基于肠道菌群和短链脂肪酸代谢探讨不同饮食条件下高脂血症大鼠发病机制

目的 本研究拟对比两种不同高脂饮食方式诱导的高脂血症大鼠肠道菌群变化与短链脂肪酸代谢特征,以宿主-肠道菌群-代谢角度探讨高脂血症可能的微观机制。方法 SPF级SD大鼠分为：正常饮食组(CG组):饲喂大鼠维持饲料;高脂饮食组(HFD1组):每天足量饲喂高脂饲料;限饲高脂饮食组(HFD2组):每天限量饲喂高脂饲料80 g,不限量饲喂维持饲料。8周后检测血清总胆固醇(TC)、甘油三酯(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平;苏木精-伊红(HE)染色观察大鼠肝组织和肾周脂肪病理学变化;取结肠内容物进行16S rDNA高通量测序,观察肠道菌群结构与功能的变化,并检测结肠内容物中短链脂肪酸的含量。结果 与CG组相比,HFD1组和HFD2组大鼠摄食量下降,体重升高;血清中TC、TG、LDL-C均显著升高;肝组织发生明显脂肪变性,肾周脂肪出现炎性病变;高脂干预后大鼠肠道菌群相对丰度显著变化,其中乳杆菌属相对丰度明显降低,菌群结构和功能变化明显,总短链脂肪酸、乙酸、丁酸、异丁酸下降显著。结论 两种高脂饮食方式均能引起大鼠高脂血症,且发病机制基本一致,均与脂质代谢以...     

绿豆对高脂饮食大鼠肠道微生物及脂代谢调节的影响

本文研究并评估了绿豆对高脂饮食大鼠血脂代谢(TG、TC、LDL-C、HDL-C)、肝脏脂质分布、抗氧化酶活性(SOD、CAT、T-AOC)的影响。还研究了绿豆对高脂饮食大鼠肠道微生物菌群及短链脂肪酸(SCFAs)的调节作用。结果表明,与高脂饮食组相比,添加绿豆显著减轻大鼠了血清和肝脏的脂质积累,并提高了抗氧化酶的活性。大鼠盲肠中的SCFAs含量随绿豆剂量的增加而增加。大鼠盲肠内容物以厚壁菌和拟杆菌为主。绿豆摄入影响了大鼠肠道微生物群的丰度,拟杆菌和放线菌相对丰度等增加。这些结果表明,绿豆具有改善肠道微生物及调节脂代谢的作用,对机体有显著的保护作用。     

16S rDNA测序研究高脂饮食诱导的高脂血症大鼠肠道菌群变化

目的 通过高脂饮食诱导大鼠高脂血症,采用16S rDNA测序检测高脂血症大鼠肠道菌群变化情况.方法 SD大鼠20只(清洁级),按体质量随机分为模型组和对照组,对照组大鼠给予维持饲料,模型组大鼠给予高脂饲料.1周后检测血清总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)和高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C...     

松萝调节结肠菌群抗动脉粥样硬化研究CSCD

目的 研究松萝通过调节结肠菌群的失调,改善动脉粥样硬化(AS)病理状态的作用机制,为松萝醇提物抗AS提供新的实验基础。方法 将48只SD大鼠随机等量分为正常对照组、模型对照组、阳性对照组以及松萝醇提物低、中、高剂量组。高脂饲料联合腹腔注射VD_(3)建立AS大鼠模型。用阳性药物辛伐他汀及低、中、高剂量的松萝醇提物对AS模型大鼠干预治疗,4周后,运用酶联免疫吸附法测定各组大鼠血清中总胆固醇(TC)、三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)水平,计算动脉粥样硬化指数(AI),通过HE染色检测大鼠主动脉病理形态,采用16S rDNA高通量测序技术检测结肠菌群数量。结果 松萝醇提物能显著改善模型大鼠主动脉的斑块沉积,显著降低TC、TG、LDL-C水平和AI及升高HDL-C水平(均P<0.05)。基于16S rDNA测序技术分析,松萝醇提物的干预治疗可以下调结肠菌群中致病菌毛螺旋菌属和志贺菌属的相对丰度,上调益生菌拟杆菌属的相对丰度。其中,中剂量松萝醇提物对AS导致的肠道菌群失调有显著调节作用。结论 松萝对AS具有良好的治疗效果,其作用机制可能与改善肠道菌群结构紊乱,促进AS模型大鼠的脂质代谢有关。     

