牛血清白蛋白水溶液的闪光光解

本文用闪光光解方法测定了BSA原初光解瞬态产物在300～600nm波长范围较完整的吸收光谱。在N_2气饱和及激发光波长<370nm条件下,BSA光解瞬态产物有五个吸收峰,位置分别在270、310、390、410和460nm,而在有氧或激发闪光中含有370nm以上光时,色氨酸三线态在460nm附近的吸收峰消失了,表征色氮酸中性自由基的510nm吸收峰却显现出来。光解瞬态吸收谱的测量表明:BSA光解主要发生在酪氨酸和色氨酸残基上,原初光解瞬态产物有对位α-氨基丙酸苯氧自由基Tyr(λ_(max)=410、390nm),色氨酸中性自由基(λ_(max)=510、310nm),色氨酸三线态(λ_(max)=460nm)和另一种未鉴定的自由基(λ=270nm)。本工作还用闪光光解方法测定了BSA分子中酪氨酸残基光解产生Tyr的ΔO.D._(410)对pH的依赖关系,该pH曲线有两个转折点(pH4.2和pH11),通过BSA分子里的酪氨酸残基光易变程度随溶液pH的变化证明:在中性和弱酸性条件下,BSA分子中大部分酪氨酸残基埋藏在分子的内部,不能或不易光解,但随着pH改变,光易变的酪氨酸残基数也改变。这和其他方法所测BSA构象转变结果基本一致,说明闪光光解方法有可能为构象研究提供某种信息。     

徐长卿中一种新葡聚糖化学结构的研究

从常用中药徐长卿中获得一分子量为 1.5× 10 4 的多糖CPB 1。比旋光度 [α]D= 15 1.4°(0 .96 ,H2 O)。单糖组成分析表明仅含葡萄糖。甲基化分析、部分酸水解、乙酰解、IR及NMR数据表明CPB 1的主链由α D 1,4连接的葡萄糖残基组成 ,其侧链由 1,4和 1,6连接的葡萄糖残基构成。每五个葡萄糖残基组成的重复单元中含有一个分枝 ,位于主链葡萄糖残基的O 6位上     

赤霉素及竹红菌甲素荧光量子产率的常量化区域

通过对赤毒素、竹红菌甲素及苯酚量子产率的测定与比较发现,这三种荧光化合物都具有一个相对于激发波长的量子产率的稳定区域。尽管它们具有多个激发峰,但不同激发峰所激发的荧光量子产率差别较小。竹红菌甲素在室温放置一个月,690nm荧光光谱有明显的改变。以上结果提示在测定未知荧光化合物的量子产率时,被测溶液的散射较强,同时荧光物的激发与发射波长彼此相接近。量子产率较弱时,可以在最大激发峰的蓝移方向上选择激发波长来避免散射光的干扰,提高量子产率测定的准确度。竹红菌甲素在690nm的荧光肩峰,可能是分子空间结构上容易发     

光谱和光强度对龟纹瓢虫成虫趋光行为的影响

利用行为学方法研究了光谱、光强对龟纹瓢虫Propylea japonica(Thunberg)成虫的趋、避光行为的影响.结果显示:(1)在340～605nm波谱内其光谱趋光行为反应为多峰型,峰间主次不明显,紫外340nm处峰最高,趋光反应率达21%,其它各峰依大小次序分别位于绿光524nm、蓝光400～440nm和483nm处;(2)随光强增强其趋光反应率增大,白光和483nm刺激时其光强趋光行为反应呈一倒"L"型式样,524nm时呈一阶梯型,340nm时为一较平直的线型;光强最弱时仍均有一定趋光率,最强时均未出现高端平台;(3)性别对其光谱和光强度行为反应均有一定影响,但影响不大;(4)龟纹瓢虫无明显的避光反应,其避光行为可能是趋光行为衍生或其随机活动造成.结果表明:光谱对其趋光行为有一定影响,光强度的影响较大且其影响大小与波长因素有关;其复眼可感受的光强范围更宽.     

胰岛素的核磁共振研究——苯丙氨酸共振峰的确定与测链构象

以同核相关二维谱(COSY),双共振技术,去(B_(23)-B_(30))一胰岛素(DOI)测定为基础,分析确定去锌猪胰岛素的三个重要的苯丙氨酸残基B_1 ,B_(24),B_(25)的400 MHz ~1H NMR共振峰及其在不同pH值时的侧链构象.发现在高pH值时,处于单体一单体聚合界面的苯丙氨酸B_(24)侧链构象变化最大.     

紫光激发中药光敏剂用于早期胃癌的诊断

采用405nm紫光激发传统中药光敏剂(CpD4)发射的荧光中心波长在660nm。红色荧光能深入组织,因而能够应用在胃癌早期诊断及治疗中。本文测定了中药光敏剂的吸收光谱和发射荧光光谱,并提出了二种用于激发光敏剂的紫光光源。一种为“Hg-Xe”灯,发射峰为433nm;另一种为采用紫光LD,发射峰为405nm。这二种波长和中药光敏剂的吸收峰完全匹配。     

尖吻蝮蛇(Agkistrodon acutus)蛇毒出血毒素Ⅰ的萤光光谱、萤光淬灭以及和出血活性的关系

根据徐洵等人的分离方法,我们从皖南山区尖吻蝮蛇蛇毒中得到出血毒素Ⅰ(AaH-1),它的萤光激发峰在284nm,发射峰在350nm,表现出Trp残基的萤光光谱。AaH-1的萤光强度和峰位随pH值的升高而增强且红移,在pH5～6萤光强度出现跃增,活性从无到有。pH7～9萤光强度稳定,出血活性的变化规律与此相似。升温到50℃以上其萤光强度急骤下降,并失活。一定浓度的SDS,EDTA均使AaH-1的萤光强度下降,出血活性也减弱。表明能改变AaH-1的pH环境、构象或使之变性的因素都能使它的萤光强度和出血活性同时发生相应的改变。AaH-1的萤光能分别被Ⅰ~-和丙烯酰胺碰撞淬灭,从萤光峰位和丙烯酰胺淬灭常数,可见Trp残基处于这些淬灭剂可以作用的位置。NBS能氧化AaH-1的Trp残基的吲哚环,而使Trp残基的萤光淬灭,致使AaH-1的活性也相应地减弱,说明Trp残基与出血活性有关。     

毛竹茎秆叶绿体超微结构及其发射荧光光谱特征

为了探讨毛竹（Phyllostachys pubescens）茎秆的光合特性,以1龄和3龄毛竹为材料,观察了茎秆和叶中叶绿体的超微结构,测定了光合色素含量以及发射荧光光谱。结果表明：茎秆中叶绿体发育完整,其类囊体垛叠程度高于叶,并含有淀粉粒。茎秆中叶绿素总含量、类胡萝卜素及Chla／b含量显著低于叶（FI〈O．05）。茎秆发射荧光光谱在735nm处没有明显的主峰,1龄和3龄毛竹茎秆光系统lI与光系统I的半峰宽比值分别比叶降低了7．0％和11．3％（P〈0．05）,峰高比值比叶分别增加了6．5％和18．3％（P〈0．05）。四阶导数光谱在650—800nm波长范围内出现了6个极大值,代表LHCII、CP43、CP47、RCI和ILHCI的发射荧光峰以及PSI和PSII的发射荧光副振峰：其中,茎秆中RCI和LHCI特征发射荧光峰与叶相比有不同程度的红移。表明毛竹茎秆叶绿体通过提高Chlb的相对含量和增加类囊体垛叠以及降低LHCI含量,来适应毛竹茎秆以红光为主的光环境。进而协调激发能在2个光系统间的分配。     

有机溶剂微扰葡萄糖淀粉酶时的紫外、荧光和红外光谱

本文结果表明:(1)酶体系中随有机溶剂含量增加,紫外吸收亦随之增加,表明芳香氨基酸更充分地暴露,分子更趋于伸展;(2)酶的荧光发射随有机溶剂量增加而稍有变化,但当溶剂量达到一定值时[对乙二醇为35％(V/V)],荧光发射强度显著增加,表明酶分子构象受溶剂影响有一个极限值;(3)酶的傅立叶红外光谱表明,有机溶剂侧链的疏水性愈强,微扰后C=O,C—N,O—H等共价键的吸收峰变得愈宽,愈强,肽链愈伸展。     

MALDI-TOF质谱技术研究多肽一级结构特性

海兔酸性多肽(Aplysiaacidicpeptide,AAP)和海兔胰岛素Cβ(AplysiaInsulinCβ,AICβ)的一级结构分别由27和15个氨基酸残基组成,其中前者含有6个亮氨酸残基(L),并组成3对LL键,后者仅有2个亮氨酸残基,组成1对LL键。选用基质辅助激光解吸离子化飞行时间(matrixassistedlaserdesorptionionizationtimeoffight,MALDITOF)质谱技术研究AAP,AICβ和它们分解产物的一级结构稳定性过程中,发现在弱酸性介质条件下,AAP和AICβ的LL酰氨键键能比LR键能(R表示除了L以外的氨基酸残基)更强,不易被分解。AICβ和猪血管紧张肽I(angiotensinI,AnI)样品中均含有单电荷的多聚肽。随着多肽聚合数递增,多肽质谱峰的相对强度剧减。AICβ在形成多聚肽过程中,发生释放H+的现象 。     

沙冬青RING型锌指蛋白基因AmRFP1的克隆与功能初步分析

利用RT-PCR方法,从强抗逆植物蒙古沙冬青克隆到1个受寒旱诱导的锌指蛋白基因AmRFP1。预测其编码蛋白由366个氨基酸残基组成,其中含有1个C3H2C3型锌指结构域,故属于RING-H2(C3H2C3)型锌指蛋白。该蛋白还含有2个跨膜区,很可能定位于细胞质膜。半定量RT-PCR分析表明,在不同季节野外生长沙冬青植株嫩叶中,AmRFP1在夏季只有低水平表达,进入秋季后表达量明显增加,尤其在秋末冬初其表达量迅速增加并达到全年最高峰,但在进入最寒冷的隆冬后又回落至秋季水平并维持到翌年春季基本未变。将该基因在拟南芥中超表达,则明显降低了转基因拟南芥的抗冻性。     

雨生红球藻(Haematococcus pluvialis)的光谱特性研究

实验测定了雨生红球藻不同生长阶段的色素组成,吸收光谱,荧光光谱,并对其进行了分析。结果表明,用490nm波长激发时,雨生红球藻在绿色细胞阶段存在710nm和730nm附近的长波长荧光发射峰,而在红色细胞阶段仅存在730nm的长波长荧光发射峰,预示着雨生红球藻不同生长阶段在PSⅠ结构,组成,及其色素蛋白的排布等方面有很大差异。     

萱草花粉类动力蛋白生物物理学及药理学性质

利用FPLC技术从萱草花粉中鉴定并纯化了动力蛋白,研究了它的酶学性质及部分生物化学性质。结果如下:纯化的类动力蛋白分子量为100kD,等电点pI=6·15和6·80。在280nm波长激发下,最大的荧光发射波长是346nm。荧光光谱分析结合紫外吸收光谱及导数光谱分析推断它含有色氨酸和酪氨酸残基。药理学性质研究表明巯基可能在酶的活性中心起重要作用。     

肽链及蛋白质N-末端喹喔啉类荧光衍生物的形成

蛋白质及肽链N-末端经Dixon转氨后的羰酰基与邻苯二胺作用可形成喹喔啉类荧光衍生物.形成这一发色团的过程较为缓慢;喹喔啉短肽的激发(Ex 293-305nm)与发射(Em 360-365nm)波长随肽链氨基酸残基组成不同而有一定变化;喹喔啉胰岛素荧光衍生物的激发光波长为Ex318nm,发射波长为Em 353nm.喹喔啉三肽的荧光在乙二醇溶液中的变化因其氨基酸残基组成的不同而有差异.以上结果提示:喹喔啉类荧光衍生物可能作为研究蛋白和肽结构与功能的一种手段.     

酵母甘露聚糖的结构确定与核磁共振谱的解析

本文采用多种化学方法与核磁共振(NMR)相结合确定甘露聚糖SP_1的结构。高碘酸盐氧化和甲基化衍生物的色-质联机分析(G.C.-M.S.)表明SP_1含有M-~1,-~2 M-~1,和-~6 M-~1*四种糖残基。部分酸水解和乙酰解证明SP_1的主链是1→6连接,侧链是1→2连接;其中长侧链有两个残基,短侧链只有一个残基。SP_1的~1H谱在H-1区出现四个较强和一个较弱的α型氢信号,~(13)C谱在C-1区出现三个较强的峰。它们的分布与化学方法所确定的结构基本一致。     

测定植物胞内游离钠离子的研究进展

植物耐盐机制的研究一直是植物抗性研究的焦点。近年来,随着生物学不断发展和新荧光标记技术的运用,胞内钠离子测定逐渐应用于植物盐胁迫研究中。该文论述了以下三方面问题:(1)分别介绍了SBFI、Sodium Green和Coro Na Green三种钠离子荧光指示剂:SBFI是一种双激发波长指示剂,其激发波长是340 nm/380 nm,发射波长是500 nm;Sodium Green和Coro Na Green是单波长指示剂,其激发波长分别是507 nm和492nm,发射波长分别是532 nm和516 nm;(2)比较了酯导入、酸导入、电穿孔和显微注射等几种常见荧光指示剂载入胞内方法的优缺点,重点介绍了一种无损伤低温抑制酯酶法:先将荧光指示剂在缓冲液中低温(4℃)处理2 h,随后回到常温(20℃)在不含荧光指示剂的缓冲液中孵育2 h;(3)阐述了胞内离子浓度计算公式,包括单波长测定公式、双波长比率测定公式。     

组蛋白H1~0的制备凝胶电泳分离

组蛋白H1~0是一种富赖组蛋白。它在细胞分裂不旺盛的哺乳动物组织中才含有,在DNA合成活跃的胸腺及培养的肿瘤细胞中却没有或很少。传代细胞经丁酸钠等诱导药物作用后可使H1~0出现。目前多推测H1~0通过阻断DNA合成参与基因调控作用。H1~0这一不寻常的性质正日益受到重视,已发现某些组织和细胞的H1~0含有两个分子量十分接近的亚部,为探求其精确的结构和功能,需将它们完全分离。Pehrson等用Bio-Gel P-100连续两次     

光谱和光强度对西花蓟马雌虫趋光行为的影响

利用行为学方法研究了光谱、光强对西花蓟马Frankliniella occidentalis (Pergande)雌成虫的趋、避光行为的影响。结果显示：（1）在340~605nm波谱内14个波长其光谱趋光行为反应为多峰型,峰间主次较明显。趋光行为反应中,蓝绿区498~524nm有一较宽峰,趋光率20.31%;其它各峰依大小次序分别位于紫光380nm、蓝光440nm;（２）避光行为反应中,蓝光440nm处略高,避光率17.19%;紫外340nm处亦有一峰,避光率15.63%;（３）随光强增强其趋光反应率增大,白光、380nm和524nm刺激时其光强趋光行为反应呈一倒“L”型式样,498nm为峰型,440nm时为一较缓的平直线型;光强最弱时仍均有一定趋光率 ,最强时均未出现高端平台;（４）随光强增强其避光反应率增大,440nm为较平缓直线;340nm刺激时为较缓波动线。结果表明：光谱对其趋光行为有很大影响,光强度的影响较大且影响大小与波长因素有关。     

赤潮异弯藻在铁限制条件下的光谱特性

由活体吸收光谱可见,赤潮异弯藻在叶绿素c靠近红光区的吸收峰处,由铁丰富条件下的632nm向蓝漂移2nm．由于类胡萝卜素相对于叶绿素a的比值在铁限制的细胞内增大,因而受铁限制的细胞活体吸收光谱在480nm左右类胡萝卜素的吸收峰处增加了一个吸收峰．赤潮异弯藻细胞低温荧光发射光谱在685nm处有一明显的发射峰。与铁丰富条件(10μmol.L-1)相比,缺铁(5nmol·L-1)和低铁(100nmol·L-1)细胞在685nm处的荧光得率分别升高了2倍和1．4倍．补铁48h后荧光得率则明显降低。表明细胞在铁限制条件下存在大量能量耗散,降低了细胞光合作用效率．     

糖皮质激素受体的光亲和标记

利用[~3H]去炎松缩酮([~3H]TA)进行了糖皮质激素受体(GCR)的光亲和标记。[~3H]TA和GCR共价交联的证据有:(1)光照后,10％的三氯醋酸不能使[~3H]TA和GCR解离;(2)SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳时,有单一的放射活性峰;(3)用地塞米松保护后,GCR不被标记。采用本方法测定的GCR分子量为94000±3000 dalton,该方法可用于GCR分子量的测定、提纯和配基结合区的分析。