tPA突变体在哺乳动物细胞中的表达

利用携带有二氢叶酸还原酶(dhfr)基因的pCI载体,实现tPA突变体(FrGGI)在CHO-dhfr^-细胞中的高效表达,获得高表达细胞株。采用分子克隆常规技术,将去除3’端非蛋白编码区的tPA突变体cDNA与pCI载体连接,构建真核表达载体pCI—tPA;采用阳离子脂质体转染法转染CHO-dhfr^-胞。经酶切及测序鉴定,证明所构建的质粒正确,转染CHO—dhfr细胞后,经过MTX加压筛选,得到了10株表达水平较高的细胞株,其活性可达每106细胞4000U／24h。以上结果为进行tPA突变体工程细胞株的筛选奠定了基础。     

产琼胶酶菌株的筛选及其胞内外酶活的测定

本研究从江蓠、九孔成鲍和硅藻中分离筛选到8株产琼胶酶细菌,测定了它们胞内外琼胶酶的活性。结果表明,不论是胞内酶还是胞外酶,菌株JK333均具有最大的酶活。为对该菌株有更好的了解,我们运用API条带法对它进行了鉴定,结果证明它为Aeromonas trota（温和气单胞菌）。本工作的开展为构建琼胶酶高产工程菌,进而用于海藻资源的深加工及高值化生产提供了基础。     

耐甲氧西林葡萄球菌3种检测方法的实验比较及临床应用

目的 通过对200株临床分离的葡萄球菌耐苯唑西林的检测,比较3种表型检测法的阳性率并对其临床实用性进行评价。方法 采用美国NCCLS 2004年制订的头孢西丁-纸片扩散法、VITEK32微生物鉴定仪检测及苯唑西林盐琼脂法测试mecA介导的葡萄球菌耐药。结果 200株被检测的葡萄球菌中,头孢西丁-纸片扩散法检出耐苯唑西林的阳性率为68％（136／200）;苯唑西林盐琼脂法的阳性率为67．5％（135／200）;VITEK32仪的阳性率为68．5％（137／200）;且耐甲氧西林凝固酶阴性葡萄球菌（MRCNS）的耐药率（86．2％）高于耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（26．23％）。3种检测方法结果经χ^2检测差异无显著性。结论 3种方法操作都简便,但各有优缺点,VITEK32仪器检测葡萄球菌耐笨唑西林费用高,一般小型医院不具备条件;盐琼脂筛选法判读直观,但要掌握好孵育时间;NCCLS2004版的纸片扩散法较经济实用,不仅可检测被检菌是否耐笨唑西林,同时还可获得大环内酯-林可霉素-链阳霉素（MLSB）结果,但是当头孢西丁的判断折点在临界时应当复检,建议与盐琼脂筛选法同步检测。     

兼性厌氧纤维素降解菌的筛选和产酶研究

从我国天津地区堆肥中分离筛选出一株兼性厌氧的纤维素分解细菌D1,初步鉴定为纤维单孢菌(Cellulomonas sp.)。产酶最适碳源为葡萄糖,氮源为复合蛋白胨,酶的最适作用温度和pH值是50℃和6．4,在70℃以下和pH在5．2～8．4里稳定。     

根霉脂肪酶的研究进展

根霉属微生物是脂肪酶的一个重要来源,多种根霉脂肪酶已被分离并鉴定。本文将对根霉脂肪酶的菌种筛选、发酵、纯化、结构、分子生物学研究及应用进行概述。     

利用免疫蛋白质组学方法筛选高效的疫苗

厦门大学利用免疫蛋白质组学发展了一种快速筛选高效候选疫苗的方法。这种方法分为三个步骤：首先用免疫蛋白质组学方法筛选外膜蛋白的主要免疫原;接着,用毒性细菌在接种后激发以从免疫原中找出能够诱导中和性抗体产生的蛋白;最后,通过评估中和能力来筛选候选疫苗。通过质谱分析能够获得候选者的遗传信息以进行进一步的基因克隆。     

