脑卒中大鼠后室下区祖细胞和神经发生减少的神经影像研究

目的:通过神经影像学研究脑卒中大鼠后室下区祖细胞和神经发生减少的变化情况。方法:2个月龄的Wistar雄性大鼠70只随机分为2组:脑卒中大鼠模型组(n=35)和正常组(n=35)。构建脑卒中大鼠模型后通过磁共振成像系统观察大鼠祖细胞归巢情况、脑梗塞面积与对侧脑组织体积的百分比和脑白质纤维束重塑情况;采取免疫化组织方法分析大鼠血管新生和神经发生情况;利用Western Blot法分析脑组织内细胞因子及炎症因子的表达;再根据RT-PCR方法计算Neu N蛋白和GFAP蛋白表达。结果:MRI扫描于T1WI及T2WI序列下,通过所得图像及信号可知,模型组大鼠祖细胞归巢信号变化、脑梗塞面积与对侧脑组织体积的百分比和脑白质纤维束重塑情况比较间有显著差异(P<0.05),具有统计学意义。脑卒中大鼠血管新生和神经发生、细胞因子EVGF和BDNF水平、Neu N蛋白和GFAP蛋白表达均较正常大鼠低(P<0.05),而炎症因子IL-1β和TNF-α水平则相对较高(P<0.05)。结论:神经影像可用于脑卒中大鼠后室下区祖细胞和神经发生下降的研究,结合组织学分析,进一步验证了结果的可行性与有效性。     

妊娠期高血压疾病大鼠肾脏中蛋白激酶C-а亚型蛋白表达和转录水平的变化

目的：通过研究PKC-α蛋白及mRNA转录表达水平在妊娠期高血压疾病大鼠肾脏中的变化,以探讨妊娠期高血压疾病肾脏病理生理变化发生的机制。方法：注射L-NAME方法制备妊娠期高血压疾病动物模型并应用Western印迹杂交及RT-PCR半定量方法检测15例妊娠期高血压疾病大鼠、正常妊娠大鼠、健康孕龄大鼠肾脏组织PKC-α亚型的表达情况。结果：妊娠期高血压疾病大鼠肾脏组织中PKC-α的蛋白及mRNA表达水平显著高于正常妊娠组（P〈0.01）,正常妊娠大鼠肾脏PKC-α的蛋白及mR-NA表达水平明显低于对照组大鼠（P〈0.01）。结论：妊娠期高血压疾病大鼠肾脏组织中存在PKC-α的蛋白及mRNA的过度表达,它可能参与妊娠期高血压疾病肾脏病理生理变化。     

替米沙坦及吡哆胺对自发性高血压大鼠脑组织氧化应激的影响

目的:探讨替米沙坦及吡哆胺对自发性高血压大鼠脑组织氧化应激的影响。方法:自发性高血压大鼠24只随机分为4组(n=6):高血压对照组(HC组);替米沙坦组(T组);吡哆胺组(P组);联合治疗组(TP组)。同龄WKY大鼠作为正常对照组(NC组)。药物干预16周,测定各组脑组织中丙二醛(MDA)含量、超氧化物歧化酶(SOD)活性及烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)氧化酶p47phox mRNA表达。结果:与NC组比较,HC组脑组织中MDA含量明显升高、SOD活性明显减低(P<0.05);与HC组比较T组、P组、TP组MDA含量明显减低,SOD活性明显升高(P<0.05);与NC组比较HC组(NADPH)氧化酶p47phox mRNA表达显著上调(P<0.01);与HC组比较T组、TP组NADPH氧化酶p47phox mRNA表达明显下调(P<0.01);HC组与P组比较NADPH氧化酶p47phox mRNA表达无统计学差异(P>0.05)。结论:自发性高血压大鼠脑组织处于氧化应激状态,替米沙坦及吡哆胺可抑制自发性高血压大鼠脑组织的氧化应激水平,联合治疗并不优于替米沙坦单药治疗。     

