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目的:优化2,6-二氯靛酚钠滴定法和高效液相色谱法检测维生素C含量操作规范性及适用性。方法:对检测条件的设置、试剂及样液的保存时间、提取剂及浓度的选择、提取过程、脱色剂用量及2种检测方法的精密度、重复性和加标回收率等关键影响因素进行比较。结果:高效液相色谱法检测设置C18(5μm,4.6×250mm)色谱柱,0.1%草酸为流动相,流速1mL/min,柱温30℃,检测波长254nm,所得图谱保留时间适宜,峰形良好,维生素C标准液浓度在0.025~0.3mg/mL范围内线性关系良好,回归方程为:y=46 116x+173.26,R2为0.999 2;维生素C标准液在4~6℃保存下48h内可用、2,6-二氯靛酚钠溶液在4~6℃保存下应在12d内使用,待测液制备完成后应立即测定,若无法立即测定,可于4~6℃冰箱中保存1.5h;2%草酸为提取剂效果最佳,样品加提取液匀浆后迅速定容、过滤和检测,不可久置;使用2,6-二氯靛酚钠滴定法时需添加0.4g/30mL的活性炭进行脱色;精密度、重复性及加标回收率均符合测定要求。结论:2种检测方法都适用于深色果蔬维生素C含量检测,各有特点,可根据测定要求及实际条件选择适宜的方法。 相似文献
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硫酸软骨素是生物界广泛存在的酸性粘多糖,广泛存在于动物的器官软骨。以猪器官软骨为原料,采用碱提取和酶解相结合的方法提取硫酸软骨素,利用正交实验对碱提取过程中的温度,碱浓度以及提取时间等三个关键因素进行优化,并对硫酸软骨素成品的相关指标进行检测。正交实验结果表明,最佳的碱提取条件为:温度40℃、提取时间8h、碱提取浓度为0.15g/mL。在此条件下获得的碱提取液,通过酶解、脱色、醇沉、干燥,得到白色硫酸软骨素成品,总得率为20%,各项指标均符合国家部颁标准,达到出口要求。 相似文献
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硫酸软骨素(chondroitin sulfate,CS)是一种线性多糖,广泛应用于医疗和保健等领域。相比于传统动物组织提取法,微生物合成硫酸软骨素具有可控、易规模化放大等优势。为实现硫酸软骨素A(CSA)的高效合成,本研究首先通过整合软骨素合酶编码基因kfoC、kfoA以及UDP-葡萄糖脱氢酶编码基因tuaD至毕赤酵母GS115基因组中,构建了以甘油为唯一碳源发酵生产软骨素的毕赤酵母工程菌株。通过进一步优化软骨素合成途径,软骨素分批补料发酵水平达到2.6 g/L。在进一步整合表达软骨素-4-O-磺基转移酶的基础上,本研究通过向生产软骨素毕赤酵母工程菌株破碎液中添加3′-磷酸腺苷-5′-磷酰硫酸和软骨素-4-O-磺基转移酶,成功建立了CSA的一锅法生物合成体系。通过优化,最终实现0-40%不同磺酸化水平CSA的可控合成。本研究中CSA的一锅法生物合成体系操作简便、易放大,更适用于工业化大规模生产。本研究结果也为肝素等其他糖胺聚糖的合成提供了思路。 相似文献
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利用高效液相凝胶色谱法对荧光假单胞菌所产铁载体进行了分析,结果显示高产铁载体P.fluorescens sp-f与P.fluorescens AB92001均可分泌3种铁载体,其中具有荧光的pyoverdine容易被细胞外的铁抑制。高效液相凝胶色谱法适用于假单胞菌铁载体的分析检测。 相似文献
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采用酶解和离子交换色谱的方法,从兔、鸡、猪和羊肝组织中提取和纯化得到了糖胺聚糖(GAGs).通过比较透明质酸(HA)、硫酸软骨素A(CS-A)、硫酸软骨素C(CS-C)、硫酸皮肤素(DS)、肝素(HP)、硫酸乙酰肝素(HS)等标准品在醋酸钡、醋酸锌、吡啶-甲酸等几种不同缓冲体系下的醋酸纤维素薄膜电泳行为,结合灰度积分建立了适合于微量GAGs定性和定量分析的电泳方法.将从不同动物肝脏组织中提取的GAGs运用该方法进行分析,发现 不同动物肝脏组织中,GAG含量和组成均有较大差异:羊肝中GAGs含量最高(0.52 mg/g 组织干粉),种类也最丰富,含有HA、HS、DS和CS,其中HA所占比例最高;鸡肝中GAGs含量最少(0.18 mg/g组织干粉),主要含有HA和DS;兔肝GAGs种类与猪肝相似,均含有HA、HS和DS,但HS是猪肝GAGs的主要成分,DS是兔肝GAGs的主要成分. 相似文献
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目的:建立聚乙二醇化天花粉蛋白纯度的检测方法。方法:使用分子筛色谱法和反相高效液相色谱法测定了聚乙二醇天花粉蛋白。结果:聚乙二醇天花粉蛋白纯度分别为100%和98.14%。结论:高效液相色谱法简单易行、准确、灵敏度高,适用于聚乙二醇化天花粉蛋白纯度检测。 相似文献
