完整率、顶体的完整率均最高(分别为41．8％、43．6％、48．4％),2％浓度组最低(分别为24．5％、27．6％、31．7％);随着检测时间延长,2％与4％组的精子特性差异显著,但2％、6％、8％3个组间差异不显著;6h时各组间精子的运动度均不超过10％,最高质膜完整率和顶体完整率分别为11．8％、12．7％。说明蓝狐精液稀释剂中甘油的适宜浓度应为4％,冻融后精子的活力维持时间较短。蓝狐精子冻融过程中质膜极易发生膨胀或断裂、顶体囊泡化或溃散,而质膜和顶体丢失现象较少。     

线粒体呼吸功能与精子活力、核DNA损伤的相关性分析

为探讨线粒体呼吸功能与精子活力、核DNA损伤程度之间的相关性,按WHO标准收集34例不同活力的精液标本,采用蔗糖差速离心法或密度梯度离心法提取精子线粒体,通过铂氧电极-溶氧仪测定线粒体呼吸耗氧率并计算状态III呼吸、状态IV呼吸、呼吸控制率（RCR）、磷氧比（P／0）及氧化磷酸化效率（0PR）;应用精子染色质扩散（sperm chromatin dispersion,SCD）实验检测精子DNA损伤情况。结果表明：不同活力精子线粒体状态Ⅲ呼吸耗氧量之间具有显著差异俨〈0．01）;弱精子症组RcR和OPR与正常对照组比较,分别降低了17．03％（P〈0．05）和40．74％（P〈0。01）;精子DNA损伤程度与精子活力、状态III呼吸及OPR均呈极显著负相关（r值分别是-0．812、-0．788和-0．696）。以上结果提示：精子线粒体呼吸耗氧和氧化磷酸化功能与精子活力之间存在着密切的联系;精子DNA（包括mtDNA）损伤可能影响精子的正常功能。     

91份精液检测结果

目的对91份精液标本进行常规检测．并对两种方法检测白细胞结果作对比分析。方法直接涂片镜检和经特殊处理后瑞-姬氏染色镜检精液中细胞和精子形态分析。精子体外活体染色测精子的活率。结果直接涂片镜下均查到自细胞,占100％,经染色后确定为自细胞者25例,占27．5％,其中非自细胞60份,占66％,有5例检出阴道毛滴虫。检出率5．5％。假死精子检出率25．3％。结论直接涂片镜检精液具备了感染性特征,尚不能确诊,对精液有形成分。精囊感染的确诊,必须染色,仔细检测。     

精子特异性钙通道CatSper1 对精子线粒体呼吸与能量代谢的影响

目的:应用Cat Sper1单克隆抗体抑制Cat Sper1的功能,检测精子线粒体呼吸功能及能量合成能力,观察Cat Sper1对精子线粒体呼吸与能量代谢的影响。方法:健康志愿者20例,检测精液均符合WHO健康标准。手淫法获取精液,经过上游法处理后每份精液分为A、B两组,分别与Earles液以及50μg/m L抗Cat Sper1多克隆抗体共孵育。在1 h,2 h,4 h后分别检测两组精子精液参数、细胞线粒体呼吸控制率RCR及精子细胞ATP含量。结果:与A组比较,B组精子各时间点a+b(%)尤其是a(%)均明显下降,差异具有统计学意义(P0.01);1 h后B组精子a(%)即明显下降,2 h,4 h后精子下降缓慢,与1 h相比无明显差异,无统计学意义(P0.05)。与A组比较,B组精子各时间点态3值、呼吸控制率RCR以及精子细胞ATP含量均明显下降,差异具有统计学意义(P0.01);B组精子中,2 h、4 h节点精子态3值、呼吸控制率RCR以及精子细胞ATP含量与1 h无明显差异,无统计学意义(P0.05)。结论:阻断精子特异性钙通道Cat Sper1,可降低精子细胞线粒体呼吸功能,减少精子生成ATP的能力,从而使精子活力降低。为精索静脉曲张引起精子Cat Sper1表达下降,从而导致不育的机制寻找可能的理论依据。     

利用不同稀释剂对长期保存的猪精液质量检测

目的：由于冷冻保存的猪精液在解冻后会出现低成活率和低繁殖率的情况,本项目研究猪精液的低温长期保存和保存后的精子质量评定。方法：本实验选用目前常用的BTS,ANDROHEP,KIEV,ZORLESCO等四种稀释剂,将猪新鲜精液进行稀释（1：1）后分别于17℃保存15天,每天取样对精子的质量进行评价,利用荧光染料Hoechst 33258和SYBR－14／碘化丙碇（PI）分别检测精子死活;利用活体荧光染料JC－1检测精子线粒体活性;利用考马斯亮兰染色检测精子顶体状态;利用金霉素（CTC）检测精子是否获能。结果：SYBR－14／PI和Hoechst 33258两种方法检测精子死活都很灵敏,前检测的活精子比例较后稍高,但都低于JC－1检测的线粒体有活性的精子比例,说明精子线粒体活性损失要慢于质膜完整性的破坏;活精子比例和线粒体活性在保存的前8天都是缓慢减少,获能比例和顶体状态分别在第9－14天和第11天变化较大,利用AN和ZO保存13天,BTS保存10天以及KIEV保存9天的精液中精子的活率,顶体完整率及线粒体有活性的比例仍高于50％,提示这些精液仍可用于人工授精或体外受精,这四种稀释剂保存15天后的精子获能比例接近70％,Hoechst33258,SYBR-14,JC-1,考马斯亮兰检测结果亮度相关。结论：这四种稀释剂对精子的低温保存效果依此为：AN＞ZO＞BTS＞KIEV。     

精子的运动特性

精子的运动特性与生育力有密切关系。本文从超微结构水平和分子生物学基础出发,阐述精子运动机制的微管滑动学说;介绍了精子在液体介质中的运动形式、检测精子活动力的主要技术、影响精子活动力的因素、从异常精液中选择正常精子的技术,以及精子活动力在雄性和雌性生殖道中的演变过程。     

精液细菌L型感染与男性不育的关系

作者对２２例溶脲脲原体培养阴性的精液进行细菌及Ｌ型培养,其中６例分离出金黄色葡萄球菌及其Ｌ型,占２７．２７％。精液常规分析显示,分离出金葡萄菌及其Ｌ型的精液,白细胞计数５例超过正常达１０～１５个／高倍视野;２例精子的活动率与活动力分别是５０％以下和Ⅱ级（低于正常）。金葡菌及Ｌ型分离阳性的精子电镜扫描,可见有些精子的头尾部有巨形体、园球体或短杆状菌体吸附,并经免疫酶ＰＡＰ染色证实为金葡菌Ｌ型。实验结果表明：细菌Ｌ型感染吸附可能是部分男性不育的原因。     

一种简单实用的猪颗粒冻精制作技术

本实验以年龄在2.5岁左右的长白种公猪的精液为材料,在比较了常用的Ⅰ号、Ⅱ号、Ⅲ号猪精液冷冻稀释液和Ⅰ号、Ⅱ号解冻液及冷冻———解冻程序对猪精液的冷冻效果后,依据解冻后精子的活力、质膜完整性等指标,发现:1、Ⅱ号冷冻稀释液的稀释效果(精子活力42.5±5.2精子弯尾率44.7±3.5)和Ⅱ号解冻液的解冻效果(精子活力43.8±2.6精子弯尾率36.2±4.3)明显较好;2、根据制作经验总结,发现了一种与以往资料上介绍的完全不同的猪精液冷冻颗粒制作方法,从而筛选出了一种简单实用的猪颗粒冻精制作技术。     

提高精子转染外源DNA效率的山羊精液冷冻方法

目的筛选一种既提高精子转染外源DNA效率,又保持解冻后精子活力的山羊精液冷冻—解冻方法。方法应用正交设计L9(34),因素分别为稀释液种类、稀释比例、降温时间和解冻液,每个因素选择3个水平,检测和比较解冻后精子转染外源DNA效率和精子活力。结果所选冷冻—解冻各因素对精液转染效率影响不显著[F(8,18)=1.032,P=0.449];平衡时间对冷冻—解冻活力影响极显著[F(2,24)=9.972,P=0.001],平衡1h极显著小于平衡2 h和4 h的精液活力(P=0.003,P=0.000),以平衡4 h最好。用筛选的冷冻—解冻方法处理精液,解冻后精子的活力极明显降低(P=0.002);生存指数降低,GOT释放量增加,菌落数减少,与鲜精相比差异显著(P=0.018;P=0.016;P=0.018);精子畸形率增加,顶体完整率降低,与鲜精相比差异不显著(P=0.494;P=0.084)。结论优化了提高精子转染外源DNA效率的山羊精液冷冻—解冻方法。     

藏酋猴精液深低温冻存的研究──不同的冷冻程序、冷冻稀释保存液冻存效果的比较

以存活率（ＳＲ）、复苏运动度（ＲＭ）、ＳＰＡ为精子活力检测指标，对四种冷冻程序ＰＳＦ、Ｈ３Ｐ、ＬＰ、ＭＤＰ和卵黄的、无卵黄的冷冻稀释保存液进行了藏酋猴（Ｍａｃａｃａ ｔｈｉｂｅｔａｎａ）精液冻存比较研究。 ＰＳＦ的ＳＲ为９０．１±１．９％，ＲＭ为６３．８±２．８％，显著高于其他三种冷冻程序（Ｐ＜０．０１）。卵黄冷冻稀释保存液（ＭＤＭ）的ＳＲ（９５． ４±１．３％）和ＲＭ（８８．０±１０．２％）显著高于无卵黄防冻液（ＦＣＳ－Ｇ／ＴＨ）的ＳＲ（９０．１±１．９％）和ＲＭ（６３．６±２．８％），但前者在复苏一小时后，ＲＭ（１２．５±１．６％）明显低于后者的ＲＭ（５４． ７±２． ２％）。用 ＦＣＳ～Ｇ／ＴＨ冻存的精液经 ＳＰＡ检测，其穿透率为新鲜精子的 ５１． ９％。结果提示：１）慢速降温冷冻程序适于藏酋猴精液冻存；２）卵黄冷冻稀释保存液能较好地保存藏酋猴精液的活动度；而无卵黄防冻液则有利于延长其冷冻精子的运动寿命。这可能与两者的稀释液及所含的脂蛋白不同有关。