孕酮对缺氧缺血新生鼠脑皮质HIF-1α表达的影响

目的:探讨孕酮(PROG)对缺氧缺血性新生鼠脑组织中低氧诱导因子-1α(HIF-1α)表达的影响。方法:7日龄SD大鼠80只随机分成4组(n=10):正常对照组,假手术组,缺氧缺血组和孕酮组,动物造模成功24 h后处死动物,应用RT-PCR和免疫组织化学方法观察各组新生鼠大脑皮质中HIF-1α表达的变化。结果:孕酮组HIF-1αmRNA及HIF-1α蛋白表达均明显高于其他三组(P<0.01)。结论:孕酮对新生鼠缺氧缺血性脑损伤的保护作用可能与其上调HIF-1α的表达有关。     

精神依赖物(海洛因)对胚胎大鼠形态结构发育和小脑c-Fos基因表达的影响

为了探讨精神依赖物海洛因对胚胎大鼠形态结构发育和小脑c-Fos表达的影响, 将受孕后的Wistar大鼠40只, 随机分为对照组、海洛因低、中、高剂量组, 每组10只孕鼠。于第7天时, 分别给予32.5、65 和130 mg·kg-1的海洛因, 连续9 d, 观察该物对胚胎大鼠形态结构发育的影响, 用免疫组化法检测胚胎大鼠小脑组织c-Fos基因表达水平。结果发现, 海洛因低、中剂量组活胚胎总数比对照组分别减少15.87%和29.37%;海洛因低、中剂量组出现了多指, 脐疝, 双耳、肋骨、腰椎骨、前肢掌骨、脑发育不全等畸形胚胎; 高剂量组孕鼠未见成型的胚胎。海洛因低、中剂量组胚胎小脑皮层中c-Fos表达水平(IOD)比对照组分别增加了48.94%和95.74%(P<0.01)。结果表明, 精神依赖物海洛因能通过母体干扰胚胎表型和组织器官的发育, 诱导胚胎小脑组织细胞c-Fos基因表达, 损伤脑组织细胞的发育。     

孕酮对脑缺氧缺血新生鼠海马葡萄糖转运蛋白表达的影响

目的:观察新生大鼠缺氧缺血后脑内葡萄糖转运蛋白1( GLUT1)和葡萄糖转运蛋白3 (GLUT3)的表达情况以及孕酮对其的影响.方法:新生SD大鼠40只,随机分成4组:正常组、假手术组、缺氧缺血组和孕酮组.建立新生鼠缺氧缺血性脑病模型,免疫组化方法检测新生大鼠海马部位GLUT1及GLUT3的表达.结果:正常组和假手术组新生大鼠海马可见少量GLUT1和GLUT3 的表达,两组间无显著差异( P＞0.05);缺氧缺血组GLUT1和GLUT3表达均明显高于假手术组(P＜0.05);孕酮组GLUT的表达不仅明显高于假手术组(P＜0.01),而且明显高于缺氧缺血组(P＜0.05).结论:孕酮通过上调GLUT1和GLUT3的表达以维持脑组织的能量供给,增强神经元对缺氧缺血的耐受性.     

妊娠期高血压疾病大鼠肾脏中蛋白激酶C-a亚型蛋白表达和转录水平的变化

目的:通过研究PKC-a蛋白及mRNA转录表达水平在妊娠期高血压疾病大鼠肾脏中的变化,以探讨妊娠期高血压疾病肾脏病理生理变化发生的机制.方法:注射L-NAME方法制备妊娠期高血压疾病动物模型并应用Westem印迹杂交及RT-PCR半定量方法检测15例妊娠期高血压疾病大鼠、正常妊娠大鼠、健康孕龄大鼠肾脏组织PKC-α亚型的表达情况.结果:妊娠期高血压疾病大鼠肾脏组织中PKC-α的蛋白及mRNA表达水平显著高于正常妊娠组(P<0.01),正常妊娠大鼠肾脏PKC-α的蛋白及mRNA表达水平明显低于对照组大鼠(P<0.01).结论:妊娠期高血压疾病大鼠肾脏组织中存在PKC-α的蛋白及mRNA的过度表达,它可能参与妊娠期高血压疾病肾脏病理生理变化.     

