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生长抑素对羟自由基损伤的人胃粘膜上皮细胞系GES—1的影响 总被引:5,自引:0,他引:5
目的和方法:采用人胃粘膜上皮细胞系GES1细胞传代培养技术,利用Fe2+与H2O2反应生成的羟自由基(hydroxylradical,OH·)建立细胞损伤模型,探讨OH·损伤人胃粘膜细胞的机制,观察生长抑素(somatostatin,SS)对GES1细胞抗OH·损伤的影响。结果:(1)OH·可直接损伤GES1细胞,表现为细胞存活率下降而细胞乳酸脱氢酶(lactatedehydrogenase,LDH)漏出量增多;预先在细胞培养液中加入OH·特异性清除剂二甲基亚砜(5mmol/L),可预防该损伤。预先加入SS(0.01mg/L,0.1mg/L,1.0mg/L,10mg/L)对细胞存活率和细胞LDH漏出量无影响;(2)加入OH·后,细胞丙二醛(MDA)、氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量上升而还原型谷胱甘肽(GSH)含量下降。以SS0.1mg/L,1.0mg/L,10mg/L预处理,可部分减轻上述改变。结论:OH·可直接损伤GES1细胞,其机制与破坏细胞的巯基稳态及加重细胞的脂质过氧化程度有关;SS可通过维持细胞的巯基稳态,部分减轻OH·所致的GES1细胞脂质过氧化程度。 相似文献
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以杂交稻(汕优63)为试验材料,在木村B营养液中培养至三叶期,用草酸5mmol/L预处理水稻2d,再处以氧化胁迫(用0.1mmol/L浓度的活性氧诱发剂甲基紫精处理)。结果表明:MV诱发的氧化胁迫下,Rubisco及其它可溶性蛋白快速降解。草酸预处理可明显缓解Rubisco及其它可溶性蛋白的降解,降解速率分别降低1/3和1/2左右,植株经草酸处理后其叶片中几种抗氧化酶如AsA-POD、SOD、CA 相似文献
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风信子花被外植体年龄对花器官分化的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
离体培养风信子(HyacinthusorientalisL.)不同年龄的花被外植体诱导花器官直接再生的实验表明:1.在MS附加6BA2mg/L、2,4D0.1mg/L的培养基上,年龄V的外植体大量衰老,基本丧失器官再生能力,处于年龄段II~IV的外植体可发生玻璃化反应。2.玻璃化反应的外植体转移至MS附加6BA0.2mg/L、NAA0.005mg/L的培养基上继续培养30d后可再生正常的花被片,表明降低培养基中外源激素浓度能够阻止玻璃化反应继续发生。3.在MS附加6BA2mg/L、2,4D0.1mg/L的培养基上,外植体形态学下部可再生雌蕊状早期结构。平均每块外植体分化雌蕊状早期结构数以年龄Ⅲ的外植体最多 相似文献
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用无血清培养基在填充床生物反应器生产 rHuEPO 总被引:2,自引:0,他引:2
在填充床生物反应器用含5%FBS的DMEM:F12培养基培养产重组人促红细胞生成素(rHuEPO)的细胞C28~10d后,使用自制的无血清生产培养基(SFMp)生产rHuEPO。SFMp培养基既能维持细胞生长,又能生产EPO,也便于纯化分离rHuEPO。使用填充床生物反应器培养细胞,能维持培养20~25d,rHuEPO表达水平达12~28.4mg/L之间,反应器的产率达到71.0mg/L/d,比滚瓶的产率增加12~14倍。葡萄糖最高消耗量达到21g/L/d,细胞培养密度最高达到3.0×107/ml以上,每次可收无血清培养上清80~87L。由于细胞被固定在聚酯片上,培养上清中脱落细胞很少。观察了反应器的乳酸和氨的含量,其结果表明乳酸和氨含量分别低于3.5g/L和5mmol/L,不影响产物的表达。经过多批培养和生长rHuEPO的结果表明,自行配制的SFMp培养基在该反应器能有效地维持细胞生长和生产rHuEPO。 相似文献
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陈定福 《中国生物化学与分子生物学报》1994,10(4):420-426