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为研究复合酶预处理法对银杏叶总萜内酯浸出率的影响。本文采用单因素实验对银杏叶酶解预处理过程中的酶种类、酶用量、酶解时间、酶解温度、p H值五个关键因素进行探索,酶解后用20%乙醇-水溶液对银杏叶酶解液进行回流提取,LX-5型大孔吸附树脂对提取液进行纯化,浓缩干燥得银杏叶提取物产品。高效液相色谱法检测其总萜内酯含量。结果表明,银杏叶酶解预处理法的最佳工艺为:复合酶(纤维素酶∶果胶酶=1∶1),用量为银杏叶的1/300、酶解时间4.0 h、酶解温度50℃、初始p H值4.0。在该工艺条件下获得的银杏叶总萜内酯提取率为0.55%,银杏叶提取物中总萜内酯含量为8.96%,高于银杏叶提取物国际商务标准(总内酯含量≥6%)。说明复合酶预处理条件下银杏叶总萜内酯提取率高,研究为工业化生产高质量银杏叶提取物提供了理论依据。 相似文献
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《中国野生植物资源》2017,(6)
依次采用水提醇沉及十六烷基三甲基溴胺盐(CTAB)沉淀法得到香水莲花酸性多糖(ADT),利用萄聚糖凝胶Sephadex G-150进行柱层析,得到了主要组分ADT-Ⅱ,高效凝胶色谱法测定其分子量为2.758×105Da;ADT-Ⅱ的酸水解产物经过薄层层析、高效液相色谱法、13CNMR分析,结果表明ADT-Ⅱ的单糖组成是以甲酯化的半乳糖醛酸为主,同时还含有少量的半乳糖和甘露糖。 相似文献
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目的:建立群多普利(Trandolapril)原料药含量测定方法。方法:含量检查方法采用苯基柱Ph-3(Inertsil,250mm*4.6mm,5u),选用乙腈-水(0.02mol/L磷酸二氢钾,磷酸调pH至2.7)(48:52)作流动相,检测波长220nm。含量测定采用酸碱滴定法和高效液相色谱法。结果:在建立的色谱条件下,各种降解产物均能与群多普利主峰分开,方法专属性强,滴定法与HPLC法含量测定结果无显著性差异。结论:建立得HPLC方法可用来对群多普利原料药进行含量测定,由于本品属于原料药,最终含量测定方法采用滴定法。 相似文献
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狭叶红景天愈伤组织中红景天甙含量及相关代谢酶活力的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
室温下分别对狭叶红景天的茎和叶进行愈伤组织诱导,在24C和4C进行继代培养,测定其苯丙氨酸解氨酶、肉桂酸-4羟化酶和酪氨酸解氨酶的活性,并利用高效液相色谱法测定其红景天甙含量。结果表明:培养温度和愈伤组织的外植体来源均影响红景天甙的含量和3种代谢酶的酶活力;在24C和4C温度条件下,相同外植体来源的愈伤组织叶中和相同培养温度条件下的茎和叶2种不同来源外植体的愈伤组织中,红景天甙含量和3种代谢酶活力之间均存在显著性差异。 相似文献
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目的:选择一种能准确测定天可力氨糖胶囊中氨基葡萄糖硫酸钾含量的方法。方法:参照GB/T 20365-2006硫酸软骨素和盐酸氨基葡萄糖含量的方法进行液相色谱法测定以及利用盐酸氨基葡萄糖Fdson—Morgan反应后在525 nm左右波长处有吸收峰,测定其吸收值与标准品比较进行比色定量。结果:液相色谱法测定时胶囊中的其它中药成分干扰很大,数据偏差太大;而比色法测定时,氨基葡萄糖盐酸盐含量在175μg/mL浓度范围内,呈良好线性关系:Y(μg/mL)=0.196X-O.004,R=0.997,平均回收率102.09%。结论:该比色法测定方法灵敏、准确、简便,可供天可力氨糖胶囊中氨基葡萄糖硫酸钾含量测定。 相似文献
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黄鳝骨硫酸软骨素提取纯化的初步研究 总被引:1,自引:0,他引:1
在稀碱-酶解提取基础上,辅以超声波破碎从黄鳝(Monopterus albus)骨中提取硫酸软骨素(Chondroitin Sulfate,CHS)。比较了三氯乙酸(TCA)法、Sevag法和等电点法除蛋白的效果,并进行了多糖的乙醇分级沉淀实验;粗品经离子交换树脂(CM22)和透析膜(3500Da)透析进一步分离纯化。研究结果表明酶解后用TCA法除蛋白效果好,再加入除蛋白液2倍体积95%乙醇可使大部分CHS沉淀析出;精制品经鉴定含有硫酸基,CHS含量达92.31%;琼脂糖凝胶电泳和红外吸收光谱结果显示精制品与标准CHS相似,初步确定提取物为CHS类多糖。 相似文献
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通过内源和外源芥子酶酶解硫代葡萄糖苷产生的葡萄糖的测定,间接测出西兰花中β-硫代葡萄糖苷总量,并对测定的影响因素进行了研究,与吡啶滴定法对比实验表明,该法准确可靠,操作简便。 相似文献
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丙谷胺是一种胃泌素拮抗剂,其含量测定方法《中国药典》2000年版二部及《中国药典》2005年版二部采用的是滴定法,本文试用高效液相色谱法(HPLC法)测定其含量,此法操作简便,重现性好,结果准确可靠。 相似文献