孕期家装污染对子代大鼠脑组织结构和认知功能的影响

目的:建立孕期家装污染大鼠模型,并探讨其对孕鼠子代神经元形态和神经行为的影响.方法:将22只成年孕鼠随机分为对照组和染毒组,分别在孕早期(D1-D10)给予相应的处理.在生后不同时间观察新生大鼠大脑的发育并检测脑组织重量,同时观察新生大鼠皮层神经元的形态变化并检测学习记忆活动.结果:各组新生大鼠脑组织无畸形,且各组大鼠脑组织重量无显著变化,但与对照组相比染毒组皮层神经元的排列及形态欠规则.出生一月后染毒组皮层神经元突起的数量及长度均少于对照组.行为学检测观察到染毒组大鼠其子代大鼠的学习记忆能力明显低于对照组.结论:家装污染物可导致新生大鼠海马神经元的形态学改变并抑制神经元突起的发育与生长,对大鼠的学习记忆功能有明显的损害作用.     

妊娠期高血压疾病对早产大鼠甲状腺形态及功能的影响

目的 建立妊娠期高血压疾病(hypertensive disorder complicating pregnancy, HDCP)孕鼠模型,观察HDCP对不同胎龄早产大鼠甲状腺形态及功能的影响。方法 SD孕鼠随机分为对照组和HDCP组,HDCP组自妊娠期(gestational day, GD)第13天起注射左旋硝基精氨酸甲酯(L-NAME;250 mg/(kg·d)),对照组注射等量生理盐水。早产大鼠于GD18～21行剖宫产术获得,记录两组仔鼠体重及身长;分离肝及甲状腺,肝组织匀浆用于检测甲状腺激素水平,甲状腺组织用于观察甲状腺形态及超微结构。结果 与对照组相比,HDCP组孕鼠血压及尿蛋白明显升高(P<0.05);HDCP组早产大鼠体重及身长明显低于对照组(P<0.01)。与对照组相比,HDCP组19～21 d早产大鼠TSH水平明显升高(P<0.01),T3、T4水平差异无显著性;HE染色显示,对照组仔鼠滤泡腔于GD18出现,而HDCP组于GD19出现,且数量明显减少;透射电镜下,HDCP组粗面内质网明显肿胀、脱颗粒,伴储积物。结论 成功建立HDCP孕鼠模型;与对照...     

当归对宫内缺氧新生大鼠大脑皮质神经元与VEGF mRNA表达的影响

目的 探讨宫内缺氧对新生大鼠大脑皮质神经元与VEGF mRNA表达的影响以及当归的调控作用.方法 孕14 d健康SD雌性大鼠15只,随机分为对照组、缺氧组和当归组各5只,于孕14 d开始将当归组与缺氧组孕鼠置于低张氧浓度三气培养箱中,制作胎鼠宫内缺氧模型,此前一小时按8 mL/kg分别给予当归和生理盐水尾静脉注射,对照组不缺氧,余同缺氧组.三组孕鼠分娩当日每窝随机选取新生鼠4只,取脑组织多聚甲醛固定,石蜡包埋切片、NSE mRNA、VEGF mRNA原位杂交,400倍拍照、IPP6.0软件图像分析.结果 缺氧组新生大鼠大脑皮质NSE mRNA阳性细胞数较对照组减少,积分光密度值(IOD)降低(P＜0.05),VEGF mRNA阳性细胞IOD值升高(P＜0.05);当归组新生大鼠大脑皮质NSE mRNA阳性细胞数较缺氧组增多、IOD值增高(P＜0.05),VEGF mRNA阳性细胞IOD值增高(P＜0.05).结论 宫内缺氧可致新生大鼠大脑皮质神经元受损,当归注射液对此损伤有一定保护作用,其机制可能是通过上调大脑皮质VEGF mRNA的表达而使缺氧环境改善.     

