雌激素拮抗剂对胎盘EGF受体及其基因表达的影响

中期孕鼠在他莫昔芬作用下，其颌下腺，血清中ＥＧＦ含量下降，胎盘中ＥＧＦ受体结合位点数下降以及它的ｍＲＮＡ表达受到抑制，再次证实了他莫昔芬抑制雌激素诱导ＥＧＦ受体ｍＲＮＡ的表达，从而使ＥＧＦ受体结合位点数减少，因素，他莫昔芬对孕鼠胚胎生长发育有不可忽视的影响。     

EGF促进小鼠卵母细胞体外减数分裂启动机制的研究

ＥＧＦ和孕酮对小鼠卵母细胞减数分裂的重新启动具有促进作用,ＥＧＦ的作用是通过促进颗粒细胞分泌孕酮实现的。使用孕酮合成关键酶３β－ＨＳＤ的抑制剂Ｅｐｏｓｔａｎｅ可抑制ＥＧＦ促进单层培养卵巢颗粒细胞的孕酮合成从而降低ＥＧＦ对卵母细胞的促进作用。Ｃａ＾２＋参与了ＥＧＦ和孕酮的促减数分裂重新启动作用。肝素可降低两者的作用。ＥＧＦ和孕酮均可使单个卵丘颗粒细胞内的Ｃａ＾２＋水平出现波动,并且ＥＧＦ使卵丘细胞维     

人γ干扰素（IFN－γ）－表皮生长因子（EGF）融合蛋白的抗肿瘤细胞增殖作用与靶细胞的EGF受体有关

采用表皮生长因子（ＥＧＦ）受体丰富的Ａ４３１细胞进一步研究了人ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白￣〔１〕的抗细胞分裂活性,以及它和靶细胞ＥＧＦ受体的关系。结果表明,ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的抗肿瘤细胞增殖作用明显高于其母体分子。￣１２５Ｉ－ＥＧＦ受体竞争抑制试验表明,ＩＦＮ－γ可与ＥＧＦ竞争Ａ４３１细胞的ＥＧＦ受体,而ＩＮＦ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的ＥＧＦ受体竞争抑制作用更为明显,说明人ＩＦＮ－γ和ＩＦＮ－γ－ＥＧＦ３融合蛋白的抗肿瘤细胞分裂活性,与靶细胞ＥＧＦ受体被竟争抑制密切相关。     

衰老细胞转录因子AP1／CREB结合活性对EGF的可诱导性下降

转录因子与ＤＮＡ的结合是基因转录的关键环节,通过迁移性法分析季转录因子ＡＰ１、ｃＤＡＭＰ反应元件结合蛋白（ＣＲＥＢ）、糖皮质激素反应元件（ＧＲＥ）结合蛋白在衰老细胞中的结合活性,结果表明,ＡＰ１与ＣＲＥＢ的结合活性在衰老细胞中对表皮生长因子（ＥＧＦ）的反应性低于年轻细胞;而ＧＲＥ结合蛋白的结合活性在衰老细胞中对ＥＧＦ的反应性无明显变化,这提示ＥＧＦ不能有效刺激衰老细胞增殖可能与其转录因子结合活性的     

重组人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)融合蛋白的高效表达及鉴定

碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）参与了许多细胞生长和分化的调控过程。本文采用重组ＤＮＡ技术在大肠杆菌中高效表达了人ｂＦＧＦ。首先将编码人ｂＦＧＦ基因克隆到ｐＸＴ表达载体中与其上游的一短Ｓ导肽共一阅读框架,ｂＦＧＦ基因的表达受强的Ｔ７启动子调控。采用ＢＬ２１（ＤＥ３）大肠杆菌作为宿主菌,用ＩＰＴＧ诱导ＢＬ２１（ＤＥ３）细菌合成的Ｔ７ＲＮＡ聚合酶,后者可催化高水平的ｂＦＧＦ基因表达,其ｂＦＧＦ产量可占总菌体蛋白的４２.５％。采用肝素Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ一步亲和层析法直接从诱导后的细菌裂解产物中得到纯化的重组人ｂＦＧＦ蛋白。经Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析证明该蛋白可被人ｂＦＧＦ特异性单克隆抗体所识别。进一步研究证明该蛋白具有刺激ＮＲ６Ｒ－３Ｔ３成纤维细胞增殖的生物学活性,并且这一活性可被人ｂＦＧＦ特异性中和抗体所中和。     