用正丁醇抽提,硫酸铵分级沉淀,DEAE-纤维素和SephacrylS-200柱层析,从南方鲇(Silurus meridionalis Chen)肠粘膜中提取出碱性磷酸酶(AKP)。提纯倍数为39.50倍,比活为68.35μ/mg蛋白,提取酶液经PAGE和SDS-PAGE只呈现一条区带。该酶的分子量为132140,N末端氨基酸为门冬氨酸,最适pH为10.10,7.5>pH>11.5时不稳定,最适温度为40℃左右,对热不很稳定,以磷酸苯二钠为底物其K_m值为1.72×10~(-3)mol/L。Mg~(2+)、Mn~(2+)为该酶的激活剂,KH_2PO_4、L-CyS、ME、DFP、EDTA-Na_2为抑制剂。选用KH_2PO_4和DFP作抑制类型的判断,结果表明,KH_2PO_4属竞争性掏剂,其抑制常数为2.3mmol/L;DFP为非竞争性抑制剂,抑制常数为1.05mmol/L。 相似文献
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百草枯和苯甲酸钠对渗透胁迫下抗旱性不同玉米品种愈伤组织的影响 总被引:6,自引:0,他引:6
两个品种玉米愈伤组织经0.5和5mmol/L的百草枯处理3h后,在渗透胁迫下处理24h电解质泄漏率增加;H2O2和MDA积累;AsA和CAR含量的减少加剧。0.5和5mmol/L的苯甲酸钠减轻渗透胁迫诱导的氧化伤害,促进CAT活性的增加;使SOD、GR、AP和POD能维持较高的活性;AsA和CAR含量降低的幅度减小。 相似文献
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盐生杜氏藻甘油-3-磷酸脱氢酶的分离纯化及其特性的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
利用PEG分级,DEAE离子交换层析,BlueSepharose拟亲和层析,MonoQ离子交换层析等手段,分离纯化盐生杜氏藻(Dunalielasalina(Dunal)Teod.)甘油三磷酸(G3P)脱氢酶(EC1.1.1.8),得到比活为12.6U/mg的电泳纯的酶,并对此酶的生化特性进行了研究。4%~20%非变性聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测得全酶分子量约为270kD,SDSPAGE表明该酶只有一种分子量约为65kD的亚基,据此推测该酶应为同四聚体。酶催化磷酸二羟丙酮(DHAP)还原的最适pH值为7.5,催化G3P脱氢的最适pH值为10。该酶对4个底物还原型辅酶Ⅰ(NADH),二磷酸吡啶核苷酸(DHAP),辅酶Ⅰ(NAD),G3P的表观Km值分别为63μmol/L,272μmol/L,1.53mmol/L,6.52mmol/L。该酶在保存过程中易失活。NADH能降低酶失活的速度,而NAD则不然。低浓度NaCl对酶略有保护作用,但高浓度NaCl加快酶的失活,且浓度越高效应越明显。 相似文献
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氮离子注入对耐辐射异常球菌SOD活性的影响及其对Mn—SOD的诱导 总被引:9,自引:0,他引:9
研究了氮离子注入对耐辐射异常球菌(Deinococcusradiodurans)细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响及其对MnSOD的诱导。结果表明,当20keV氮离子的注入剂量低于8×1014ions/cm2时,D.radiodurans中SOD活性变化不大,当剂量在8×1014~60×1014ions/cm2范围内时,SOD的活性随着注入剂量的增大逐渐提高,但大于60×1014ions/cm2时,则逐渐下降;加入对不同金属辅基的SOD同工酶活性抑制剂H2O2和氯仿乙醇的研究表明,中高剂量下氮离子注入诱导的是D.radiodurans中MnSOD活性的提高,在正常生理条件及小于8×1014ions/cm2的剂量下,D.radiodurans中SOD总活性主要由FeSOD构成 相似文献
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水杨酸对黄瓜叶片抗氧化剂酶系的调节作用 总被引:27,自引:0,他引:27
