斜顶菌中岩藻聚糖的研究分离,纯化与性质测定

本文粗略地介绍了从95％乙醇处理后的天然斜顶菌子实体残渣中,提取、分离、纯化岩藻聚糖的实验原理和方法,并总结了对提取、分级中各多糖级份进行的组分分析与性质测定等方面的工作。由季铵盐分级沉淀、醋酸不溶所分离得到的水不溶多糖级份,纯化后,经纸层析、气相色谱分析表明:该级份的多糖是由单一的岩藻糖组成的岩藻聚糖,该多糖不溶于水、二甲基亚砜,溶于NaOH溶液。其比旋为[α]~(20)_D=554°,平均分子量大约在8千左右,岩藻糖含量为79.4％,蛋白质含量约占15.6％。     

夏枯草多糖的提取、分离与纯化技术研究

对夏枯草多糖的分离纯化方法作了探讨,通过正交试验,筛选出最佳工艺条件。采用纸层析、琼脂糖凝胶电泳和紫外分光光度法对多糖纯度进行鉴定,红外光谱法对多糖分子结构进行分析,通过分级沉淀和气相色谱仪分析了多糖的单糖组成。     

海南红树林淡紫拟青霉胞外多糖提取条件的优化

为了探讨影响红树林淡紫拟青霉胞外多糖提取的因素,确定最佳提取方案,设置不同的发酵液浓缩倍数、三氯乙酸用量等因素,设计单因素实验测定多糖提取最佳条件。然后设计正交试验,检测多糖在不同条件下的提取率,以获得最佳提取工艺。结果发现,发酵液浓缩3~5倍时多糖提取率最高,10%的三氯乙酸对蛋白质脱除效果最好;正交试验表明影响多糖提取的因素依次为乙醇用量、沉淀时间和温度,最优方案为3倍95%乙醇、4 ℃沉淀24 h。该条件下,多糖提取率可达57.835%±1.206%。研究结果为红树林淡紫拟青霉胞外多糖的提取研究提供了参考。     

仙人掌多糖对蛋白质糖基化终产物和醛糖还原酶的抑制效应

以仙人掌为原料提取多糖产品,通过超滤浓缩和不同浓度乙醇分级沉淀,分别得到55%乙醇沉淀的多糖(OPMC I),进一步乙醇浓度增至80%沉淀的多糖(OPMCⅡ),以及一次性80%乙醇沉淀的多糖(OPMCⅢ)。比较了三种多糖对蛋白质非酶糖基化反应的终端产物(AGEs)和醛糖还原酶(AR)形成的抑制作用。结果表明,在对AGEs形成的抑制过程中,第四周时OPMC II的抑制作用较强,且强于同剂量的氨基胍;在对AR活性的抑制作用中,OPMC II在三种多糖样品中抑制作用最强,但明显低于阳性对照物依帕司他。     

灵芝发酵液多糖提取物对荷瘤小鼠细胞免疫的动态观察

目的:观察灵芝发酵液多糖提取物对S180荷瘤小鼠部分免疫指标的动态调节作用,探讨其抗肿瘤机制.方法:S180瘤细胞荷瘤昆明小鼠80只建立动物模型,生理盐水组(NS组)与灵芝发酵液多糖组(GFG组)各40只,分别于荷瘤后第4,7,10,13,16天每组各处死8只小鼠,检测GFG对NK细胞活性、淋巴细胞转化率的影响.结果:GFG能显著提高荷瘤小鼠NK细胞活性和淋巴细胞转化率.随荷瘤时间延长,GFG组较NS组能维持较高水平(P＜0.01),但总体呈下降趋势.结论:灵芝发酵液多糖提取物能显著提高NK细胞活性和淋巴细胞转化率,并维持一定水平.     

黑盖木层孔菌发酵液多糖的分离纯化及活性研究

黑盖木层孔菌发酵液醇沉得胞外粗多糖(PNM)。气相色谱分析PNM为一杂多糖,单糖组成为：木糖、甘露糖、半乳糖、葡萄糖,质量比为0.05：0.63：0.31：1.00。PNM经冻融分级、Sevag法脱蛋白、Sepharose CL-6B柱层析得级分PNMⅠ,高效液相分析表明为单一级分,分子量约2.9×104。初步考察了PNM和PNMⅠ对小鼠离体淋巴细胞增殖的影响,二者都在400μg/ml时对淋巴细胞有极显著的增殖作用。     

羊肚菌液体发酵培养基的优化及发酵液成分分析

通过液体深层发酵获得羊肚菌菌丝体和发酵液为羊肚菌的开发利用提供了新的途径,本文以胞内多糖和胞外多糖为综合指标,对羊肚菌的最佳培养基组成进行了优化,并对羊肚菌发酵液的成分进行了分析。     

