用寡核苷酸本身作为PCR引物检测其重组DNA

以待检测的寡核苷酸本身作为一个引物,加上两个载体特异引物,组成两对PCR引物。含待检测寡核苷酸片段的重组DNA用这两对引物可分别扩增出两个大小不同的片段,而载体DNA只有一对引物（即载体特异引物）可扩增出一个较小的片段。     

土施多效唑对小桐子营养生长与生殖生长的影响

小桐子(Jatropha curcas)是一种具有多种用途的植物,其种子含油量高达40％,是一种很有应用前景的能源植物.小桐子在温度、湿度较高的地区,特别是其修剪后新萌发的枝条经常出现营养生长旺盛,成花量较少的现象,导致其种子产量较低.本研究采用多效唑(paclobutrazol,PAC)对小桐子进行土施处理,结果表明:多效唑的使用剂量为0.8g·m-1树冠直径时,可有效抑制小桐子的营养生长,降低株高;同时促进小桐子的生殖生长,增加开花和结果枝条数量,增加花序和果序数量,增加单个花序的总花数和雌花的比例,可将小桐子单株种子产量提高2.4倍.此外,多效唑处理使小桐子的开花期和结果期更加集中,便于田间管理和采收.多效唑作为赤霉素合成的抑制剂,可以有效地促进小桐子由营养生长向生殖生长的转变,对于了解赤霉素在调控小桐子花发育方面的作用具有重要意义;同时也有助于克隆有关功能基因,进一步采用转基因技术对小桐子进行遗传改良.     

外源基因质粒pZFX2导入小麦半原生质体的研究

采用电脉冲法,转化大分子复合物ＩｇＧ－荧光素进入小麦部分酶解（１２０ｍｉｎ）愈伤组织的细胞即半原生质体中,在荧光显微镜下观察发现一些细胞有荧光发生,由此确定的较适宜脉冲转化条件如电场强度为２２５０－３０５０Ｖ／ｃｍ应用于转化外源基因ｐＺＦＸ２到小麦半原生质体,随后将其按愈伤组织的培养过程进行培养和抗ｋａｎａｍｙｃｉｎ筛选后获得成活愈伤组织团块,存活率为１１．３％￣１８．９％,这都说明已成功地将这两     

用PDS—1000／He型基因枪将外源基因质粒pZFX2导入小麦细胞的研究

小麦是世界上分布广、种植面积大的粮食作物,选育高产、优质、抗病等优良性状的小麦新品种具有重要的意义。近年来,随着植物遗传转化技术的不断完善,小麦的遗传转化也取得较大突破,先后采用基因枪法、花粉介导法、ＰＥＧ法和激光穿刺法等,将ＮＰＴⅡ、Ｂａｒ、ＧＵＳ...     

农杆菌LBA4404不含内源GUS基因

用长度为21bp的一对β－葡糖苷酸酶（GUS）基因的PCR引物,从根癌农杆菌LBA4404细胞总DNA中扩增不出任何片段,但从合pBI121的LBA4404细胞总DNA中可扩增出一条预期大小（1．2kb）的GUS基因片段,这表明根瘤农杆菌LBA4404不含内源GUS基因．     

一种简易的与考马斯亮蓝相结合的低背景银染法

1972年Kerenyi建立的凝胶电泳的银染色法由于灵敏度高而被广泛采用。此法创建初期常产生较深的背景染色,以致影响弱带的显示,后来几经改进,特别是Blum等人利用硫代硫酸钠的化学特性,发展了一种高灵敏度的低背景银染方法,使此法愈     