人表皮生长因子（EGF）与单核—巨噬细胞集落刺激因子（GM—CSF）融合？…

应用基因工程技术,将ＥＧＦ,ＧＭ－ＣＳＦ基因克隆到ｐＧＥＭ－３Ｚｆ载体的ＥｃｏＲＩ,ＢａｍＨＩ位点上,再钭重组融合基因亚克隆到表达载体ｐＢＶ２２０扔ＥｃｏＲＩ,ＢａｍＨＩ位点上,在大肠杆菌ＤＨ５α中进行表达,ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和Ｗｅｓｔｅｒｎ ｂｌｏｔ表明ＥＧ－ＦＧＭ－ＣＳＦ融全蛋白获得表达,并且具有ＥＧＦ,ＧＭ－ＣＳＦ免疫学活活。     

衰老细胞转录因子AP_1/CREB结合活性对EGF的可诱导性下降

转录因子与ＤＮＡ的结合是基因转录的关键环节．通过迁移位移法分析了转录因子ＡＰ１、ｃＡＭＰ反应元件结合蛋白（ＣＲＥＢ）、糖皮质激素反应元件（ＧＲＥ）结合蛋白在衰老细胞中的结合活性．结果表明,ＡＰ１与ＣＲＥＢ的结合活性在衰老细胞中对表皮生长因子（ＥＧＦ）的反应性低于年轻细胞;而ＧＲＥ结合蛋白的结合活性在衰老细胞中对ＥＧＦ的反应性无明显变化．这提示ＥＧＦ不能有效刺激衰老细胞增殖可能与其转录因子结合活性的改变有关     

表皮生长因子与前列腺增生及前列腺癌的关系

195 9年Ｃｏｈｅｎ[1] 在纯化神经生长因子 (ＮＧＦ)的过程中 ,首先从小鼠颌下腺中发现了一种对外胚层、中胚层和内胚层细胞具有促分裂活性的多肽生长因子 ,并能明显地促进表皮细胞的生长与角化 ,命名为表皮生长因子 (ＥｐｉｄｅｒｍａｌＧｒｏｕｔｈＦａｃｔｏｒＥＧＦ)。人的表皮生长因子以ｈＥＧＦ - β和ｈＥＧＦ -γ两种形式存在。由于它对胃酸具有很强的抑制作用 ,故又命名为尿抑胃素 (ｕｒｏｇａｓｔｒｏｎｅ)。 1975年Ｓｔａｒｋｅｙ等人[2 ] 从尿中纯化获得了ＥＧＦ的纯品 ,并确定其结构。ｈＥＧＦ - β和ｈＥＧＦ -γ具有高度的同…     

hEGF和hTGF—αN结构域与C结构域的功能差异

用ＰＣＲ的方法将人表皮生长因子和人转化生长因子－α（ｈＴＧＦ－α）的Ｎ结构域和Ｃ结构域互换,构造了两个嵌合分子Ｅ－ＴＧＦ（ＥＧＦ１－３２－ＴＧＦ－α３４－５０）和Ｔ－ＥＧＦ（ＴＧＦ－α１－３３－ＥＧＦ３３－５３）。野生型和嵌合分子基因在大肠杆菌ｐｈｏＡ系统表达并纯化定量。各重组体的受体竞争结合活性大小为ｈＥＧＦ〉ｈＴＧＦ－α和Ｅ－ＴＧＦ〉Ｔ０－ＥＧＦ,它们的促细胞生长活性的大小为ｈＴＧＦ－α和Ｅ－     

小牛类表皮生长因子活性肽（c－EGF）的分离纯化及性质

本文报道小牛颌下腺通过酸抽提、ＣＭ５２、ＤＥ５２柱层析、ＳｅｐｈａｄｅｘＧ７５凝胶过滤及ＨＰＬＣ等步,分离纯化到一个分子量为６ｋＤ,等电点为４．６的小肽。该小肽类似人重组表皮生长因子（ｒｈ—ＥＧＦ）的生物活性,具有刺激ＮＲＫ细胞的增殖及刺激新生小鼠的睁眼、萌牙,并具有增加Ａ４３１细胞膜蛋白质磷酸化的功能。氨基酸组成缺少苯丙氨酸及苏氨酸残基。我们命名它为小牛类ＥＧＦ样活性肽（ｃａｌｆＥＧＦ－ｌｉｋｅａｃｔｉｖｅｐｅｐｔｉｄｅ,简称ｃ－ＥＧＦ）。     

