P^53基因在U937细胞生长和分化过程中的调节作用

The expression of p53 gene has been found to be regulated during the induction of differentiation of U937 leukemic cells into mature macrophages by recombinant human granulocyte- macrophage colony stimulating factors (rhGM-CSF) We showed here that the increased expression of p53 seemed to be necessary for the differentiation of U937 cells induced by rh-GM-CSF. The inhibition of p53 expression by a p53 antisense oligodeoxynucleotide lead to the significant decrease of formation of mature macrophages from U 937 cells in the presence of rhGM-CSF. By contrast, the p53 sense oligodeoxynucleotide had no any effect. Furthermore, we have analysed the growth of U937 cells in the presence or absence of rhGM-CSF. The results showed that rhGM-CSF dramatically inhibited the growth of U 937 cells in the cultures. At the same time, the antisense inhibition experiment demonstrated that the inhibition of p53 expression partially diminished the growth-inhibitory effect of rhGM-CSF on U 937 cells. These results suggested that the p53 was required for the initiation of rhGM-CSF-induced differentiation of U 937 cells on one hand, and the inhibition of cell growth on the other hand. Thus we deduce that the increased expression of p53 induced by rhGM-CSF may be a coupling event of switch of U 937 cells from growth into differentiation.     

异源黑色素瘤DNA疫苗结合IL-12和Ii-PADRE抗鼠黑色素瘤的研究

研究酪氨酸激酶相关蛋白2(tyrosinase related protein 2,TRP-2)和gp100质粒DNA在B16黑色素瘤小鼠模型中的抗肿瘤作用。TRP-2及gp100在人类和鼠类黑色素瘤中均高度表达。鼠源gp100(mgp100)和鼠源TRP-2(mTRP-2)在小鼠中的免疫原性较差,而异源黑色素瘤相关抗原可打破这些免疫耐受。使用电脉冲法免疫人源gp100(hgp100)和人源TRP-2(hTRP-2)质粒在B16F10肿瘤模型中表现出显著的保护作用。TRP-2和gp100质粒免疫结合Ii-PADRE(invariant Pan DR reactive epitope)和鼠源白介素-12(murine interleukin-12,mIL-12)质粒有效消退了建立的皮下B16F10肿瘤。上述结果表明,肌肉内注射异源DNA疫苗结合Ii-PADRE与IL-12质粒使用可能是一种有效治疗黑色素瘤的策略。     

免疫球蛋白基因的研究进展

本文介绍了近年来免疫球蛋白(Ig)基因的分子生物学研宄概况。其中包括抗体的多样性产生机制与Ig基因家族成员重排、拼接和体细胞突变的关系,Ig重链类别转换与其恒定区基因上游的S序列间重组的关系,还有Ig启动子和增强子对Ig基因在B细胞中特异性转录的调控作用。最后简要概述了Ig超基因家族和其分子进化研究以及Ig的基因和发育工程研究状况。     

糖尿病中G蛋白功能发生异常

一些鸟苷结合蛋白(G 蛋白)在细胞外信号向细胞内传递过程中起桥梁作用。激素与受体结合后可促使腺苷环化酶催化 cAMP 生成,后者可启动细胞内一系列磷酸化级联反应,以产生其激素诱导的特征性细胞内应答。有二种 G 蛋白可与腺苷环化酶相互作用,一种对该酶起刺激作用(Gs);另一种则对该酶活性产生抑制效应(Gi)。Gs 和 Gi 都包括三个亚基:α、β和γ,Gs 和 Gi 的β和γ亚基都非常相似,只是α亚基     

TNF—α在PMA和IFN—γ诱导U937细胞生长和分化过程中的作用

本文报道了佛波酯（ＰＭＡ）和γ－干扰素（ＩＦＮ－γ）对Ｕ９３７细胞生长和分化的调控作用及其机制。ＰＭＡ和ＩＦＮ－γ能以剂量依赖的方式诱导Ｕ９３７细胞向成熟单核／巨噬细胞样细胞分化,同时抑制其细胞的生长。实验发现ＰＭＡ和ＩＦＮ－γ可诱导Ｕ９３７细胞表达ＴＮＦ－α特异性ｍＲＮＡ和蛋白质。Ｕ９３７细胞培养中加入特异性抗ＴＮＦ－α抗体可以抑制ＰＭＡ和ＩＦＮ－γ诱导Ｕ９３７细胞的分化和生长。这说明内源性的Ｔ     