近交系HFJ大鼠的抗肿瘤细胞Walker-256特性

目的检测近交系HFJ大鼠的肿瘤学特性。方法采用大鼠肿瘤细胞Walker-256分别接种HFJ大鼠和Wistar大鼠制作腹水瘤、实体瘤模型,观察两种动物对同一种肿瘤细胞的敏感性及免疫反应差异。结果对于腹水瘤Walker-256接种7d,Wistar大鼠有6只腹水产生为阴性,HFJ大鼠腹水产生均为阳性。继续观察至20d,可见到Wistar大鼠有3只腹水阴性(阳性率9/12,死亡2只,染色体用1只),而HFJ大鼠腹水全部为阴性(阳性率0/12,死亡2只,染色体用1只)。腹水中Walker-256细胞染色体分析,Wistar大鼠和HFJ大鼠众数变化范围均为50～62条,无显著差异。实体瘤接种7d,Wistar大鼠和HFJ大鼠均可触摸到右侧腋下有肿块产生。20d后Wistar大鼠除2只肿块消失外其他均有肿块存在并随时间延长而增大(阳性率13/15);所有HFJ大鼠腋下肿块均变软并逐渐消失(阳性率0/15)。检测各组大鼠的细胞免疫、体液免疫功能,发现正常HFJ大鼠IgM、IgA显著低于Wistar大鼠(P<0.01),IgG差异不显著。荷瘤组HFJ大鼠和Wistar大鼠IgG均高于各自正常对照组,差异极显著(P<0.01)。Wist-ar大鼠腹水瘤阳性组IgG显著低于阴性组和HFJ腹水阳性组(P<0.05),Wistar大鼠实体瘤阳性组也显著低于HFJ实体阳性组(P<0.01)。Wistar大鼠腹水瘤阳性组IgM显著低于阴性组(P<0.05),Wistar大鼠腹水瘤阴性组和HFJ大鼠腹水瘤、实体瘤阳性组IgM均高于各自对照组,且差异显著(P<0.05)。细胞免疫结果显示各组CD4+数量差异不显著;正常HFJ大鼠CD8+显著少于Wistar大鼠(P<0.05),Wistar大鼠腹水瘤和实体瘤阳性组CD8+数量较阴性组和正常对照组均显著减少(P<0.05)。各荷瘤阴性组大鼠CD8+数量均较正常值增加,除Wistar大鼠腹水瘤和HFJ实体瘤阴性组大鼠差异显著(P<0.05)外,其他均不显著;CD4+/CD8+结果与CD8+相反。结论 HFJ大鼠具有抗大鼠肿瘤细胞Walker-256的特性,腹水瘤及实体瘤均不易生长。     

高氟低碘对Wistar大鼠大脑组织病理学及DNA损伤的影响

目的研究高氟与低碘对子代大鼠大脑组织病理学及脑细胞DNA损伤的影响。方法断乳Wistar大鼠（雌∶雄=3∶1）32只,随机分为四组：对照组,饲喂大鼠标准饲料,去离子水;高氟组,饲喂大鼠标准饲料,饮100mg/L氟化钠（NaF）去离子水;低碘组,饲喂低碘饲料（定做）,去离子水;高氟低碘组,饲喂低碘饲料,饮100mg/L氟化钠（NaF）去离子水。雌雄大鼠自然交配,待子代大鼠出生后,观察其在10、20天时脑皮质、海马组织病理学变化,及30、60和90天时脑DNA的损伤。结果与对照组相比,高氟组和低碘组大鼠大脑皮质及海马内有较多神经元核固缩、核溶解及细胞轮廓不清晰。高氟低碘组,有大量神经元出现核固缩、核溶解、锥体突明显拉长等现象,并且在大鼠发育期内尤其明显。随着日龄的增加,各实验组子代大鼠脑细胞DNA损伤程度显著增加,以高氟低碘组90日龄大鼠DNA损伤最严重。结论高氟与低碘影响了大鼠大脑皮质及海马组织形态结构与引起了脑细胞的DNA损伤。     

人脐带间充质干细胞移植对糖尿病大鼠血清学的影响

目的:观察人脐带间充质干细胞(hu MSCs)移植对糖尿病大鼠血糖、胰岛素和血清因子表达的影响。方法:随机选择12只Wistar大鼠通过腹腔注射链脲佐菌素50 mg/kg,血糖高于16.7 mmol/L者定为糖尿病大鼠,再将其随机分为糖尿病组和干细胞组,每组6只,同时选择6只雄性Wistar大鼠为正常组。干细胞组大鼠腹腔注射hu MSCs细胞悬液,糖尿病组注射PBS液。分别于注射2周、4周和6周后测定和比较各组大鼠的血糖、血清胰岛素、肿瘤坏死因子(TNF-α)和白介素-6(IL-6)的表达。结果:与正常组比较,糖尿病组和干细胞组大鼠的血糖水平均显著升高,胰岛素水平均显著降低(P0.01)。与糖尿病组比较,干细胞组大鼠注射hu MSCs后的血糖水平明显降低,胰岛素水平明显升高(P0.05),血清TNF-α和IL-6 m RNA水平均显著降低(P0.01)。结论:hu MSCs移植能显著降低糖尿病大鼠的血糖,促进其胰岛素分泌,同时降低血清TNF-α和IL-6的表达。     

