SA11株轮状病毒VP7基因的克隆及表达

采用RT PCR方法 ,从提取的SA1 1株轮状病毒总RNA中扩增出VP7基因片段 ,进行鉴定后 ,将该片段克隆于真核表达载体pEF1 HisC dhfr,构建成重组质粒pEF1 HisC dhfr VP7,然后用质脂体法转染COS 7细胞 ,进行真核系统的表达 .获得了长 981bp的PCR片段 ,序列分析结果与已知VP7序列相同 .表达后经细胞超声破碎 ,Westernblot检测表达产物 ,在相对分子质量 38× 1 0 3 处有表达条带 ,表达蛋白主要存在于上清中 .因此 ,获得了VP7基因 ,并在COS 7细胞中获得了表达 ,表达蛋白质免疫Balb c小鼠 ,获得了具有特异性结合活性的抗体     

鼠疫耶尔森氏菌LcrV基因的克隆及序列分析

为了研究鼠疫耶尔森氏菌（Y.pestis）保护性抗原V蛋白,从基因库中查得Y.pestis LcrV基因DNA序列,针对序列设计合成了一对PCR扩增引物,以本所保存的Y.pestis菌种为模板进行基因扩增,结果获得长约980bp的DNA片段。将扩增产物回收纯化,克隆至pGEM-T载体,构建重组载体pGEN-T/ypV,经过PCR,酶切鉴定,并对pGEM-T/ypV中的V基因片段进行测序,分析测序结果与己知序列相同,表明获得了LcrV基因。     

人成骨蛋白成熟肽基因在毕赤酵母中的克隆及其序列分析

采用PCR方法,根据献报道的人成骨蛋白-1（OP-1）成熟肽基因序列,设计并合一对引物,从含人成骨蛋白基因的质粒中扩增获得大小的420bp的DNA片段,连接到pGEM-T载体进行测序,证明获得人成骨蛋白成熟肽基因片段,继之以pPIC3.5k为表达载体构建重组表达质粒,并经PCR及酶切鉴定。     

鼠疫耶尔森氏菌VcrV基因在大肠杆菌中的高效表达

将测序后的鼠疫耶尔森氏菌（Yersinia pestis)LcrV基因重组质粒pGEM－T／ypV酶切,克隆于原核表达载体pBV220,构建成pBV/ypV表达质粒,转化大肠杆菌DH5α,进行PCR及酶切鉴定,筛选阳性克隆,进行温控诱导表达,SDS－PAGE检测表达产物,在相对分子质量38000处有－表达条带,经薄层扫描分析目的蛋白带占全菌蛋白的38．4％以上,主要以可溶形式存在。     

日光辐射对大肠杆菌宿主菌和工程菌存活影响的初步研究

本文了不同辐射强度的自然日光照射下,对大肠杆菌宿主菌和工程菌在光滑表面上的存活影响。结果表明,暴露２０ｍｉｎ日光累积总辐射１．１４ＭＪ／ｍ＾２,宿主菌的存活率为０．０２％。工程菌则为０。散射暴露８０ｍｉｎ,日光累积强度０．９０ＭＪ／宿住菌和工程菌的存活率比值为２：１。黑暗环境下,暴露６天对主菌采样有细菌存活,工程菌暴露２天的存活率为０。     

舟山某码头近地面大气微生物污染初步调查

本文报告了用ＦＡ－Ⅰ空气微生物采样器测定了舟山某码头近地面大气细菌和真菌的浓度分布、粒子大小以及对细菌染色形态观察。结果表明,大气中的细菌浓度为１１３ＣＦＵ／ｍ３,真菌为２６５ＣＦＵ／ｍ３。细菌的ＣＭＤ为４．９０ｕｍ,ＧＳＤ为２．７５,真菌的ＣＭＤ为４．８０ｕｍ,ＧＳＤ为１．５０。细菌染色镜检观察,革兰氏阳性菌占８８．９％,阴性菌占１１．１％。阳性菌中球菌最多,无芽胞杆菌次之,芽胞杆菌最少。阴性菌中无芽胞杆菌最多。     

牙髓紫卟啉菌内毒素对炎症性细胞因子的介导作用

牙髓紫叶琳菌ＡＴＣＣ３５４０６是近年来新发现的重要致病性专性厌氧菌,采用改良酚－氯仿－石油醚法提取牙髓紫卟啉菌ＡＴＣＣ３５４０６内毒素脂多糖,通过Ｋｒａｍｅｒ测定法、软琼脂细胞培养法以及胸腺细胞增殖法测定脂多糖的细胞生物学活性。结果显示：纯化脂多糖可不同程度地诱导小鼠模型生成肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）、集落刺激因子（ＣＳＦ）和白介素－１（ＩＬ－１）,并在一定范围内呈剂量依赖型,提示牙髓紫卟啉菌内毒素在动物模型和细胞模型中具有显著的细胞生物学和免疫学活性．     

近地面大气微生物本底调查研究进展

近地面大气微生物本底调查研究进展北京军事医学科学院微生物流行病研究所北京１０００７１张松乐随着社会的发展,人类的进步,对于环境的污染和控制,已成为各国科学界、公众和立法的注意焦点之一。在空气中的微生物可以造成环境污染,同时,存在于空气中的微生物的种类...