EGF家族研究进展

自１９６２年Ｃｏｈｅｎ报道发现ＥＧＦ以来,３０多年的时间里已经先后发现了ＥＧＦ、ＴＧＦ－α、ＨＢ－ＥＧＦ、ＡＲ（ａｍｐｈｉｒｅｇｕｌｉｎ）、ＢＴＣ（ｂｅｔａｃｅｌｕｌｉｎ）、ＮＧＲ（ｎｅｕｒｏｒｅｇｕｌｉｎ）、ＨＲＧ（ｈｅｒｅｇｕｌｉｎ）与ＥＰＲ（ｅ...     

人表皮生长因子(EGF)与单核-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)融合蛋白在大肠杆菌中的表达

应用基因工程技术,将ＥＧＦ、ＧＭ－ＣＳＦ基因克隆到ｐＧＥＭ－３Ｚｆ（＋）载体的ＥｃｏＲＩ,ＢａｍＨＩ位点上,再将重组融合基因亚克隆到表达载体ｐＢＶ２２０的ＥｃｏＲＩ,ＢａｍＨＩ位点上,在大肠杆菌ＤＨ５α中进行表达,ＳＤＳ－聚丙烯酰胺凝胶电泳和Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ表明ＥＧＦ－ＧＭ－ＣＳＦ融合蛋白获得表达,并且具有ＥＧＦ、ＧＭ－ＣＳＦ的免疫学活性．这为进一步研究该融合蛋白的功能和肿瘤治疗提供一种新的基因产品．     

RFP134对UMR106细胞EGF受体酪氨酸蛋白激酶的调节作用

以大鼠成骨肉瘤细胞（ＵＭＲ１０６）为模型,研究了表皮生长因子（ＥＧＦ）对其受体酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）的调节作用。以及实验室从植物中提取纯化的二萜类活性物质（ＲＦＰ１３４）为诱导分化剂,观察了ＲＦＰ１３４对ＵＭＰ１０６细胞ＥＧＦ受体ＴＰＫ的活性和磷酸化作用的影响。并与ＲＡ和ＲＦＰ１３４＋ＲＡ处理细胞做了比较。结果显示ＥＧＦ与其受体结合后能激活ＴＰＫ,使ＴＰＫ活性增加２倍。ＲＦＰ１３４,ＲＡ,ＲＦＰ     

RFP_（134）对UMR106细胞EGF受体酪氨酸蛋白激酶的调节作用

以大鼠成骨肉瘤细胞（ＵＭＲ１０６）为模型,研究了表皮生长因子（ＥＧＦ）对其受体酪氨酸蛋白激酶（ＴＰＫ）的调节作用。以本实验室从植物中提取纯化的二萜类活性物质（ＲＦＰ１３４）为诱导分化剂,观察了ＲＦＰ１３４对ＵＭＲ１０６细胞ＥＧＦ受体ＴＰＫ的活性和磷酸化作用的影响,并与ＲＡ和ＲＦＰ１３４＋ＲＡ处理细胞做了比较,结果显示ＥＧＦ与其受体结合后能激活ＴＰＫ,使ＴＰＫ活性增加２倍．ＲＦＰ１３４,ＲＡ,ＲＦＰ１３４＋ＲＡ处理细胞后,分别降低ＥＧＦ诱导的受体ＴＰＫ活性５０％,４３％,５５％,降低磷酸化ＴＰＫ含量５５％,３６％,５３％。从结果中发现无ＥＧＦ刺激的细胞也具有受体ＴＰＫ磷酸化作用,用ＲＦＰ１３４,ＲＡ,ＲＦＰ１３４＋ＲＡ处理细胞,分别降低受体磷酸化ＴＰＫ含量５９％,４０％,５７％,而且我们发现用ＥＧＦ诱导的细胞受体ＴＰＫ含量高于无ＥＧＦ作用的细胞．提示ＵＭＲ１０６细胞本身可能具有受体ＴＰＫ活性,能够引起细胞受体自动磷酸化,ＥＧＦ刺激后ＴＰＫ的磷酸化作用增强,可见ＲＦＰ１３４对ＥＧＦ诱导的ＴＰＫ磷酸化和无ＥＧＦ诱导的受体自动磷酸化都具有明显的抑制作用,（并强于ＲＡ）这可能与在第二信使水平上阻抑ＰＴＰＫ活性密切相关     