金针菇深层发酵菌丝体中水溶性多糖的提取条件的研究

本文研究了食用菌深层发酵金针菇菌丝体多糖的提取条件。实验表明,在加水比为１：６,沸水提取４小时,进行三次抽提后,用４倍乙醇沉淀所获粗多糖得率最高。粗多糖经脱色去蛋白后以７０％（Ｖ／Ｖ）乙醇分级可获得最高级分精制多糖。     

江西虫草发酵液脱色及其多糖提取分离的优化工艺*

通过单因素和正交试验法,优化了江西虫草发酵液脱色的工艺条件。即在提取多糖前,调节发酵液pH值至5,活性炭用量为3g／100mL,在25℃恒温条件下吸附5min后,发酵液脱色率可达到89．6％,发酵液多糖的耗损率仅为10．7％。在此基础上,采用正交试验法,对发酵液多糖提取工艺进行了优化。利用优化后的工艺,即经脱色和去蛋白后发酵液滤液浓缩至其总体积的1／7,加入乙醇,终浓度为80％,醇析16h,发酵液多糖的得率可达到0．38g／L。     

水稻可溶性糖蛋白的纯化与鉴定研究

从水稻鲜叶中提取总蛋白,对总蛋白中的蛋白质含量进行了测定;通过硫酸铵沉淀将总蛋白提取液进行分级,从而达到了总蛋白细分和放量的目的。四级份的分级蛋白分别通过ConA-Sepharose 4B 亲和层析进行糖蛋白纯化,按吸收峰收集的各级糖蛋白混合物进行冷冻干燥,得到干粉;结合PAS法染色和考马斯亮蓝R-250染色对四级份的糖蛋白样品鉴定,在其中3个级份中均检测出糖蛋白;由于感度的差异,按考马斯亮蓝R-250染色可检测出近30种糖蛋白(包括部分糖肽),按PAS法染色可检测到7种糖蛋白;对3种含量较高的糖蛋白进行了胶上纯化,3种糖蛋白的PAS法染色均证实了3种样品为单一的糖蛋白或者糖肽,分别命名为RG1、RG2和RG3。     

生物富硒对灵芝营养成分的影响

在人工栽培灵芝中,通过外施硒盐以生物转化法获得富硒灵芝,以不同含硒量的富硒灵芝子实体为试样,系统研究了灵芝生物富硒后对其主要营养成分多糖、蛋白质、氨基酸和矿物质等的影响。结果表明：硒可以明显提高灵芝中多糖、蛋白质以及氨基酸的含量,但并不改变灵芝蛋白质的分布和蛋白质中氨基酸的组成配比,而对矿质元素则有不同的影响,如富硒灵芝子实体中人体必需微量营养元素硒有极明显地增加,而铜和钼等人体必需微量元素的含量有一定量的增加,但铁、钙、锶等矿质元素的含量则有所下降。     

雷公藤解毒持效双向发酵工艺的建立

采用双向发酵的原理,运用"发酵过程动态比较法"研究了灵芝接种于雷公藤药性基质上发酵不同时间所得菌质的化学成分、急性毒性和免疫功能的变化,以其确定雷公藤解毒持效双向发酵的最佳发酵终点。研究结果表明:发酵第30天所得的菌质(G30)总二萜的含量最低,为0.57%;与雷公藤生药比较,G30的LD50最高,且发酵第30天所得菌质的体液免疫和细胞免疫抑制作用最强。综合对成分含量、毒性及药效的动态数据联系比较、分析,确定了雷公藤解毒持效双向发酵的发酵终点与适宜的发酵周期是菌丝长满瓶后的第30天。     

近红外光谱测定灵芝子实体多糖含量

灵芝具有多种药理活性,多糖是其主要活性成分之一。目前灵芝多糖的定量常采用的比色法,使用比较繁琐,也缺乏一定的安全环保性。应用近红外光谱对灵芝进行多糖定量分析,发现对子实体直接分析存在定量不准的问题。为了快速准确地评估灵芝子实体多糖含量,本研究采用对灵芝子实体水提物进行近红外光谱检测与分析,由此建立了较好的定量模型。该模型优选谱段为5 461.7-4 235.1cm^-1,预处理方式为一阶导数+矢量归一化,校正集的维数=7,R²=0.9007,RMSECV=2.54,RPD=3.17;预测集的RMSEP=3.45,RPD=2.42,Corr. Coeff.=0.9181。这项工作为灵芝有效成分快速定量分析提供了新的方法与依据。     