分析了水杨酸(SA)对黄瓜(CucumissativusL.)叶片抗氧化剂酶系活性及活性氧水平的调节作用。不同浓度的SA(0.5mmol/L、1mmol/L、2.5mmol/L、5mmol/L)均能显著地提高被处理叶片超氧化物歧化酶(SOD)和过氧化物酶(POD)活性,而且还能诱导同株的非处理叶片中SOD和POD活性增加。用1mmol/LSA处理第一片真叶,在处理后6~72h,POD活性增加了22%~67%,同株非处理的第二片真叶POD活性增加了14%~86%,但是,在SA处理后3h之前以及处理96h之后,POD活性没有变化。SA能够显著降低超氧物阴离子含量和提高过氧化氢水平,但它对过氧化氢酶(CAT)活性的抑制作用很弱,表明SA提高体内过氧化氢含量的原因主要是通过提高SOD活性而不是抑制CAT活性。同工酶分析表明,SA不能诱导新的SOD同工酶,但可以诱导新的POD同工酶。 相似文献
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褪黑素对大鼠海马神经元谷氨酸所致毒性的拮抗作用 总被引:3,自引:0,他引:3
在大鼠海马脑片上电刺激Schaffer 侧支纤维, 胞外记录CA1 区锥体细胞层诱发群体锋电位(population spike,PS) , 观察灌流谷氨酸(Glu) 和褪黑素(MEL) 对PS的影响。结果显示:5-0 mmol/L浓度的Glu 可使PS值下降至对照值的4-1 % ; MEL(0-4 、0-5 和0-6 μmol/L) 与5-0 mmol/LGlu 混合给药,PS值分别变化为对照值的14-7 % 、105-2% 、24-3 % ; MEL(0-5 μmol/L) 、Glu (5-0 mmol/L) , 与赛庚啶(CDP,0-5 μmol/L) 混合给药,PS值下降至0 。上述结果提示,5-0 mmol/L浓度的Glu 有神经毒性作用, 但可为MEL拮抗, 这可能由5HT受体所介导。 相似文献
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丁酸钠对CHO-EPO工程细胞株rhEPO表达量的影响 总被引:1,自引:0,他引:1
以稳定整合有pEDEPO的CHOEPO工程细胞株为研究对象,在无血清条件下,系统观察了05、10、25和50mmol/L4个浓度的丁酸钠作用于该细胞株的情况,结果表明:丁酸钠对CHOEPO工程细胞的生长有明显的抑制作用;影响CHOEPO工程细胞EPO表达,浓度10mmol/L可提高EPO表达量25倍左右,并可持续较长的一段时间;延缓CHOEPO工程细胞在无血清培养时的细胞脱落;提高CHOEPO工程细胞EPOmRNA水平 相似文献
12.
研究了氮离子注入对耐辐射异常球菌(Deinococcusradiodurans)细胞内超氧化物歧化酶(SOD)活性的影响及其对MnSOD的诱导。结果表明,当20keV氮离子的注入剂量低于8×1014ions/cm2时,D.Radiodurans中SOD活性变化不大,当剂量在8×1014~60×1014ions/cm2范围内时,SOD的活性随着注入剂量的增大逐渐提高,但大于60×1014ions/cm2时,则逐渐下降;加入对不同金属辅基的SOD同工酶活性抑制剂H2O2和氯仿乙醇的研究表明,中高剂量下氮离子注入诱导的是D.Radiodurans中MnSOD活性的提高,在正常生理条件及小于8×1014ions/cm2的剂量下,D.Radiodurans中SOD总活性主要由FeSOD构成 相似文献
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活性氧所致超氧化物歧化酶肽链断裂的观察 总被引:1,自引:0,他引:1
探究活性氧所致铜锌超氧化物歧化酶(SOD)肽链断裂的情况。将过氧化氢或抗坏血酸-Fe(Ⅲ)分别作用于马来酰亚胺标记的SOD,然后用高效液相反相色谱(RPHPLC)分析,经1mmol/LH2O2处理后SOD用RP-HPLC分离出二个肽段,用顺磁共振检测显示只有一个肽段具有马来酰亚胺信号,经5mmol/LH2O2处理后SOD有四个肽段生成,其中有一个肽段具有马来酰亚胺信号,用5mmol/L抗坏血酸和0.01mmol/LFeCl3处理后SOD有三个肽段生成,用50mmol/L抗坏血酸及1.0mmol/LFeCl3处理后SOD也产生相同的三个肽段,只是肽段的量多.结果提示H2O2所致SOD肽链断裂无“定点”现象,而抗坏血酸-Fe(Ⅲ)所致SOD肽链断裂呈“定点”断裂。 相似文献
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氧化修饰高密度脂蛋白对培养人动脉平滑肌细胞细胞周期蛋白D_1基因表达的影响 总被引:4,自引:0,他引:4
