盐生杜氏藻甘油-3-磷酸脱氢酶的分离纯化及其特性的研究 |
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引用本文: | 张学武,刘承宪.盐生杜氏藻甘油-3-磷酸脱氢酶的分离纯化及其特性的研究[J].Acta Botanica Sinica,1999(3). |
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作者姓名: | 张学武 刘承宪 |
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作者单位: | 中国科学院上海植物生理研究所 |
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摘 要: | 利用PEG分级,DEAE离子交换层析,BlueSepharose拟亲和层析,MonoQ离子交换层析等手段,分离纯化盐生杜氏藻(Dunalielasalina(Dunal)Teod.)甘油三磷酸(G3P)脱氢酶(EC1.1.1.8),得到比活为12.6U/mg的电泳纯的酶,并对此酶的生化特性进行了研究。4%~20%非变性聚丙烯酰胺梯度凝胶电泳测得全酶分子量约为270kD,SDSPAGE表明该酶只有一种分子量约为65kD的亚基,据此推测该酶应为同四聚体。酶催化磷酸二羟丙酮(DHAP)还原的最适pH值为7.5,催化G3P脱氢的最适pH值为10。该酶对4个底物还原型辅酶Ⅰ(NADH),二磷酸吡啶核苷酸(DHAP),辅酶Ⅰ(NAD),G3P的表观Km值分别为63μmol/L,272μmol/L,1.53mmol/L,6.52mmol/L。该酶在保存过程中易失活。NADH能降低酶失活的速度,而NAD则不然。低浓度NaCl对酶略有保护作用,但高浓度NaCl加快酶的失活,且浓度越高效应越明显。
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关 键 词: | 杜氏藻,渗透调节,甘油三磷酸脱氢酶,纯化,动力学特性 |
Purification and Characterization of Glycerol 3 phosphate Dehydrogenase in Dunaliella salina |
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Authors: | ZHANG Xue Wu LIU Cheng Xian |
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Abstract: | |
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Keywords: | Dunaliella salina Osmoregulation Glycerol 3 phosphate dehydrogenase Purification Kinetic property |
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