风疹病毒核酸检测在风疹消除阶段应用的必要性

风疹是由风疹病毒(Rubella virus,RV)引起的一种以发热、出疹为主要表现的急性呼吸道传染病,孕早期感染RV可引起先天性风疹综合征(Congenital rubella syndrome,CRS)。风疹是疫苗可预防性传染病,2008年我国将风疹疫苗纳入国家扩大免疫规划,通过连续10年免疫规划的实施,风疹发病率迅速下降,2014～2017年已接近风疹消除的目标(风疹发病率为0.8/10万～0.12/10万)。加强对风疹可疑病例的报告和实验室鉴别诊断,对隔离传染源、指导疫苗使用以及阻断RV传播具有重要的作用。《麻疹和风疹病毒感染实验室诊断手册》要求在风疹暴发流行阶段,只针对每起暴发采集5～10份血标本,检测风疹IgM是风疹病例确诊的金标准;而在消除风疹和CRS阶段要求对每一例散发疑似病例采集血清标本和鼻咽拭子,分别进行IgM抗体和RV核酸的检测。本文对我国在消除风疹和CRS阶段将RV核酸检测应用于风疹病例早期诊断的必要性进行了阐述。     

提高大肠杆菌表达外源蛋白胞外含量的策略

大肠杆菌的蛋白质表达平台在工业和农业中得到了广泛应用,使目的蛋白质表达后释放至胞外更有利于大规模的生产。目前,已经研究出许多改善外源蛋白胞外含量的方法。本文从蛋白质分泌机制、菌株、信号肽、载体和培养条件的选择和优化改造、密码子的优化和蛋白质跨膜转运过程的改善等方面总结了提高大肠杆菌表达外源蛋白的胞外含量的各种策略,指出多因素协同作用才能更全面地提升蛋白质的胞外产量。     

大鼠酷氨酸羟化酶基因在肌母细胞中稳定表达

用电穿孔法将大鼠酷氨酸羟化酶（Ｔｙｒｏｓｉｎｅ ｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ,ＴＨ）基因转染大鼠Ｌ６ＴＧ成肌细胞株,经ＰＣＲ检测、免疫组织化学和荧光组织化学检测证明,ＴＨ基因能在细胞内稳定整合和表达,并在辅因子存在时将酷氨酸转化为多巴,移植于大鼠纹状体后可成活并表达ＴＨ。     

病毒样颗粒疫苗的研究进展

病毒样颗粒(VLPs)由病毒结构蛋白组装而成,形态上与真正病毒粒子相似,大小介于15~400 nm之间,因缺乏病毒基因组而不能自主复制,相比单独的抗原蛋白和多肽,VLPs表现出与天然病毒更相似的构象表位,因此具有更强的免疫原性和生物学     

新型冠状病毒T细胞表位多肽不同免疫途径及佐剂对免疫应答的影响及长效免疫研究

很多研究表明T细胞免疫在抗新型冠状病毒（SARS-CoV-2）感染和预防重症死亡中起到关键作用。T细胞识别由抗原递呈细胞（Antigen-Presenting Cell,APC）递呈的与主要组织相容性复合体（Major Histocompatibility Complex,MHC）结合的短肽,因此新冠T细胞多肽疫苗成为研究重点之一。本研究利用三条C57BL/6J小鼠MHC II类分子限制性的新冠T细胞表位多肽分别结合目前已经在临床上市使用的佐剂：铝佐剂,5’cytosine-phosphateguanine 3’oligonucleotide(CpG-OND,以下简称CpG)佐剂以及铝加CpG佐剂制备成小鼠新冠T细胞多肽疫苗,通过皮下、肌肉、滴鼻（CpG佐剂组别）三种给药方式两次免疫C57BL/6J小鼠,在二免后14 d和6个月（CpG佐剂组别）后利用荧光免疫斑点实验（FluoroSpot）评价疫苗刺激小鼠脾脏淋巴细胞产生的辅助型T细胞1(T helper 1 cell,Th1)应答细胞因子—干扰素γ(Interferon-γ, IFN-γ)、肿瘤坏死因子α(Tumor Necrosi...     

帕金森病裸DNA法基因治疗的实验研究

采用体内裸DNA基因治疗帕金森病(PD)取得显著疗效.将酪氨酸羟比酶(TH)基冈表达质粒与Lipofectin形成的复合物立体定位注射于PD模型鼠纹状体,显著改善了PD鼠的不对付旋转行为.免疫组化证实神经细胞表达了外源TH.     

大鼠酪氨酸羟化酶基因在肌母细胞中稳定表达

用电穿孔法将大鼠酪氨酸羟化酶（Ｔｙｒｏｓｉｎｅｈｙｄｒｏｘｙｌａｓｅ,ＴＨ）基因转染大鼠Ｌ－６ＴＧ成肌细胞株,经ＰＣＲ检测、免疫组织化学和荧光组织化学检测证明,ＴＨ基因能在细胞内稳定整合和表达,并在辅因子存在时将酪氨酸转化为多巴．移植于大鼠纹状体后可成活并表达ＴＨ。     

卵巢癌细胞中RhoA和NF-κB表达与癌细胞增殖、侵袭能力的关系

目的:探讨卵巢癌细胞中RhoA和NF-κB表达与癌细胞增殖、侵袭能力的关系。方法:采用RT-PCR和Western blot检测卵巢癌细胞A2780、SW626、Skow3和正常卵巢上皮HOSEA中RhoA和NF-κB的表达;MTT法测定A2780、SW626、Skow3的增殖能力;Transwell小室体外侵袭实验检验细胞侵袭能力。结果:三种卵巢癌细胞中RhoA与NF-κB的表达无差异,但均高于正常卵巢上皮HOSEA中表达(P0.05);MTT实验结果显示在24 h、48 h、72 h、96 h、120 h时间点,过表达RhoA组和NF-κB组吸光光度值大于对照组(P0.05);RhoA转染后,A2780、SW626、Skow3、HOSEA 4种细胞的穿膜细胞数测值分别是33.56±12.42、56.21±9.53、25.53±11.89、0,说明SW626侵袭力最强,HOSEA无侵袭力(P0.05),不同细胞间侵袭力存在差异,且具有统计学意义(P0.05)。NF-κB转染后,A2780、SW626、Skow3、HOSEA 4种细胞的穿膜细胞数分别为22.53±12.57、33.90±10.12、45.91±9.02、0,其中穿膜细胞数最多的是Skow3细胞,不同细胞间穿膜细胞数比较差异具有统计学意义(P0.05)。结论:卵巢癌细胞中RhoA与NF-κB表达增加,可增强细胞增殖能力,并使细胞具有侵袭性。