葡萄品种DNA指纹数据库的构建及遗传多样性分析

利用SSR分子标记技术对314份葡萄品种进行了DNA指纹数据库构建和遗传多样性分析,为葡萄品种鉴定、亲缘关系分析和植物品种权保护提供科学依据。结果表明:9对引物共扩增出199个等位基因,多态性位点为199个,多态性比率达100%,每个标记检测到的位点数在17~31之间,平均为22.1个;多态性信息含量(PIC)值变幅在0.793~0.886之间,平均值为0.839。本研究发现3组同名异物品种和9组疑似同物异名品种,除此之外的290份品种中,70份品种仅需1对引物即可区分开,其余品种需要引物组合来实现品种之间的区分。最少选用8对引物即可完全区分开290份葡萄品种。最终利用8对多态性SSR引物构建了314份供试材料的DNA指纹数据库,聚类分析结果表明:263份二倍体供试材料可被分为真葡萄亚属和圆叶葡萄亚属两大类,而真葡萄亚属又被分为15个亚类。51份多倍体供试材料被分为3组,聚类结果与供试材料已知的系谱来源基本吻合。     

基于核基因分子多态性的葡萄属物种鉴定

葡萄属(Vitis)植物主要分布于东亚、北美洲以及欧洲至中亚地区。由于葡萄主要采用无性繁殖方式,地区间品种交流较多,同名异物及同物异名现象较为普遍,给葡萄属物种的分类、鉴定造成一定困难。本研究通过序列同源性比对的方法对葡萄属4种植物基因组的保守编码区进行比对,挖掘保守序列93条,经过验证,找到了一条可用于开发多态性分子标记的KOG3174同源序列,并根据该序列设计得到3对引物,可用于4种葡萄的分类、鉴定。     

葡萄斑叶蝉的生物学特性及防治

葡萄斑叶蝉在豫西各地每年发生3代,以成虫在落叶下、杂草丛等越冬。发生盛期在7月下旬及8月上旬。可采用以下方法防治：秋末清扫落叶并销毁;成虫产卵盛期人工摘虫叶;喷洒20％杀灭菊酯3000倍稀释液或50％辛硫磷2000倍稀释液,杀虫效果可达90％。     

葡萄果实发育过程中果肉细胞超微结构的观察

用透射电镜观察了“巨峰”葡萄(Vitis vinifera×V.labrusca)果实3个发育时期中果肉细胞超微结构的变化。果实第一次快速生长期的果肉细胞超微结构表现出物质和能量代谢旺盛的特点。缓慢生长期的果实虽外部形态平静少变,但果肉细胞超微结构表现出深刻的变化:细胞核形状特化为裂瓣状是最显著的特点;线粒体数目丰富;粗面内质网槽库膨大形成的囊泡富集,出现向液泡汇融和向质膜靠近的现象;质膜内陷;液泡膜完整。另外,原生质也出现一些降解的现象。但总体结构特点表明果肉细胞在此期处于十分活跃的物质周转代谢和信息交换过程中。果实第二次快速生长期果肉细胞超微结构表现出衰老降解的特点,但线粒体结构依然完整,数量仍然丰富,原生质膜也保持了很好的完整性,这似乎与维持第二次快速生长或成熟有关。     

葡萄卷叶病毒的纯化,血清学研究及其在脱毒组培苗检测中的应用

将具有典型葡萄卷叶病(Grapevine leafroll diseas,GLRD)症状的葡萄组织,经差速和硫酸铯—蔗糖密度梯度离心,提纯了GLRV,并制备了兔抗血清。电镜下可观察到长度从600～2000nm的线形病毒颗粒,其中以1400nm左右为主。免疫电镜结果表明线形病毒颗粒能被美国的NY-1分离株抗血清(Ⅲ型)所修饰。在间接ELISA中提纯制品与GLRV的Ⅲ、Ⅳ、Ⅱ型抗血清均能产生免疫反应。与Ⅲ型抗血清产生较强的免疫反应,Ⅳ型次之,Ⅱ型最弱。在SDS-免疫双扩散实验中病组织韧皮部粗提液与GLRV的Ⅲ,Ⅳ、Ⅱ型抗血清均产生免疫沉淀线。从而推测我国葡萄园内的葡萄卷叶病很可能由2种或3种卷叶病毒感染所致.采用A蛋白夹心酶联免疫吸附试验(PAS-ELISA)检测葡萄试管苗,Ⅲ型抗血清和自制抗血清的平行测试结果基本相符,共获得11个生食葡萄和10个山葡萄品种的脱葡萄卷叶病毒和扇叶病毒的组培苗,扩繁后田间试种表现出良好的农艺性状。     

