Smads分子及其介导的TGF—β超家族信号转导

ＴＧＦ－β超家族成员的重要生物学功能正日益引起人们的重视,该家族受体也在不断被克隆鉴定。配体通过受体的胞内信号转导研究近年有较大进展,特别是Ｍａｄ及相关蛋白Ｓｍａｄｓ的发现,为阐明ＴＧＦ－β超家族作用机理提供了一条重要线索：Ｓｍａｄｓ蛋白位于细胞浆,被受体激酶直接磷酸化后形成异源聚合体,转移至核内,激活靶基因转录。     

细胞调节网上资源

ＴＧＦ β信号转导1　ＴＧＦ β的信号通路ｈｔｔｐ : ｗｗｗ .ｇｒｔ.ｋｙｕｓｈｕ ｕ .ａｃ.ｊｐ ｅｎｙ ｄｏｃ ｐａｔｈｗａｙ ｔｇｆ ｂｅ ｔａ .ｈｔｍｌ该站点提供了一个可点击的ＴＧＦ β信号通路图 ,它是信号通路数据库 (ＳＰＡＤ)站点的一部分。2　ＴＧＦ β信号转导动画ｈｔｔ: ａｎａ30 .ｍｅｄ .ｕｔｏｔｏｒｏｎｔｏ .ｃａ ｍｏｖｉｅ .ｈｔｍ这是由Ａｔｔｉｓａｎｏ和Ｗｒａｎａ实验室制作的动画电影。并有包括通过ＴＧＦ β信号信号转导在内的多种情况的可操作模型的详细描述。值得访问 !ＭＡＰＫ信号通路3　ＭＡＰＫ信号…     

转化生长因子-β对整合蛋白表达与活性的调节

转化生长因子 β(ＴＧＦ β)是一类多功能肽类生长因子 ,具有特异的受体及信号转导系统 ,在控制细胞生长、分化、凋亡等方面均起重要作用。已经发现ＴＧＦ β通过细胞内信号转导分子Ｓｍａｄｓ调控各种基因的表达 ,从而在控制细胞外基质蛋白及细胞表面整合蛋白的合成中起重要作用[1] 。整合蛋白是一类存在于细胞表面的跨膜粘附分子 ,主要介导细胞与细胞外基质 (ＥＣＭ)及细胞与细胞之间的粘附作用。整合蛋白由α和 β两种亚基以异源二聚体的形式组成二十余种不同的受体 ,现已证实在伤口愈合、炎症反应、血栓形成、肿瘤发生以及迁移等许多过…     

TGF—β家族的细胞信号转导

转化生长因子β（ＴＧＦ－β）家族成员与各自的膜受体结合后,使通路限制性（ｐａｔｈｗａｙ－ｒｅｓｔｒｉｃｔｅｄ）ＳＭＡＤｓ磷酸化,后者再与Ｓｍａｄ４形成杂聚体并转位至细胞核,调节一些基因的转录而产生生物学效应。抑制性ＳＭＡＤｓ可阻断通路限制性ＳＭＡＤｓ的磷酸化。     

IFN-γ/STAT通路抑制TGF-β/SMAD信号转导

ＴＧＦ－β和ＩＦＮ－γ对各种细胞功能有相反的作用,但是此拮抗作用的基础不清楚。ＴＧＦ－β信号转导是通过受体丝氨酸激酶磷酸化并激活转录因子Ｓｍａｄ２和Ｓｍａｄ３实现的,而ＩＦＮ－γ受体及其结合的蛋白质酪氨酸激酶Ｊａｋ１能介导Ｓｔａｔ１的磷酸化和活化。最...     

TGF—β家族信号的细胞内传导蛋白：MAD蛋白家族

ＳＭＡＤｓ是新近发现的参与ＴＧＦ－β超家族的信号在细胞内声望地的一族蛋白,包括８个成员,分别称ＳＭＡＤ１－８。ＳＭＡＤ１、２、３、５和８属于一类,它们被ＴＧＦ－β的受体或ＢＭＰ的受体激活而磷酸化,称为受体调节ＳＭＡＤ,传导下ＴＧＦ－β或ＢＭＰ的信号。ＳＭＡＤ６和７属于另一类,它们抑制制受体调节ＳＭＡＤ的信号传导。ＳＭＡＤ４是第三类,它是受体调节ＳