量天尺根部内生真菌的多样性

为了解不同量天尺（火龙果）品种根部内生真菌菌群组成及多样性,采集GHL-1、GHL-2、GHL-3、ML-1和DL 5个量天尺品种健康根部样品,进行内生真菌分离,采用形态观察和ITS序列分析相结合的方法进行鉴定、归类。共分离得到内生真菌菌株117株,总体分离率为25.71%,分别隶属于13个属,其中Trichoderma、Fusarium、Chaetomium和Phoma为量天尺内生真菌的优势种群,分别占总菌株数的24.79%、35.04%、10.26%和10.26%;不同量天尺品种内生真菌的结构和组成存在一定差异,GHL-2、GHL-3和DL 3个品种中分离频率最高的内生真菌类群为Fusarium,GHL-1和ML-1分离频率最高的类群为Trichoderma;多样性分析结果反映出不同量天尺品种内生真菌菌群的多样性指数、丰富度指数和均匀度指数水平存在差异,其中GHL-2的3项指数均为最高。表明品种差异对内生真菌的组成和多样性均有影响。     

鼻病毒非结构蛋白2B 诱导细胞发生内质网应激

为探讨鼻病毒非结构蛋白2B诱导内质网应激和细胞凋亡的机制,本研究构建了鼻病毒非结构蛋白2B的真核表达载体p2B‐GFP ,通过转染BHK‐21细胞检测相关标志蛋白的变化情况。结果显示,非结构蛋白2B定位表达于BHK‐21细胞内质网,诱导内质网应激标志蛋白Grp78、CHOP的表达增加,并使活化转录因子6（ATF6）的转录活性增加,还诱导BHK‐21细胞发生核浓缩而凋亡,使凋亡标志蛋白PARP发生降解而减少。结果提示,鼻病毒非结构蛋白2B可诱导细胞发生内质网应激,并经该途径诱导细胞凋亡。     

金黄色葡萄球菌基因调节系统研究进展

金黄色葡萄球菌是人类的一种重要病原菌,可以引起许多临床表现不同的感染性疾病。它所致感染的多样性和严重度取决于不同毒力因子的协同表达,而这些数量众多的毒力因子的表达会受到不同调节系统的控制,同时这些调节系统之间也存在着复杂的相互作用关系。这些基因调节系统主要有两大类：一类是双组分信号转导系统（如Agr、SaeRS、SrrAB、ArlSR、LytRS、WalKR）;另一类是转录因子f如Sar、Rot、MgrA、SigmaB）。它们的协同作用有助于金黄色葡萄球菌对外界环境信号做出反应,调节致病过程中毒力因子在不同情况下的表达。     

SND1蛋白与HuR蛋白的相互结合作用

人源SND1（staphylococcal nuclease domain containing 1）蛋白由N端的SN（staphylococcal nucleases）结构域和C端的TSN (Tudor SN5) 结构域组成,其中SN结构域又包含SN1～SN4四个重复的功能片段. 本课题组前期研究结果表明,SND1蛋白可以通过SN结构域与G3BP（Ras GAP SH3 domain binding protein）蛋白相互结合,共同参与细胞应激颗粒（stress granules,SGs）的形成. SGs是真核细胞在受到氧化应激、病毒感染等外界刺激时在胞浆内形成的与RNA代谢相关的颗粒状结构. 对于SGs的成分鉴定及相互作用的分析一直是学者们研究的热点. 本研究中,免疫共沉淀实验结果表明,以抗SND1抗体可以共沉淀出HeLa细胞内另一个重要的应激相关人类抗原R（human antigen R,HuR）蛋白. 另外,利用脂质体转染法将pcDNA3 FLAG HuR重组质粒瞬时转染入HeLa细胞,成功过表达外源性的FLAG HuR融合蛋白,再以抗FLAG标签抗体又可以反向共沉淀出内源性SND1蛋白,证明SND1与HuR之间存在蛋白质间的相互结合作用. 细胞免疫荧光实验结果表明,当给予HeLa细胞05 mmol/L亚砷酸钠氧化应激时,SND1与HuR蛋白共同定位于胞浆中的SGs结构中. GST pulldown实验结果进一步表明截短的SN结构域可以结合HuR蛋白,其中以SN1功能片段的结合能力最强,表明SND1蛋白是通过SN结构域与HuR蛋白形成应激复合物,参与SGs的胞浆组装.并不定位于SGs的TSN结构域亦可结合HuR蛋白,提示SND1 HuR的蛋白相互作用可能并不局限于SGs,具有其它方面的功能意义.     

EV71通过2A蛋白酶切割Nup62而抑制核转运

为了解EV71病毒对细胞核转运机制的影响,本研究构建了具有核定位信号的绿色荧光蛋白表达载体(pG-FP-NLS)。将此表达载体转染细胞后,使用EV71病毒感染转染细胞,结果发现EV71病毒可以有效阻止绿色荧光蛋白的核转移。将EV71病毒的2A蛋白酶真核表达载体与pGFP-NLS共转染RD细胞,可以发现2A蛋白酶可阻止具有核定位信号的绿色荧光蛋白的核转移而使绿色荧光蛋白表达于细胞浆。为了进一步研究病毒阻止核转移的机制,病毒感染细胞或通过转染2A蛋白酶真核表达载体进行Nup62的Western blotting检测,结果显示病毒以及2A蛋白酶均可引起Nup62表达下降。证明EV71可通过2A蛋白酶切割Nup62从而抑制核转运。     

Cyclin G1、MDM2和p53在胃腺癌组织中的表达及相关性研究

目的探讨细胞周期蛋白G1(cyclinG1)、鼠双微体基因(MDM2)和p53在胃腺癌组织中的表达意义及相关性。方法采用免疫组织化学方法(SP法)检测54例胃腺癌组织中cyclinG1、MDM2和p53的表达,以20例正常胃粘膜组织作为对照。结果cyclinG1、MDM2、p53在胃腺癌组织中的阳性表达率分别为62.96%、53.70%、44.44%,而在正常胃粘膜组织中的阳性表达率分别为0%,15.00%,0%,两者比较差异均有显著性(P均<0.05),cyclinG1、MDM2在胃腺癌中的表达与肿瘤的分化程度相关(P均<0.05)。胃癌组织中MDM2蛋白的表达与p53的表达呈正相关(r=0.307),而cyclinG1蛋白的表达与p53的表达无明显相关性。结论CyclinG1、MDM2、p53的阳性表达在胃癌的发生、发展过程中起着重要的的作用。MDM2可能是通过调控p53的活性而促进胃癌的发生、发展,cyclinG1可能以不依赖p53的途径发挥作用。     

土施多效唑对小桐子营养生长与生殖生长的影响

小桐子(Jatropha curcas)是一种具有多种用途的植物,其种子含油量高达40％,是一种很有应用前景的能源植物.小桐子在温度、湿度较高的地区,特别是其修剪后新萌发的枝条经常出现营养生长旺盛,成花量较少的现象,导致其种子产量较低.本研究采用多效唑(paclobutrazol,PAC)对小桐子进行土施处理,结果表明:多效唑的使用剂量为0.8g·m-1树冠直径时,可有效抑制小桐子的营养生长,降低株高;同时促进小桐子的生殖生长,增加开花和结果枝条数量,增加花序和果序数量,增加单个花序的总花数和雌花的比例,可将小桐子单株种子产量提高2.4倍.此外,多效唑处理使小桐子的开花期和结果期更加集中,便于田间管理和采收.多效唑作为赤霉素合成的抑制剂,可以有效地促进小桐子由营养生长向生殖生长的转变,对于了解赤霉素在调控小桐子花发育方面的作用具有重要意义;同时也有助于克隆有关功能基因,进一步采用转基因技术对小桐子进行遗传改良.     

重庆烟草地区ELISA检测

为调查重庆主要烟草地区的病毒病种类,采用没脸免疫吸附法(ELISA)对采自重庆涪陵、彭水、万州、黔江、武隆、酉阳的258份的烟草样品进行了病毒病种类的检测.检测结果表明,其中274份样品呈阳性。主要受到7种病毒病的侵染,主要包括:烟草花叶病毒(Tobacco mosaic virus,TMV)、黄瓜花叶病毒(Cucumber mosaic virus,CMV)、马铃薯Y病毒(Potato virus Y,PVY)、马铃薯X病毒(Potato virus X,PVX)、芜菁花叶病毒(Turnip mosaic virus,TuMV)、蚕豆萎蔫病毒2号Broad bean wilt virus 2,BBWV-2)、烟草蚀纹病毒(Tobacco etch virus,TEV)。其中TMV的检出率最高,达50%,已成为重庆地区烟草优势病原。     

友好还是敌对?理解互动意图的大脑动态时程

"他们是友好的还是敌对的?"人如何快速识别他人的社会互动意图?基于对他人意图准确而快速的理解,才能正确地选择应对策略和反应方式,做出与对方展开合作还是应对冲突的决策.为了探索大脑如何理解2个个体通过整个身体表现出的不同性质交际意图的动态加工时程,采用事件相关电位技术记录了16名健康被试观察3类不同性质的交际意图动作(友好意图、敌对意图和无互动意图)照片时的脑电成分.电生理学结果表明,在较早阶段(170~270 ms),在大脑的额中区发现,友好意图的N2峰值比敌对意图和无互动意图更负,而敌对意图与无互动意图则没有显著差异.在晚期阶段(270~500 ms),在大脑的顶区、中线和右半球,敌对意图的P3峰值比友好意图和无互动意图更正,而友好意图与无互动意图则没有显著差异.本研究为大脑理解不同性质的社会互动意图(相对于无互动意图)的动态加工时程提供了神经电生理学的初步证据.     

术前预后营养指数对肺鳞状细胞癌患者术后复发及死亡的预测价值分析

摘要 目的：探讨术前预后营养指数（PNI）与肺鳞状细胞癌患者预后的关系及对术后复发、死亡的预测效能。方法：纳入2017年1月-2019年1月在我院接受治疗的78例肺鳞状细胞癌患者,所有患者均具有完整的临床资料及病理信息,对其进行门诊复查随访3年,除去失访病例共纳入76例患者资料,期间共有43例患者复发、37例患者死亡;按照复发及死亡情况将该76例患者分别分为复发组（n=43）及未复发组（n=33）,死亡组（n=37）及存活组（n=39）,分别使用单因素和多因素Logistic回归分析影响肺鳞状细胞癌患者复发及死亡的独立危险因素;采用受试者工作特征（ROC）曲线分别分析PNI在肺鳞状细胞癌患者术后复发及死亡的预测效能及最佳截断值。结果：单因素分析显示,TNM分期、吸烟年限、糖尿病、家族史、PNI是影响肺鳞状细胞癌患者术后复发的相关因素（P＜0.05）;性别、年龄、TNM分期、BMI、吸烟史、吸烟年限及PNI是影响肺鳞状细胞癌患者术后死亡的相关因素（P＜0.05）。多因素Logistic回归模型分析显示,TNM分期为Ⅲ期、吸烟年限较长、家族史是引发肺鳞状细胞癌患者术后复发的独立危险因素,PNI为保护因素（P＜0.05）;另外男性、年龄较大、TNM分期为Ⅲ期、吸烟年限较长是引发肺鳞状细胞癌患者术后死亡的独立危险因素,PNI为保护因素（P＜0.05）;ROC分析显示PNI在预测肺鳞状细胞癌患者术后复发的曲线下面积为0.726,敏感度为0.814,特异度为0.667,最佳截断值为48;PNI在预测肺鳞状细胞癌患者术后存活的曲线下面积为0.787,敏感度为0.838,特异度为0.718,最佳截断值为50。结论：PNI对肺鳞状细胞癌患者术后复发及生存均具有较高的预测效能,提高PNI水平对改善肺鳞状细胞癌患者的预后具有积极作用。