基于肠肝轴探讨加味消脂利肝方调控肠道菌群治疗非酒精性脂肪肝病的作用机制CSCD

目的 通过肠肝轴探讨加味消脂利肝方(简称消脂方)治疗非酒精性脂肪肝病(nonalcoholic fatty liver disease,NAFLD)的作用机制及对肠道菌群的影响。方法 按雌雄随机将28只SD大鼠分为空白组、模型组、消脂方组和阳性对照组,模型组10只,其余每组6只。适应性饲养后,通过高脂饲料诱导法(high-fat feed,HFD)建立SD大鼠NAFLD模型。持续6周后,模型组用等体积生理盐水3.0 mL/kg灌胃,消脂方组给予消脂方7.8 g/kg灌胃,阳性对照组给予辛伐他汀0.15 mg/kg灌胃,实验持续2周,同时给予高脂饲料。实验结束后检测血清转氨酶(ALT、AST)、血脂(TG、TC、HDL-C、LDL-C)水平,并进行肝组织病理学(油红O染色)观察及肠道内容物16S rDNA高通量测序。结果 各组大鼠血清TG、TC、LDL-C、HDL-C、ALT、AST水平差异均有统计学意义(F=17.864,P<0.001;H=13.078,P=0.004;H=13.508,P=0.004;H=13.132,P=0.004;F=19.565,P=0.004;H=13.049,P=0.005)。与空白组相比,模型组大鼠血清TG、TC、LDL-C、ALT、AST水平均显著升高(P<0.001、P=0.011、P=0.005、P<0.001、P=0.012),HDL-C水平显著降低(P=0.010),肝组织脂质沉积增加(P=0.028),肠道微生物丰富度及多样性降低(P=0.014)。与模型组相比,消脂方组NAFLD大鼠血清TG、TC、LDL-C、ALT、AST水平均显著降低(P<0.001、P=0.031、P=0.042、P<0.001、P=0.029),HDL-C水平显著升高(P=0.020),同时改变肠道内容物中菌群的多样性(P=0.026),调节菌群的相对丰度。结论 消脂方通过肠肝轴调控肠道菌群丰富度及多样性,调节血脂异常改善肝损伤,从而抑制NAFLD的发生发展。     

基于16S rDNA与1H NMR技术探讨高脂血症兔肠道菌群和代谢物变化

目的 观察高脂血症模型兔的代谢物与肠道微生物变化并分析其相互关系。方法 雄性新西兰兔16只,随机分为正常组和模型组,每组8只。正常组喂普通饲料,模型组高胆固醇饮食。12周后比较2组兔血脂水平。利用16S rDNA测序技术检测兔粪便肠道菌群变化,采用1H NMR代谢组学分析结肠代谢物改变。结果 与正常组比较,模型组兔血清LDL-C、TG、TC水平显著升高（均P<0.01）;模型组兔肠道菌群结构发生改变,厚壁菌门、Lachnospiraceae＿NK4A136＿group、un＿f＿Lachnospiraceae、Subdoligranulum等菌群丰度上升,Lachnospiraceae＿NK4B4＿group、un＿o＿Gastranaerophilales等菌属丰度下降。2组差异代谢物通路分析主要涉及谷氨酰胺与谷氨酸代谢,丙氨酸、天冬氨酸和谷氨酸代谢,磷脂代谢。Lachnospiraceae＿NK4A136＿group、un＿f＿Lachnospiraceae、un＿o＿Gastranaerophilales等菌属与差异代谢物有较强相关性。结论 高脂血症的病理过程可能通过Lac...     