苏云金杆菌内毒素蛋白基因转入葡萄胚性愈伤组织细胞及转基因…

以葡萄的胚性愈伤组织作为农杆菌介导,Ｔｉ质粒转化材料,利用共培养法将苏云杆菌内毒素蛋白基因转入葡萄胚性愈伤组织细胞,通过胚状体发生途径再生转基因植株。实验发现：８００μｍｏｌ／Ｌ的乙酰丁香酮诱导处理农杆菌和葡萄愈伤组织后可转将化效率提高５０倍。     

山葡萄与优良品种杂交培育抗寒品种

抗寒力极强的山葡萄与优良品种杂交,Ｆ１、Ｆ２和Ｆ３抗寒性仍较强,品质趋优。经高代综合杂交组合,选育出一批抗寒性强、经济性状好的新品种（品系）。     

葡萄的嫩枝嫁接

葡萄的嫩技嫁接在生产应用上很重要,如：大粒藤检葡萄扦插苗（自报）根系弱,没主根,均是须根,长势及结果差,需要嫁接到其他根系强的品种上。嫁接还可使一树结出多个品种的葡萄。嫩枝嫁接比较省事而快;不易流伤,愈合力强,成活率可高达95％D一般从嫁接到结果约需2－3年,笔者多年经验可使其当年结果。一、选好砧木选两年生无病、强壮的巨峰等长势强盛的葡萄品种作砧木。早春及早植于向阳处肥沃的土壤里。在根部留2－3个饱满的芽,剪去芽以上的枝条。发芽长出幼苗后,每棵只留一个强芽苗生长,摘除其他芽苗及率芽。适加肥水,防止病虫…     

葡萄的贮藏保鲜

葡萄果实属于浆果类，柔软多汁，含糖量较高。由于葡萄皮薄、汁液多，果柄部分组织结构疏松，采后容易干柄脱粒和腐烂。所以，搞好葡萄的保鲜对促进农村经济的发展，为消费者保障均衡的季节供应都有好处。根据葡萄果实的特点，可以采用以下几种保鲜方法： 一、采前处理 果园于采摘前一个星期停止浇水，采收当天喷５００ｐｐｍ的扑海因杀菌剂，以控制采后贮藏病害；或喷洒５０ｐｐｍ奈乙酸以防止葡萄落粒。最好选择晴天将药液兑好后，直接喷洒于果穗上，待药液干后即可采摘。 二、采收 葡萄果实采后没有呼吸高峰，也没有后熟作用，因此葡萄…     

酿酒葡萄品质评价及其对气象条件的响应

根据2004～2005年我国北方6省酿酒葡萄主要产区葡萄取样和宁夏芦花台园艺场田间试验葡萄化验结果，运用层次分析方法（AHP）对酿酒葡萄主要品质因子总糖、糖酸比pH、单宁进行综合评价，运用主成分分析方法和因子分析法研究影响每个地区酿酒葡萄综合品质的主要气象因子和影响时段。结果表明：2004～2005年贺兰山东麓的御马、玉泉营、广夏三基地、贺东在庄园；河西走廊的高台、武威；新疆石河子酿酒葡萄品质优良，渤海湾的烟台、蓬莱、昌藜等地酿酒葡萄品质表现一般。酿酒葡萄综合品质主要受果实着色期、全生育期和7～8月的降水量和水热系数的影响，其中降水量起主导作用。果实着色期气温日较差和全生育期平均相对湿度对酿酒葡萄综合品质的形成也有重要影响，影响相对较小的是果实着色期的最低气温。采样地区的光照、温度等气象条件基本适宜酿酒葡萄品质形成，对优质酿酒葡萄形成没有大的限制作用。