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白蜡虫碱性磷酸酶功能基团的研究 总被引:9,自引:2,他引:9
白蜡ricerus pela雌成虫经匀浆,正丁醇抽提,硫酸铵分段盐析,SephadexG-150凝胶过滤等步骤,得到比活力为136.65U/mg蛋白酶制品,用苯甲基磺酰氟、N-溴代琥珀酰亚胺、三硝基苯磺酸、二巯基苏糖醇、对氯汞苯甲酸、琥珀酸酐、溴乙酸、碘乙酸等化学修饰剂在一定条件下选择修饰白蜡虫碱性磷酸酶的几种氨基酸残基,并测定酶活力变化。结果表明:苯甲基磺酰氟、N-溴代琥珀酰亚胺、三硝基苯磺酸、琥珀酸酐、二巯基苏糖醇的修饰能显著抑制酶的活力,活力的降低与修饰剂的浓度有关,氯汞苯甲酸、溴乙酸、碘乙酸的修饰对酶的抑制作用影响较小。初步认为:丝氨酸、赖氨酸和色氨酸残基是白蜡虫碱性磷酸酶的必需功能基团,部分二硫键也是酶的催化功能所必需的。 相似文献
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硫酸粘菌素对碱性磷酸酶有抑制作用,用Dixon作图求出抑制常数为Ki=4.88×10-6mol/L,抑制类型为非竞争性抑制.通过紫外吸收光谱,发现硫酸粘菌素引起碱性磷酸酶的空间结构发生改变;由荧光光谱变化,发现硫酸粘菌素对碱性磷酸酶有荧光淬灭作用,淬灭机理是因能量转移而引起的静态淬灭. 相似文献
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采用紫外光谱法和荧光光谱法研究了茶碱与胃蛋白酶的结合作用。观测到茶碱使胃蛋白酶的紫外吸收峰增强,特征荧光峰淬灭。Stern-Volmer淬灭曲线显示,茶碱对胃蛋白酶的荧光淬灭很可能是一个单一的静态淬灭过程。 相似文献
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意蜂蜂王浆超氧化物歧化酶的分离纯化及部分性质 总被引:4,自引:0,他引:4
以意蜂Apis mellifera蜂王浆为材料,经过硫酸铵分段盐析,DEAE-Sepharose 柱层析和Sephacryl S-200凝胶过滤,得到纯化的超氧化物歧化酶(SOD),纯化倍数104.00,比活力53.05 U/mg。该SOD经SDS-PAGE显示单一蛋白带。温度对该酶活力的影响较小。Cu、Zn、Fe和Mn等元素含量测定发现该酶只含有Cu和Zn。酶经圆二色谱测定后,其α螺旋、β折叠和无规则卷曲蛋白构型的含量分别为26.1%、53.8%和22.0%。等电聚焦电泳测得酶的等电点为4.69、4.85和5.01。NR/R单向和双向SDS-PAGE表明该酶含有链内二硫键。氨基酸组成分析发现该酶由约402个氨基酸残基组成,其中Asp、Gly、Leu、Ala、Glu和Val的含量较高。脲可抑制SOD活性,并使其紫外光谱发生变化,荧光发射峰强度变小。溴乙酸(BrAc)抑制酶的活力,使其紫外光谱发生变化,荧光发射峰强度变小。二巯基苏糖醇(DTT)使酶的活力发生变化,紫外吸收峰增大,荧光发射峰变小。 相似文献
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研究两种抗生素间甲氧嘧啶和蒽诺沙星对酸性磷酸酶活性的影响,发现两种抗生素都对酶有抑制作用。利用双倒数作图法表明两种抗生素对酶的抑制作用为非竞争抑制,Dixon作图法求得Ki值分别为0.35和0.4 mmol/L。采用紫外差光谱和荧光光谱研究甲氧嘧啶和蒽诺沙星与酸性磷酸酶的相互作用,结果显示间甲氧嘧啶和蒽诺沙星使酶的紫外吸收增强,荧光强度减弱,其中蒽诺沙星使酶的荧光光谱产生红移。说明这两种抗生素对酶的构象有不同程度的影响。 相似文献
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不同剂量乳源活性肽与2头份猪瘟活疫苗同时分点肌肉注射仔猪,每周一次耳静脉采血,间接ELISA法检测抗猪瘟病毒抗体IgG、IgA和IgM水平.发现乳源活性肽能够明显提高抗猪瘟病毒抗体水平.当乳源活性肽为15 g/L时,与对照组相比,IgG抗体水平在注射后28 d时提高了21.0%,IgA和IgM抗体水平在注射后14 d时分别提高了13.8%和7.8%.实验组腹泻率、发病率和死亡率明显比对照组低,同时发现乳源活性肽具有促进生长的作用. 相似文献
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小檗碱与胰蛋白酶的相互作用 总被引:1,自引:1,他引:0
小檗碱对胰蛋白酶有抑制作用.应用紫外光谱和荧光光谱进一步研究发现小檗碱使胰蛋白酶的紫外吸收光谱发生改变,特征荧光峰产生静态淬灭.据Forster非辐射能量转移理论,在20和37℃时,测定了小檗碱-胰蛋白酶间的结合常数和结合位点数,确定了作用力主要为疏水作用力. 相似文献