人白细胞介素-2结构与镇痛功能关系的研究

免疫调节因子白细胞介素-2(IL-2)具有中枢镇痛功能。实验采用基因定位突变技术,获得系列IL-2突变体,并测定其免疫学活性和镇痛能力,发现无免疫学活性的IL-2突变体20Leu-IL-2仍具有中枢镇痛能力,而44Leu-IL-2,45 Val-IL-2虽保留了免疫学活性,但其镇痛能力显著性下降或消失,阿片受体拮抗剂纳洛酮能够阻断IL-2的中枢镇痛作用,而不能影响IL-2对CTLL-2细胞的增殖作用。抗内源性阿片肽血清与IL-2能发生明显的交叉反应。实验结果提示,IL-2分子是通过由第45位Tyr残基及空间上相近的Phe残基等组成的镇痛功能位点与阿片受体相结合而发挥镇痛效应。     

大鼠实验性帕金森病的基因治疗

将稳定转染了大鼠酪氨酶羟化酶（Ｔｙｒｏｓｉｎｅｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ,ＴＨ）基因的大鼠成肌细胞移植于帕金森病大鼠模型的纹状体,进行基因治疗研究。ＲＴ－ＰＣＲ和免疫组织化学检测都证明转基因细胞可在纹状体内存活并表达ＴＨ,动物的不对称旋转行为明显改善,而且疗效可维持半年以上。     

白细胞介素—2—绿脓杆菌外毒素融合蛋白的分高纯化及其复性研究

表达的白细胞介素－２－绿脓杆菌外毒素（ＩＬ－２－ＰＥ）融合蛋白以包含体形式存在于宿主菌中,为分离纯化表达产物提供了方便,但因需进行复性,也增加了后处理的难度．我们采用４ｍｏｌ／Ｌ尿素、０．５％ＴｒｉｔｏｎＸ－１００的１×ＰＢＳ洗涤包含体两遍,再经ＳｅｐｈａｃｒｙｌＳ－３００分子筛及ＤＥＡＥ－ＳｅｐｈａｒｏｓｅＦＦ阴离子交换柱层析后,获得的融合蛋白纯度可达９０％～９５％。此外,我们从ＧＳＳＧ浓度、Ｌ－精氨酸浓度、复性蛋白质的起始浓度、复性液的ｐＨ值、复性温度及复性时间等参数入手,系统地研究了融合蛋白的复性条件,探索到了ＩＬ－２－ＭＥ４０和ＩＬ－２－ＰＥ６６４Ｇｌｕ融合蛋白复性的最适条件。     

CD自杀基因系统对胶质瘤细胞作用的实验研究

将含大肠杆菌胞嘧啶脱氨酶(EC-CD)基因的重组逆转录病毒感染大鼠神经胶质瘤细胞C6,获得稳定表达CD的克隆细胞C6/CD。CD可以将无毒性的原药5-氟胞嘧啶(5-FC)转化成高度细胞毒性物质5-氟尿嘧啶(5-FU)。生长抑制试验表明C6/CD细胞对5-FC高度敏感,IC_(50)为3μmol/L;5-FC对C6细胞基本无毒性,IC_(50)近6000μmol/L;而C6/CD和C 6细胞均对低浓度5-FU敏感,IC_(50)小于1μmol/L。混合细胞试验表明C6/CD细胞在5-FC存在下对C6细胞有旁杀伤效应。本工作在细胞水平建立了一个治疗神经胶质瘤的自杀基因系统,过去无人报道过。     

肿瘤基因治疗的靶向策略

对肿瘤组织的靶向性可以提高基因治疗的效果 ,避免对正常组织的损伤 ,并且能降低作为载体的微生物对机体的危害。对于瘤内注射的给药方法 ,靶向性似乎显得不是特别重要 ,但是如果要系统给药 ,靶向性是很关键的一个问题。靶向基因治疗肿瘤可以通过靶向基因导入和靶向基因表达来实现。近年来 ,在靶向基因导入方面的研究有很多进展 ,例如 ,用双亲性的桥连分子协助腺病毒和逆转录病毒靶向转导 ;在各种病毒载体的衣壳蛋白中插入靶向性的小肽或较大的多肽靶向结构域 ;增殖病毒作为一种很有前途的抗肿瘤制剂可有效地靶向杀伤肿瘤细胞。受体介导的DNA或DNA 脂质体复合物的靶向系统和其他一些靶向性的有疗效的载体 ,如细菌 ,也处于研究中。其中的一些载体已经进入临床实验。为了实现基因的靶向可调控表达 ,组织或肿瘤特异性的启动子和人工合成的可调控表达系统被用来调控治疗基因的表达。反义核酸、核酶以及脱氧核酶 (DNAzyme)被用来靶向抑制与肿瘤发生密切相关基因的表达。     