外源物质对灵芝多糖和β-葡聚糖发酵的影响

研究了14种外源物质（化合物）对灵芝细胞生长和发酵合成多糖和β-葡聚糖的影响。结果表明,连翘水提物（3g/L）对灵芝细胞生长具有显著促进作用;薏苡仁酯（3g/L）对灵芝胞内多糖和β-葡聚糖的合成均具有促进作用;而桔梗水提物、硝酸铈铵、硝酸镨、茉莉酸甲酯和硝普钠对灵芝细胞生长和产物合成均具有抑制作用。进一步通过Box-Behnken试验设计和响应面法分析,建立了添加薏苡仁酯发酵产β-葡聚糖的二次多项式模型,经分析得到产β-葡聚糖的最优条件为：薏苡仁酯添加量10.5g/L、接种量16%、添加时间第88小时、发酵初始pH 7.00。在此条件下获得β-葡聚糖的产量可达(40.67±8.43)mg/L,与未添加薏苡仁酯的对照组相比,提高了41.86%;多糖产量为(0.99±0.21)g/L,与对照组相比,提高了31.99%。结果提示所得添加薏苡仁酯的优化条件可定向诱导灵芝β-葡聚糖的合成,同时也表明在灵芝液体发酵体系中添加薏苡仁酯发酵产多糖和β-葡聚糖具有一定的实用价值。     

灵芝漆酶催化直接耐晒翠蓝GL脱色条件的优化

采用灵芝菌株发酵所得的漆酶, 对酞菁类染料直接耐晒翠蓝GL进行了催化脱色实验, 确定了脱色反应的最适条件。结果表明: 单独使用灵芝漆酶粗酶液对直接耐晒翠蓝GL具有很好的脱色效果。其最适脱色pH为3.0, 最适脱色温度为40°C, 最适漆酶用量是40 U/mL, 最适染料浓度为60 mg/L。以上述最适脱色条件对直接耐晒翠蓝GL进行脱色实验, 反应70 min, 脱色率可达94.3%。研究结果显示, 所试灵芝漆酶在印染废水治理方面具有良好的应用前景。     

灵芝菌诱变育种与深层培养的研究

采用紫外线对灵芝菌进行了诱变处理,选育到一株高产菌株ＵＶ－６０Ｓ,其菌体干重达１３．１ｇ／Ｌ,粗多糖含量为６４０ｍｇ／Ｌ,分别比原菌株提高了２１．３％和３０．６％;并研究了培养基组成和培养条件对菌体生长的影响,优化了深层培养的工艺条件,使菌体产量与胞外多糖含量比优化前分别提高了１５．３％和１８．８％。     

灵芝多糖的生物合成和发酵调控

灵芝多糖是灵芝的关键药效成分之一。从灵芝多糖的结构和构效关系、灵芝多糖的单糖组成,灵芝主要多糖IPS-1-1的基本合成途径,以及灵芝多糖的深层发酵调控策略和方法等方面,综述了灵芝多糖生物合成和发酵调控方面的新进展。并对今后的主要研究方向进行了展望。     

灵芝三萜类成分与药理学研究进展

灵芝的化学成分有三萜类、多糖、生物碱、有机酸、核苷、氨基酸、酶类及微量元素等 ,其主要成分是三萜类化合物中的灵芝酸。由于灵芝化学成分的多样性 ,使灵芝具有较广泛的药理活性 ,主要包括抗肿瘤作用 ;调节免疫系统、心血管系统、神经系统、呼吸系统的作用 ;保肝、抗衰老、抗病毒、消炎抗菌、放射保护作用 ;清除氧自由基和抗氧化、致突变、活血化淤作用 ;对学习和增强记忆有良好的影响。     

原生质体紫外诱变选育灵芝新菌种的研究

对灵芝原生质体进行了紫外诱变处理 ,经过粗筛和精筛后 ,从中选出多糖含量和产量明显高于原始菌株的两株诱变株 430 2 0 #和 430 2 6#。经过 1 0代PDA斜面继代培养及其摇瓶试验和连续 3次 3t罐的中试试验 ,表明所得诱变株为比原始菌株更优秀的稳定高产、高多糖含量的灵芝生产菌株。本研究为选育适合发酵的灵芝生产菌种提供了一种快速、有效的方法     

灵芝蛋白类活性成分的研究进展

灵芝蛋白质是除了灵芝多糖和三萜外,另一类重要的活性物质。它不仅是灵芝生命活动的重要物质而且具有独特免疫原性使其在免疫调节和抗肿瘤病等方面具显著效果。近年来,国内外在灵芝蛋白质的结构特征和生物活性等研究方面已取得显著的成效。本文综述了灵芝蛋白类活性物质的种类和特征,叙述了相关的药理功能,探讨了灵芝蛋白质研究的前景和意义。