T2 relaxation time measurements in the brains of scalded rats

This study aimed to evaluate the T2 relaxation time of the brain in severely scalded rats using a magnetic resonance(MR) T2 mapping sequence,and to investigate the correlation between T2 relaxation time and plasma glucose level.Twenty-eight Wistar rats were randomly divided into the scalded group(n=21)and control group(n=7).Magnetic resonance scans were performed with TIWI,T2 WI,and T2-mapping sequences in the scalded group;the scans were performed 1 day prior to scalding and 1,3,5,and7 days post-scalding;in addition,identical MR scans were performed in the control group at the same time points.T2-maps were generated and T2 relaxation times were acquired from the following brain regions:the hippocampus,thalamus,caudate-putamen,and cerebrum.Pathological changes of the hippocampus were observed.The plasma glucose level of each rat was measured before each MR scan,and a correlation analysis was performed between T2 relaxation time and plasma glucose level.We found that conventional TIWI and T2 WI did not reveal any abnormal signals or morphological changes in the hippocampus,thalamus,caudate-putamen,or cerebrum post-scalding.Both the T2 relaxation times of the selected brain regions and plasma glucose levels increased 1,3,and 5 days post-scalding,and returned to normal levels 7 days post-scalding.The most marked increase of T2 relaxation time was found in the hippocampus;similar changes were also revealed in the thalamus,caudate-putamen,and cerebrum.No correlation was found between T2 relaxation time and plasma glucose level in scalded rats.Pathological observation of the hippocampus showed edema 1,3,and 5 days post-scalding,with recovery to normal findings at 7 days post-scalding.Thus,we concluded that T2 mapping is a sensitive method for detecting and monitoring scald injury in the rat brain.As the hippocampus is the main region for modulating a stress reaction,it showed significantly increased water content along with an increased plasma glucose level post-scalding.     

跑台训练与强制性运动对脑梗死大鼠神经功能恢复的对比性研究

目的:探讨跑台训练与强制性运动康复训练对脑梗死大鼠神经功能恢复的差异。方法:将50只SD雄性大鼠随机分为正常组、假手术组、模型组、跑台训练组(T组)、强制性运动训练组(C组),每组10只,T组及C组于造模后24 h分别进行跑台训练及强制性运动训练,其他各组正常饲养。于术后14天、21天及28天分别进行神经功能缺损评分(NSS评分),随后取脑采用免疫组织化学方法观察脑梗死灶周围巢蛋白(Nestin)、半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、神经胶质酸性蛋白(GFAP)的表达。结果:各亚组同一时间NSS评分组间比较:C组、T组评分高于正常组及假手术组,但明显低于模型组(P0.05);C组评分明显低于T组(P0.05);各组内比较差异无统计学意义(P0.05)。C组、T组Caspase-3的表达明显低于正常组、假手术组及模型组(P0.05),而Nestin、GFAP的表达高于正常组、假手术组及模型组(P0.05)。T组Caspase-3的表达明显高于C组(P0.05),Nestin、GFAP的表达低于C组(P0.05)。结论:跑台训练与强制性运动康复训练2种方法对脑梗死大鼠神经功能恢复均有效;强制性运动的效果优于跑台训练。     