p~(53)基因在U 937细胞生长和分化过程中的调节作用

本文报道了p~(53)基因对人白血病细胞系U 937细胞生长和分化的调节作用。重组人GM-CSF(rhGM-CSF)可诱导U 937细胞向成熟巨噬细胞分化,这反映在分化后的细胞表达有巨噬细胞许多表型特征和功能活性。在这一分化过程中同时伴随着p~(53)基因的表达增加和U 937细胞生长受抑。进一步,用反义脱氧寡聚核苷酸抑制试验特异性地抑制p~(53)基因表达,结果发现p~(53)反义脱氧寡聚核苷酸可以明显抑制rhGM-CSF诱导U 937细胞向成熟巨噬细胞分化,同时也明显解除rhGM-CSF介导细胞分化过程中的细胞生长抑制作用。这些结果说明p~(53)基因在U 937细胞的生长和分化过程中可能起偶联调控作用。     

白细胞介素-2加强小鼠T淋巴细胞产生白细胞介素-3

本文报道了白细胞介素-2(IL-2)刺激ConA(5μg/ml)活化的小鼠T细胞产生的条件培养液(TCM)中含有CFU-GEMM诱导活性。这种CFU-GEMM诱导活性的生成在IL-2作用后48h达到高峰。特异性抗IL-3单克降抗体可以完全中和该条件培养液中的CFU-GEMM诱导活性。进一步证明,TCM可以刺激IL-3依赖细胞系FDC-P_1细胞的增殖;在IL-2作用于ConA活化的T细胞后可促进其细胞表达高水平的IL-3mRNA。这些结果表明IL-2可以加强小鼠T细胞产生IL-3。     

免疫球蛋白基因表达的调节

本文主要概述了Ig基因增强子、启动子以及特异性DNA结合蛋白对Ig基因在B淋巴细胞中特异性转录的调节作用。同时也讨论了B淋巴细胞分化过程中所发生的Ig基因转录后调节作用。     

镉对一株深色有隔内生真菌生长、矿质营养与草酸分泌的影响

【背景】深色有隔内生真菌(dark septate endophyte,DSE)广泛定殖于镉(Cd)污染生境的植物根系,具有增强植物镉耐性的重要生态功能,但人们关于DSE对镉胁迫的生理响应的了解有限。【目的】研究一株DSE嗜鱼外瓶霉(Exophiala pisciphila)对镉胁迫的矿质营养与低分子量有机酸分泌的响应。【方法】采用液体培养法,研究不同浓度(0、25、50、100、200、400 mg/L)镉胁迫对DSE菌丝生长、矿质元素(氮、磷、钾、硫、镁、铁、钙)与镉含量、草酸分泌的影响。【结果】随着镉胁迫浓度增加,菌丝生物量显著下降,降幅为22.8%−90.6%,菌丝的氮、钾和铁含量分别减少26.0%−52.8%、53.8%−92.9%和12.8%−34.3%,而磷、镁和钙含量分别增加15.4%−111.4%、20.4%−31.4%和35.1%−62.5%,硫含量在100 mg/L镉胁迫时增加25.1%。镉胁迫还导致培养液pH值下降,草酸浓度及单位菌丝草酸分泌量显著增加。相关分析发现,菌丝镉含量与硫呈显著负相关(P<0.05),与菌丝钾含量呈极显著负相关(P<0.01),与草酸分泌量呈极显著正相关(P<0.01)。【结论】镉胁迫显著抑制DSE的生长,改变矿质元素的吸收,促进草酸分泌。     

重组人碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)融合蛋白的高效表达及鉴定

碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）参与了许多细胞生长和分化的调控过程。本文采用重组ＤＮＡ技术在大肠杆菌中高效表达了人ｂＦＧＦ。首先将编码人ｂＦＧＦ基因克隆到ｐＸＴ表达载体中与其上游的一短Ｓ导肽共一阅读框架,ｂＦＧＦ基因的表达受强的Ｔ７启动子调控。采用ＢＬ２１（ＤＥ３）大肠杆菌作为宿主菌,用ＩＰＴＧ诱导ＢＬ２１（ＤＥ３）细菌合成的Ｔ７ＲＮＡ聚合酶,后者可催化高水平的ｂＦＧＦ基因表达,其ｂＦＧＦ产量可占总菌体蛋白的４２.５％。采用肝素Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ一步亲和层析法直接从诱导后的细菌裂解产物中得到纯化的重组人ｂＦＧＦ蛋白。经Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹分析证明该蛋白可被人ｂＦＧＦ特异性单克隆抗体所识别。进一步研究证明该蛋白具有刺激ＮＲ６Ｒ－３Ｔ３成纤维细胞增殖的生物学活性,并且这一活性可被人ｂＦＧＦ特异性中和抗体所中和。