乌龙茶多酚对高脂饮食诱导肥胖小鼠模型肠道菌群的调节作用

为了研究乌龙茶多酚(Oolong tea polyphenols,OTP)对肥胖小鼠肠道微生物群的调节作用,本文采用高脂饮食诱导小鼠肥胖后,通过高通量测序技术分析其对肠道菌群结构的影响。结果表明,OTP能够明显抑制高脂喂养小鼠肥胖的形成、减轻肝脏脂肪变性、降低血清中总胆固醇(Total cholesterol,TC)、甘油三酯(Triglyceride,TG)、低密度脂蛋白胆固醇(Low density lipoprotein cholesterol,LDL-C)含量以及增加高密度脂蛋白胆固醇(High density lipoprotein cholesterol,HDL-C)的含量(P0.05)。进一步分析显示,OTP能够抑制高脂饮食导致的小鼠肠道菌群丰度及多样性的降低。从微生物群落结构上看,补充8周OTP后,可以观察到肥胖小鼠肠道中拟杆菌门(Bacteroidetes)的增加和厚壁菌门(Firmicutes)的减少,Firmicutes/Bacteroidetes比率相应降低,该实验结果表明OTP对肠道菌群具有一定的调节作用。因此,OTP可能具有益生元活性,可作为功能性食品成分预防肠道菌群生态的失调,并具有治疗肠道微生物功能失调的潜在治疗效用。     

脑梗死患者肠道菌群特征及其与血清代谢标志物水平的相关性

目的探究脑梗死患者肠道菌群特征,分析其与血清代谢标志物水平的相关性。方法对2018年1月至2018年8月间于我院就诊的43例急性脑梗死患者(脑梗死组)和43例健康体检者(对照组)的肠道菌群特征进行检测,采用16S rDNA实时荧光定量PCR技术对两组患者肠道菌群进行测定、分析,并对两组患者血清代谢标志物(血肌酐、尿素氮、总胆固醇、甘油三酯、高密度脂蛋白胆固醇、低密度脂蛋白胆固醇、空腹血糖、糖化血红蛋白及超敏C反应蛋白)水平进行比较,应用Pearson相关系数模型探究患者肠道菌群特征与常用血清代谢标志物水平的相关性。结果脑梗死组患者的空腹血糖、HbA1c、TC、TG、LDL-C和hs-CRP水平显著高于对照组,HDL-C水平显著低于对照组(Ps0.05)。16S rDNA分析结果显示,兼性厌氧菌是肠道的主要菌群,专性厌氧菌其次,需氧菌的比例最小。脑梗死组患者肠道主要优势菌为链球菌、大肠埃希菌和葡萄球菌,而对照组患者为双歧杆菌、乳杆菌等。脑梗死组患者肠道艰难梭菌、肠球菌、链球菌和葡萄球菌水平明显高于对照组(Ps0.05),双歧杆菌、奇异菌和乳杆菌水平明显低于对照组(Ps0.05)。Pearson相关性分析显示,奇异菌和罗伊乳杆菌水平与HbA1c水平呈明显负相关(r=-0.225,-0.348,Ps0.05),植物乳杆菌数量与TC水平呈明显负相关(r=-0.177,P=0.019),双歧杆菌与TG和LDL-C水平呈明显负相关(r=-0.214,-0.305,Ps0.05),艰难梭菌和葡萄球菌分别与LDL-C和hs-CRP呈明显正相关(r=0.375,0.213,Ps0.05)。结论脑梗死患者与健康人群肠道菌群存在明显差异,其中双歧杆菌、乳杆菌及奇异菌水平与糖、脂代谢指标呈负相关,艰难梭菌和葡萄球菌与低密度脂蛋白胆固醇和超敏C反应蛋白呈明显正相关。     