抑制血管生成治疗肿瘤的策略和展望

新生血管生成是绝大多数肿瘤得以生长和转移的必要前提。所以 ,通过抑制肿瘤血管生成来抑制肿瘤是非常有前途的一种方法 ,有望发展成为一种新型的癌症疗法。主要可以分为两大类 :一是通过抑制促血管生成信号或扩大抑制血管生成因子的作用来干扰肿瘤新生血管的形成过程 ,这领域的广泛研究已经发现了一系列促血管生成因子及其抑制剂和血管生成抑制因子 ;二是利用肿瘤血管与正常血管的差别来携带杀伤性药物直接特异性破坏已形成的肿瘤血管 ;另外 ,内皮细胞及其前体细胞制成疫苗也可起到直接杀伤作用。到目前为止 ,虽然很多抑制肿瘤血管的药物已经被用于临床试验 ,但结果往往不尽如人意 ,从长远来看 ,需要更有效的治疗方法。包括抗血管基因治疗策略 ,靶向药物导入系统的研究 ,以及抗血管生成药物和免疫疗法、化疗和放射治疗的联合应用都在探讨中。随着肿瘤模型评估系统的发展 ,抗血管治疗肿瘤的方法在不久的将来一定会广泛进入临床应用。     

人白细胞介素的新成员：IL－24，25，26，27

白细胞介素(interleukin．IL)是由多种免疫细胞(活化的T-细胞。淋巴细胞。单核细胞等)分泌的一类细胞因子。它们在免疫反应的调节中发挥重要作用。对治疗疾病有着重要的临床应用价值。到目前为止,人们已经发现了27种白细胞介素。有些新成员能与其受体相互作用后引起一系列生理变化。如生长、增殖、分化和凋亡等,如IL-24．25和27。而IL-26的生理功能还不太清楚。IL-24作为基因药物抑制肿瘤生长。显示了独特的临床应用前景。     

人白细胞介素家族的新成员—IL—19，IL—20，IL—21，IL—22，IL—23

白细胞介素是激活的T细胞分泌的一类细胞因子,它们在免疫调节中发挥重要作用,具有很高的临床应用价值。迄今为止,已有23种人白细胞介素被发现,构成了一个庞大的家族,其中2000－2001年间,就有5种人白细胞介素家族最新成员的序列被阐明,本文简单介绍了它们的结构,诱导表达方式,功能,及其信号相关受体等各个方面的最新研究进展。     

永生化胶质细胞介导TH基因的长效基因治疗

胶质细胞是脑部疾病基因治疗中的理想载体细胞 ,但细胞来源有限 ,体外培养时间短等因素限制了原代胶质细胞在基因治疗中的应用。以SV4 0大T抗原转化原代大鼠原代胶质细胞得到的永生化胶质细胞 (RGLT)可解决这些问题。在成瘤性检测中 ,RGLT细胞在裸鼠皮下 (观察 4周 )和大鼠纹状体内 (观察 18个月 )均不能成瘤。将大鼠酪氨酸羟化酶 (TH)基因转入RGLT细胞得到RGLT TH细胞后 ,TH免疫组化和HPLC检测表明RGLT TH细胞可表达TH并在体外合成多巴胺。将RGLT TH细胞移值入 6 羟基多巴胺损毁的帕金森病 (PD)大鼠模型的纹状体后 ,可大幅提高纹状体内多巴胺含量并显著缓解PD症状 ,疗效稳定维持超过 18个月。这些结果表明永生化胶质细胞可以安全有效地用于神经退行性疾病的长效基因治疗。     

2′-5′寡聚腺苷酸衍生物的研究——Ⅱ.pppA~(2′)p~(5′)A~(2′)p~(5′)A~(3′)p~(5′)Cp的合成及生物活性的观察

本文研究了以T_4RNA连接酶为工具,合成pppA2p~(5′)A~(2′)p~(5′)A~(3′)p~(5′)Cp(2′-5′P_3A_3-Cp)的条件,建立了分离产物的方法,连接得率可达83.1%,获得了紫外水平的量。初步研究了它的一些性质。2′-5′P_3A_3-Cp的分子结构与2′-5′P_3A_3不同,但在体外它也能抑制蛋白质的生物合成,有抗病毒等生物作用,它激活巨噬细胞的能力比2′-5′P_3A_3强。说明将pCp加到2′-5′P_3A_3的3′末端对其生物活性并无大的影响。