人前列腺生长因子的分离纯化及生物活性鉴定

从人良性增生前列腺组织中经硫酸铵沉淀和肝素－琼脂糖凝胶层析纯化出人前列腺生长因子（ｈＰＧＦ）,纯化倍数约１０００倍,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦电泳示分子量约为１７ｋＤ、等电点同标准ｈＦＧＦ。利用分离培养的人前列腺间质或纤维细胞进行活性鉴定,发现以１．３￣１．７ｍｏｌ／Ｌ ＮａＣｌ洗脱部分为ｈＰＧＦ,活性最高,对间质成纤维细胞有显著刺激增殖作用。     

新型的EGF－TM7家族分子

新型的ＥＧＦ－ＴＭ７家族分子英国牛津大学的ＭｃｋｎｉｇｈＡＪ和ＧｏｒｄｏｎＳ综述了一类新型的ＥＧＦ－ＴＭ７家族分子的结构特征,它们既含有类似ＥＧＦ结构域,又含有７个跨膜结构域。至目前为止,已发现此家族由小鼠Ｆ４／８０、人ＥＭＲＩ和人ＣＤ９７等３种白细...     

碱性成纤维细胞生长因子对胚胎神经细胞存活与生长的影响

本文利用大鼠胚胎中脑神经细胞作原代微团培养,培养物经不同浓度碱性成纤维细胞生长因子（ｂａｓｉｃ Ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔ Ｇｒｏｗｔｈ Ｆａｃｔｏｒ,ｂＥＧＦ）,研究ｂＦＧＦ对细胞生长和分化的影响,并利用图象分析细胞形态的变化。结果表明ｂＥＧＦ可促进微团中的集落形成率明显增加,并显示量效应关系。图象显示ｂＦＧＦ可促进细胞神经突起增多,而且有丰富的神经纤维连结成网络状。认为ｂＥＧＦ能促进中脑细胞生长和分     

雌激素拮抗剂对胎盘EGF受体及其基因表达的影响

中期孕鼠在他莫昔芬作用下,其颌下腺,血清中ＥＧＦ含量下降,胎盘中ＥＧＦ受体结合位点数下降以及它的ｍＲＮＡ表达受到抑制,再次证实了他莫昔芬抑制雌激素诱导ＥＧＦ受体ｍＲＮＡ的表达。从而使ＥＧＦ受体结合位点数减少,因此,他莫昔芬对孕鼠胚胎生长发育有不可忽视的影响。     

人前列腺生长因子的分离纯化及生物活性鉴定

从人良性增生前列腺组织中经硫酸铵沉淀和肝素－琼脂糖凝胶层析纯化出人前列腺生长因子（ｈＰＧＦ）,纯化倍数约１０００倍,ＳＤＳ－ＰＡＧＥ和等电聚焦电泳示分子量约为１７ｋＤ、等电点同标准ｂＦＧＦ,利用分离培养的人前列腺间质成纤维细胞进行活性鉴定,发现以１．３～１．７ｍｏｌ／ＬＮａＣｌ洗脱部分为ｈＰＧＦ,活性最高,对间质成纤维细胞有显著刺激增殖作用。     

EGFR反义脱氧寡核苷酸及其硫代修饰片段抑制人肝癌细胞系BEL…

本文旨在研究针对ＥＧＦＲ ｍＲＮＡ的反义寡核苷酸片段对ＢＥＬ－７４０４细胞ＥＧＦＲ基因表达及其对细胞生长的影响。合成了互补于ＥＧＦＲ基因５’起始编码区的２１聚脱氧寡核苷酸（ＯＤＮｓ）。实验结果显示,３．２ｕｍｏｌ／Ｌ ＯＤＮｓ明显抑制ＢＥＬ－７４０４细胞生长,「３Ｈ」Ｔｄｒ掺入抑制试验显示其对细胞ＤＮＡ合成的抑制作用表现剂量依赖性;密度扫描分析显示ＯＤＮｓ处理６、２４ｈ后,肝癌细胞ＥＧＦＲ ｍＲＮ