能源植物小桐子赤霉素合成代谢及信号转导相关基因的鉴定及序列分析

赤霉素(gibberellin,GA)是一类非常重要的植物激素,在植物种子萌发、茎干伸长、叶片生长、腺毛发育、花粉成熟、开花诱导和果实成熟等生长发育过程中都发挥着重要的作用。GA在一年生草本植物中可以促进开花,而在大多数多年生木本植物中则抑制成花诱导。为了更好地研究赤霉素在木本油料能源植物小桐子(Jatropha curcas)开花调控方面的作用机理,我们对小桐子整个基因组中参与GA合成代谢和信号转导的全部基因进行了鉴定和序列分析。这些基因包括6个多基因家族编码的蛋白,即GA2氧化酶(GA2-oxidase,GA2ox)、GA3氧化酶(GA3-oxidase,GA3ox)、GA20氧化酶(GA20-oxidase,GA20ox)、GID1(GIBBERELLIN INSENSITIVE DWARF1)、DELLAs和F-box蛋白,以及2个单基因编码的蛋白,EL1(EARLY FLOWERING1)和SPY(SPINDLY)。采用拟南芥和水稻中已经鉴定的上述基因编码的蛋白序列在小桐子基因组序列数据库和本实验的小桐子转录组数据库中进行BLASTP分析,找到17个同源蛋白的全长序列,并将其与28个拟南芥的、16个水稻的、24个葡萄的和22个蓖麻的同源蛋白构建系统发育树进行比对分析。结果表明,小桐子中参与赤霉素合成代谢及信号转导的大多数基因与蓖麻和葡萄同源基因的相似度更高。     

赤霉素诱导小桐子产生两性花

小桐子（Jatropha curcas）种子含油率高,油脂组成适合于生产生物燃油,是制备航空生物燃油和生物柴油的理想原料。小桐子是一种雌雄同株植物,雌雄花着生于同一花序,其花序中雌花比例很低,可能是其种子产量低的主要原因之一。本文研究用不同浓度的赤霉素外源喷施处理小桐子花序芽对其花和种子发育的影响。结果表明：外源赤霉素处理能够诱导小桐子产生两性花,且处理浓度越高,两性花数量越多;随着两性花数量的增加,雌花数量相应越少,但雌花与两性花数量之和在各处理和对照之间差异不显著,这表明赤霉素诱导出的两性花可能来源于雌花。另外,高浓度(500~1500mg·L-1)的赤霉素处理会导致小桐子的种子不能正常发育, 表现为每个果实中的种子数量、大小、单粒种子重量、每个果序的种子重量以及种子的含油量都显著减少。这些结果有助于深入理解赤霉素在小桐子花器官形成及种子发育过程中所发挥的生理作用,为从分子水平上对小桐子进行遗传改良、提高其种子产量奠定基础。     

一种简单实用的提取植物DNA的方法

ASimpleandPracticalMethodforIsolationofPlantDNAQIUGuo－Hua,XUZeng－Fu．CAOJi－Xiang,LIBao－Jian（BiotechnologyResearchCenter,ZhongshanUniversity,Guangzhou510275）植物DNA的提取是植物分子生物学和基因工程研究的一种基本的技术,至今已有了数种方法[1,2]。本文报道一种新的方法,与以前的方法相比,它最大的不同点是：将SDS同时用作细胞膜的去污剂和蛋白质的变性剂,变性的蛋白质通过离心而木是酚抽除去,使得整个操作过程变得简单快捷,比较温和,1h左右就可以获得纯化的植物DNA。用这种方法得到的DNA能…     

动物基因在植物中的整合,转录及表达

70年代迅速发展起来的遗传工程技术,不仅为分离基因,研究基因的结构与功能提供了强有力的手段,大大促进了分子生物学的发展,而且直接应用于多种蛋白质和多肽的生产,取得了丰硕的成果。起初,由于背景知识和技术上的原因,人们大多以微生物和动物为材料来进行这方面的工作。近年来随着植物分子生物学和植物基因转移技术的长足进步,许多研究者已经把注意力转移到植物上来了。迄今为止,已有十多个动物基因被转移到植物中。本文将对有关动物基因在植物中的整合、转录及表达的研究工作作一综述。