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1.
利用反转录PCR技术,从U937细胞总RNA中,扩增编码人可溶性CD14的基因序列,构建了重组表达质粒pEF1/HisC/sCD14^348aa;用脂质体转染法,实现了在真核细胞中的高效表达;用免疫亲和层析纯化表达产物,纯度达90%以上;PLS刺激U937细胞产生CD14的变化,证明了表达产物具有结合LPS的功能。  相似文献   
2.
采用固体膜进行TSST-1的产毒培养,然后从金葡菌产毒产物中经CM纤维素离子交换层析、SephadexG-75、Sephacryl S-200三步纯化,成功地获得了纯度为95.3%的毒素,SDS-PAGE呈现单一条带,与其对应抗血清有免疫学特异反应,不含核酸、糖和其它肠毒素等物质。与同类方法相比,该方法步骤少、快速、简便。对其体外抗肝癌活性进行了分析,首次证明即使TSST-1的浓度为10^-8g/L仍然对人肝癌细胞有显著抑制作用。  相似文献   
3.
采用RT PCR方法 ,从提取的SA1 1株轮状病毒总RNA中扩增出VP7基因片段 ,进行鉴定后 ,将该片段克隆于真核表达载体pEF1 HisC dhfr,构建成重组质粒pEF1 HisC dhfr VP7,然后用质脂体法转染COS 7细胞 ,进行真核系统的表达 .获得了长 981bp的PCR片段 ,序列分析结果与已知VP7序列相同 .表达后经细胞超声破碎 ,Westernblot检测表达产物 ,在相对分子质量 38× 1 0 3 处有表达条带 ,表达蛋白主要存在于上清中 .因此 ,获得了VP7基因 ,并在COS 7细胞中获得了表达 ,表达蛋白质免疫Balb c小鼠 ,获得了具有特异性结合活性的抗体  相似文献   
4.
采用PCR方法,根据文献报道的人成骨蛋白(osteogenic protein-1,OP-1)成熟肽基因序列,设计并合成一对引物,从构建的含人成骨蛋白基因的质粒中扩增获得大小为420bp的DNA片段,连接到pGEM-T载体进行测序,证明获得人成骨蛋白成熟肽基因片段,并以pPIC9K为表达载体构建重组表达质粒,转化大肠杆菌细胞,经鉴定的阳性重组质粒并线形化,电转化毕氏酵母细胞GS115,于30℃进行甲醇诱导分泌表达,表达产物存在于培养基中,占分泌蛋白的10%.重组表达产物进行Western Blot可以检测到重组表达产物,ELISA检测其具有特异性结合活性.  相似文献   
5.
采用PCR方法,根据献报道的人成骨蛋白-1(OP-1)成熟肽基因序列,设计并合一对引物,从含人成骨蛋白基因的质粒中扩增获得大小的420bp的DNA片段,连接到pGEM-T载体进行测序,证明获得人成骨蛋白成熟肽基因片段,继之以pPIC3.5k为表达载体构建重组表达质粒,并经PCR及酶切鉴定。  相似文献   
6.
利用反转录PCR技术,从U937细胞总RNA中,扩增编码人可溶性CD14的基因序列,构建了重组表达质粒pEF1/HisC/sCD14348aa;用脂质体转染法,实现了在真核细胞中的高效表达;用免疫亲和层析纯化表达产物,纯度达90%以上;LPS刺激U937细胞产生CD14的变化,证明了表达产物具有结合LPS的功能。  相似文献   
7.
澜沧江漫湾电站水库地区爬行动物多样性研究   总被引:2,自引:2,他引:0  
何晓瑞  王忠泽 《四川动物》2000,19(3):123-126
漫湾电站水库地区有爬行动物46种,隶属3目10科37属。特点是:(1)特种多样性很丰富,为中国扑行类种娄11.89%,为云南的30.46%,是云南省和全国爬行类很丰富的地区;(2)东洋界种类占绝对优势(97.83%),没有古北界种类,古北东洋两界广布种仅1种;(3)西南区与华南区种类分别为20及19种;华中区及华中华南两区广布种很少;(5)特有种多,在我国主要产于云南有8种,占17.39%,其中云  相似文献   
8.
澜沧江漫湾电站水库地区两栖动物的考察研究   总被引:5,自引:2,他引:3  
何晓瑞  王忠泽 《四川动物》1999,18(3):119-123
漫湾电站地区共有两栖类2 目8 科18 属38 种。区系特点是: (1) 物种很丰富, 占中国两栖类种数13-62 % , 超过20 个省区, 超过云南红河州, 而与西双版纳相等, 是中国两栖类最丰富的地区之一, 也是云南种类最多的地区;(2) 全部属东洋界种类; (3) 西南区种类占绝对优势, 有26 种, 占68-42% ; (4) 华中区及华中华南种类很少, 共3 种; (5) 锄足蟾科种类特多, 有12 种; (6) 特有种很多, 有漫湾特有7 种, 云南特有16 种,中国特有13 种以上。垂直分布可分为河谷低山带, 海拔800 - 1 500m ; 中山带, 海拔1 500 - 2 200m ; 高山带,2 200 -2 800m ;2 8003 291m 的山顶带。泽蛙、双团棘胸蛙及云南小狭口蛙为本地区优势种。稀有种多, 应加强保护; 红瘰疣螈为国家Ⅱ级保护动物。  相似文献   
9.
几种氨基甲酸酯类杀虫剂对美洲斑潜蝇的防治效果   总被引:2,自引:0,他引:2  
在山东青州以茄子为试验寄主,丁硫克百威10g(a.i.)/667m^2、灭蚜威15g(a.i.)/667m^2、速灭威12.5g(a.i.)/667m^2、扑蚜威12.5g(a.i.)/667m^2对美洲斑潜蝇幼虫药后3~7d校正防效分别为91.13%~91.14%,89.66%~91.66%,89.29%~91.36%,87.82%~88.83%,均具有良好的速效和持效性。在山东青州以西葫芦为试验寄主,间乙威12.5g(a.i.)/667m^2、灭除威15g(a.i.)/667m^2、灭杀威15g(a.i.)/667m^2、间异丙威15g(a.i.)/667m^2对美洲斑潜蝇幼虫药后3~7d校正防效均在80%左右,防效一般。在北京海淀以黄瓜为试验寄主,灭蚜威WP20g(a.i.)/667m^2对美洲斑潜蝇幼虫药后3~11d校正防效为84.93%~85.47%。以不同寄主,杀虫威10g(a.i.)/667m^2对美洲斑潜蝇幼虫药后3~7d校正防效为85%以上。丁硫克百威、速灭威、灭蚜威、扑蚜威、杀虫威均可以作为防治美洲斑潜蝇的有效药剂。  相似文献   
10.
鼠疫耶尔森氏菌LcrV基因的克隆及序列分析   总被引:1,自引:0,他引:1  
为了研究鼠疫耶尔森氏菌(Y.pestis)保护性抗原V蛋白,从基因库中查得Y.pestis LcrV基因DNA序列,针对序列设计合成了一对PCR扩增引物,以本所保存的Y.pestis菌种为模板进行基因扩增,结果获得长约980bp的DNA片段。将扩增产物回收纯化,克隆至pGEM-T载体,构建重组载体pGEN-T/ypV,经过PCR,酶切鉴定,并对pGEM-T/ypV中的V基因片段进行测序,分析测序结果与己知序列相同,表明获得了LcrV基因。  相似文献   
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