野生蓝莓和花青素提取物对高脂饮食小鼠肠道菌群的影响

【目的】研究野生蓝莓和花青素提取物对高脂饮食小鼠肠道菌群的影响。【方法】采用高脂饲料喂养C57BL/6小鼠,同时膳食补充野生蓝莓或花青素提取物,将25只无菌小鼠分为5组:正常对照组(Normal chow diet,NCD),普通饲料+10 g/100 g蓝莓组(NCD+BB),高脂饲料组(High-fat diet,HFD),高脂饲料+10 g/100 g蓝莓组(HFD+BB),高脂饲料+20 mg/100 g花青素组(HFD+ACN),饲养10周,每周对其食物摄入量、能量摄入量以及体重进行测定,并运用DGGE方法对小鼠肠道菌群结构变化进行动态监测。【结果】各实验组食物摄入量无显著性差异,HFD+BB组和HFD+ACN组能量摄入量均明显高于NCD+BB组。虽然HFD+BB组体重增加最为明显,但10周末时HFD+BB组体重与其他各组无显著差异。随着实验的进行,HFD组、HFD+BB组和HFD+ACN组肠道微生物多样性发生明显变化。HFD+BB组与NCD组菌群差异最大,HFD+ACN组与NCD组肠道菌群DGGE图谱相似性系数明显高于HFD组,对优势条带测序结果显示膳食补充蓝莓或花青素提取物可明显降低肥胖相关细菌Firmicutes的数量。【结论】蓝莓和花青素提取物可改善由高脂饮食引起的肠道微生态失调,调节肠道菌群结构,具有潜在的减肥消脂功能。     

茶籽皂苷对高脂血症大鼠肠道菌群的影响研究

本实验旨在研究茶籽皂苷对高脂血症大鼠肠道菌群的影响。60只雄性Wistar大鼠适应性喂养1周后随机分为正常组(10只,C组)和造模组(50只)。C组饲喂基础饲料,造模组饲喂高脂饲料。造模成功后,将造模组大鼠按体重随机分为模型对照组(H组)、阳性对照组(P组)、茶籽皂苷高、中、低剂量组(TSH组、TSM组、TSL组),并进行灌胃。灌胃4周后,用16S rRNA测序技术检测茶籽皂苷对肠道菌群的影响。结果显示:与C组相比,H组大鼠肠道菌群的丰度和多样性显著降低,其群落结构从门到属均发生显著变化。灌胃茶籽皂苷后,肠道菌群的丰度以及从门到属的群落结构也均得到有效调节,有益菌群相对丰度提升,致病菌群得到抑制。结果表明茶籽皂苷对由高脂饲料诱发的高脂血症大鼠的肠道菌群起到正向调节作用。     

音乐治疗效应的动物实验研究

近年来国内外关于音乐治疗效应的动物实验研究认为：音乐能影响动物的情绪;音乐还对动物的免疫功能、学习及记忆能力、以及动物的神经系统结构和功能等均有一定影响。该领域的研究有利于深入探索音乐疗法的作用机理。     

蚕丝固定化脂肪酶的研究

研究了蚕丝固定化脂肪酶的工艺条件,并考察了固定化脂肪酶的稳定性。试验结果表明：蚕丝与对-β-硫酸酯乙砜基苯胺(SESA)进行反应的最适条件是PH=10．8,SESA：2．0g／g蚕丝,反应生成的对氨基苯磺酰乙基蚕丝(ABSE-蚕丝)经重氮化后与脂肪酶偶联的最适条件是：pH=7．5,偶联时间>10h。加酶量为168～308u／g蚕丝时,所得固定化脂肪酶活力为106～160u√g蚕丝．此时固定化冀的活力回收率较高(>52％)。固定化脂肪酶稳定性较高．其操作半衰期约为250h。     

Studies on the effects of certain salts on germination,on growth of root,and on metabolism