基于交叉抚育的雄性根田鼠对异性同胞尿气味的识别

通过交叉抚育建立室内繁殖种群,在断奶后（80日龄）分别取这些供体的新鲜尿气味作刺激物,在行为观察箱中观察和记录雄性根田鼠对雌鼠气味的行为反应,以研究根田鼠同胞识别的化学通讯机制。结果表明：①在不同的发育时期（2～70日龄）,雄性同巢同胞与异巢同胞的体重没有显著差异。②雄性根田鼠对雌性同巢非同胞气味的接近潜伏期显著长于对异巢非同胞的接近潜伏期（P〈0．05）,其对异巢非同胞气味的访问时间和嗅舔时间都显著高于同巢非同胞气味（P〈0．05）。③雄性根田鼠对雌性异巢同胞和异巢非同胞气味的不存在明显偏好。其对两者的接近潜伏期、访问频次、访问时间、嗅舔频次和嗅舔时间等行为响应均无显著差异（P〈0．05）。这些结果表明,80日龄时,雄性根田鼠能够识别熟悉和陌生的无亲属关系雌性尿气味,但不能区分陌生的亲属和非亲属,因此,其异性同胞识别的机制为共生熟悉模式。     

长寿老人源双歧杆菌优良菌株的筛选

以人结肠腺癌细胞系HT-29细胞为试材,对来源于广西巴马百岁以上长寿老人肠道的24株双歧杆菌进行了体外黏附试验。结果发现,双歧杆菌均具有一定的黏附能力,其中TTF、Z2、TZ5和J-1菌株具有较高的黏附能力。进一步对4株初筛双歧杆菌耐胃酸、胆汁酸和合成B族维生素能力的试验发现,双歧杆菌TTF菌株不仅能合成较高的B1、B2、B6、B12等多种B族维生素,而且在pH3．0的条件下处理120min存活率达93．11％,同时在2％胆盐浓度下处理24h有较好的存活,具有显著的综合优势。     

长寿老人源双歧杆菌优良菌株的筛选*

以人结肠腺癌细胞系HT-29细胞为试材,对来源于广西巴马百岁以上长寿老人肠道的24株双歧杆菌进行了体外黏附试验。结果发现,双歧杆菌均具有一定的黏附能力,其中TTF、Z2、TZ5和J-1菌株具有较高的黏附能力。进一步对4株初筛双歧杆菌耐胃酸、胆汁酸和合成B族维生素能力的试验发现,双歧杆菌TTF菌株不仅能合成较高的B1、B2、B6、B12等多种B族维生素,而且在pH 3.0的条件下处理120m in存活率达93.11%,同时在2%胆盐浓度下处理24h有较好的存活,具有显著的综合优势。     

不同水温条件下中华蟾蜍蝌蚪的表型可塑性研究

对中华蟾蜍Bufo gargarizans蝌蚪在不同水温下生长以及变态情况进行了观察,测量了不同发育时期的全长、尾长、体宽,记录了不同温度条件下各时期出现的起始时间和持续时间;比较了不同温度条件下的发育状态,发现高温可以明显加速生长,比对照组提前17天变态.方差分析得出高温下变态前的体长、尾长、体宽、尾高、前肢长都与对照组有明显差异（P＜0.01）,说明高温虽然加速了生长,但也使得变态能量积累不够,体形偏小;21℃时,全长、尾长与对照组差异不显著,其余变量差异显著,说明这个温度下,蝌蚪发育时间充足,积累能量多,趋向于形成较大的个体.这种在水温变化时所呈现出来的表型可塑性有利于适应异质性的环境,急速发育导致的提前变态可以使其避开干旱的危害.但是这种表型可塑性能力也有其局限,推测小个体的成体可能会在生长繁殖中付出代价.