动脉平滑肌细胞(sm ooth m uscle cell,SMC)是动脉粥样硬化(atherosclerosis,AS)斑块中的主要细胞,它的增殖在AS形成过程中极其重要.利用体外培养的人主动脉SMC,观察了天然高密度脂蛋白(native high density lipoprotein,N-HDL)及氧化修饰HDL(oxidized HDL,OX-HDL)对培养人主动脉SMC cyclin D1(细胞周期蛋白D1)基因转录表达的影响.结果表明:(1)N-HDL对SMCcyclin D1基因表达无影响(P> 0.05);(2)OX-HDL使SMCcyclin D1基因表达显著增强(P<0.01),其表达量随时间(2、12、24 h)延长而增加.上述结果表明,OX-HDL的致AS作用可能与其刺激SMCcyclin D1基因表达增加有关. 相似文献
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低浓度NaHSO3促进田间水稻的光合磷酸化和光合作用 总被引:20,自引:0,他引:20
用1~2mmol/L NaHSO3喷施于水稻(Oryza ativa L.)叶面可以提高叶片的光合速率,并能持续3d以上。在此条件下,光下叶片中的ATP含量明显增高,叶片的叶绿素毫秒延迟荧光加强,反映与光合磷酸化活力有关的跨类囊体膜质子梯度增加。乳熟期喷施2次1mmol/L NaHSO3后,水稻产量提高约10%。研究表明NaHSO3的主要作用和PMS(phenazine methosulfate) 相似文献
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水稻叶片中过氧化氢与核酮糖—1,5—二磷酸羧化酶/加氧酶降解 … 总被引:2,自引:0,他引:2
甲基紫精(MV)处理水稻植株能快速诱导核酮糖-1,5-二磷酸羧化酶/加氧酶(Rrbisco,EC4.1.1.39)及其它可溶性蛋白的降解。MV浓度越高,降解速率越高。MV能诱发叶片内源H2O2迅速积累。光合电子传递抑制剂DCMU(150μmol/L)能显著抑制MV(100μmol/L)诱导的Rubisco及其它可溶性蛋白的降解;活性氧清除剂抗坏血酸(5mmol/L)、甘露醇(10mmol/L)、苯 相似文献
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大叶紫花苜蓿愈伤组织原生质体再生植株 总被引:15,自引:0,他引:15
大叶紫花苜蓿下胚轴诱导的愈伤组织在继代培养基上生长快速,易于分散。继代第12d的愈伤组织原生质体的得率为6.5×107/g鲜重。原生质体培养基为SH基本培养基,含有1.0mg/L2,4-0、0.5mg/LBA、2.0g/LCH、2%蔗糖、6%葡萄糖、5mmol/LMES,培养密度为1.0×105/mL。培养至第12d时的原生质体再生细胞植板率为3.7%。由原生质体形成的小愈伤组织在含2.0mg/L2,4-D的MS固体培养基上大量增殖。增殖的愈伤组织转移至2.0mg/L2-ip+0.1mg/LNAA的B5培养基上,形成体细胞胚并发育成完整植株。 相似文献
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长白山白眉蝮蛇蛇毒磷脂酶A2的分离和初步表征 总被引:10,自引:0,他引:10
东北长白山白眉蝮蛇(AgkistrodonblomhoffiUsurensis)蛇毒经DEAESephadexA50离子交换层析柱,连续3步SephadexG75凝胶过滤柱得到了磷脂酶A2(PLA2)的纯品。SDS聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDSPAGE)以及基质辅助激光解析电离飞行时质谱(MALDI/TOF/MS)表征为单一蛋白,其准确分子量为(14.008±0.007)kD。最适pH范围8.0~9.0,最适的反应温度为45℃。在溶液中有多聚体的存在。 相似文献
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紫细菌RS601DCPIPH2→MV电子传递的研究 总被引:2,自引:2,他引:0
紫色非硫细菌菌株Rb.spheroides601(RS601)的载色体具有典型的Rb.sphaeroides光谱特性。在光照和以DCPIPH2为电子供体条件下,RS601载色体能够串联呼吸电子传递链而耗氧或还原MV而构成DCPIPH2→MV的非循环电子传递链。电子传递抑制剂OP抑制DCPIPH2→MV电子传递活性,其中I50为1.0mmol/L;抗霉素A对该电子递影响较小,不存在I50。LDHX, 相似文献