补阳还五汤对脊髓损伤后大鼠大脑皮层运动神经元IL-17表达的影响

目的:通过观察补阳还五汤大鼠急性脊髓损伤后大脑神经元细胞凋亡及IL-17的表达的影响,探讨其神经保护机制。方法:SD大鼠24只,分成正常组、假手术组、SCI组、BYHWD组,通过在T3-T4横突间横断右侧半脊髓制备SCI模型,分别于手术前1d及术后1 d、1 w、4 w、8 w运动BBB评分评定大鼠后肢运动功能;术后8 w用Tunnel法检测神经细胞凋亡、免疫组化法检测大鼠神经细胞IL-17的表达。结果:BBB评分比较:SCI组、BYHWD组BBB评分明显低于正常组与假手术组,差异有统计学意义(P0.01);BYHWD组在术后4 w、8 w两个时间点均高于SCI组,差异有统计学意义(P0.05)。细胞凋亡率比较:SCI组与BYHWD组细胞凋亡率均高于正常组与假手术组,且差异有统计学意义(P0.01)。BYHWD组凋亡率低于SCI组且差异有统计学意义(P0.01)。IL-17阳性细胞率比较:SCI组、BYHWD组IL-17阳性细胞率均显著高于正常组与假手术组(P0.01)。BYHWD组IL-17阳性细胞率显著低于SCI组,差异有统计学意义(P0.01)。结论:SCI后大脑皮层神经元的凋亡可能与IL-17的表达增加有关,补阳还五汤可能通过下调IL-17的表达从而减少细胞凋亡。     

"促育生精方" 对环磷酰胺致大鼠不育模型CatSper1 基因和CatSper2基 因的影响

目的：研究" 促育生精方" 对精子特异性钙通道蛋白CatSper1、CatSper2 表达的影响。方法：采用Real-time PCR 法检测 CatSper1 mRNA、CatSper2 mRNA 在各组大鼠（模型组、低剂量组、中剂量组、高剂量组、空白对照组）精子中的表达;用Western blot 检测各组CatSper1 蛋白,CatSper2 蛋白的表达。结果：成功建立大鼠不育模型。CatSper1 mRNA、CatSper2 mRNA表达量为： 中、高剂量组显著高于模型组（P＜0.05）。CatSper1、CatSper2蛋白表达量：中、高剂量组显著高于模型组（P＜0.05）。结论：促育生精 方能有效提高少弱精症模型大鼠精子特异性钙通道CatSper1、CatSper2 基因及其蛋白的表达。     

用cDNA表达阵列分析遗传性癫痫易感大鼠海马和大脑皮质的基因表达

采用Atlas^TM Rat cDNA Expression Array建立遗传性癫痫易感性P77PMC大鼠和正常对照Wistar大鼠的海马与大脑皮质基因表达谱,用Eagle EyeⅡStill Video System(Stratagene)图象分析仪分析两者基因表达谱差异.结果发现海马和大脑皮质中各有15个差异表达基因.海马组织中,12个基因在P77PMC大鼠中高表达而在正常对照Wistar大鼠中低表达,3个基因在正常对照Wistar大鼠中高表达,而在P77PMC大鼠中低表达;大脑皮质中,13个基因在P77PMC大鼠中高表达,而在正常对照Wistar大鼠中低表达,2个基因在正常对照Wistar大鼠中高表达,而在P77PMC大鼠中低表达. 结果说明,P77PMC大鼠与正常对照Wistar大鼠海马和大脑皮质存在多个差异表达基因,这些差异表达基因可能在癫痫的发生中扮演了重要角色.     

Increased density of fluorescent adrenergic fibers around the middle cerebral arteries of stroke-prone spontaneously hypertensive rats

The distribution of fluorescent adrenergic nerve fibers in the proximal portion (horizontal segment, Hs) and the three distal portions (major branches) of the middle cerebral arteries (MCA) was examined in stroke-prone spontaneously hypertensive rats (SHRSP) aged 10, 30, 60, 90, and 180 days, by the glyoxylic acid method. The results were compared with those in agematched normotensive Wistar Kyoto (WKY) rats. While the distribution pattern of fluorescent nerve fibers in the proximal portion of WKY rats changed from a straight linear arrangement at 10 and 30 days of age to a network-like arrangement after 60 days, those from SHRSP showed a constant meshwork pattern throughout the entire examination period. In the distal portions of the MCA of both SHRSP and WKY rats at all ages examined, fluorescent nerve fibers formed a coarse network. The distribution densities of adrenergic nerve fibers in the proximal and distal portions of the MCA of SHRSP were significantly higher (P<0.01 and 0.05) than those of WKY rats at all ages examined, except in the proximal portion at 90 and 180 days of age. The difference in nerve fiber density between SHRSP and WKY rats reached a peak at 30 days of age in both proximal and distal portions, and then gradually decreased with age. The present study suggests that sympathetic hyperinnervation is an important factor in the development of hypertension, and is involved in its maintenance in SHRSP.