Summary The effects of different concentrations of KCl, K₂SO₄, MgCl₂ and MgSO₄ on the growth in length of the first seminal root of wheat, and on the change in fresh and oven-dry weight of the seedling and its component parts have been studied. The effect of mannitol was also investigated for comparison and to study the osmotic action. The effect of salts on root growth was dependent on salt species; all effects were specific to ions and not due to osmotic activity of solution. The growth of wheat roots was suppressed by concentrations of salts much lower than those required to suppress germination. All solutions of KCl from 0.1 to 50 me/l checked the growth of the root; the retardation increased with increase of concentration. In K₂SO₄ there was a slight activation of root growth for one day in 0.1 and 0.5 me/l; then the growth was suppressed after that. In all other concentrations from 1 to 50 me/l the growth was retarded. In MgCl₂ or MgSO₄ there was some activation of root elongation in 0.05, 0.1 and 0.5 me/l; but higher concentrations retarded root growth.     

壳聚糖固定化木瓜蛋白酶的研究

以自制的壳聚糖作为载体,用戊二醛作交联剂,优化了固定化条件,研制成壳聚糖固定化木瓜蛋白酶。其活性回收率达到42—53％,操作半衰期达到一个月以上,对热、乙醇以及尿素的稳定性有很大的提高,Km值为0.67×10~2mg/mL,最适温度65—70℃,最适pH8.0,能使啤酒中的蛋白质浓度从56.5mg/L减少到2.7mg/L,可以消除啤酒的低温混浊现象。     

丹皮酚对过氧亚硝基阴离子致大鼠成骨细胞分化抑制的影响

探讨丹皮酚（Pae）拮抗过氧亚硝基阴离子（ONOO^-）对体外培养大鼠成骨细胞分化的影响。用改良的组织块法分离培养新生大鼠颅骨成骨细胞,采用淬灭流动反应方法体外制备ONOO^-,以不同终浓度加入成骨细胞培养体系,在作用不同时间后,用对硝基苯二钠动力学（PNPP）法检测细胞内碱性磷酸酶（ALP）的活性,用Lowry法测定蛋白含量,并以不同终浓度Pae消除ONOO^-（1000μmoL/L）对成骨细胞分化的影响。结果显示,不同浓度的ONOO^-（50-1000μmoL/L）均能抑制碱性磷酸酶的活性,影响分化;高浓度的丹皮酚（10^-3-10^-6mol/L）能消除ONOO^-（1000μmoL/L）对碱性磷酸酶活性的抑制,拮抗ONOO^-抑制成骨细胞分化的作用。     

Studies on the immobilization of trypsin on sand

Trypsin was immobilized on sand using five different methods. Attempts were made to attach amino-functional groups onto sand using 3-aminopropyltriethoxysilane, hexamethylenetetramine, hexamethylenediamine, and melamine. Glutaraldehyde was used as a bifunctional agent in all the methods. Methods for the estimation of the proteolytic 1activity and protein content of immobilized trypsin were standardized. The maximum retained activity was observed for trypsin immobilized on sand via 3-aminopropytriethoxysilane and glutaraldehyde. Immobilized trypsin showed a shift in the pH optimum toward the acidic side over that of soluble trypsin in all five cases. The optimum temperature for both native and immobilized trypsin prepared by the silane-glutaraldehyde method was found to be 45°C. However, the pH and thermal stabilities of immobilized trypsin were observed to be better than that of the native enzyme.     

Studies on adsorption of amyloglucosidase on ion-exchange resins

Highly charged water-soluble conjugates of amyloglucosidase with a copolymer of ethylene-maleic acid or styrene-maleic acid were prepared and adsorbed on DEAE-cellulose and other cationic resins. Negatively charged enzyme conjugates were also obtained by means of succinylation. The polyanionic conjugates of amyloglucosidase adsorbed on the cationic carriers show higher temperature stability than the native enzyme adsorbed on the same carriers under the same experimental conditions. The insoluble enzyme conjugate-carrier complexes could be reused and retained their full activity while working continuously for three weeks. The application of the insoluble enzyme preparations with the above characteristics which could possibly satisfy the requirements for industry are discussed.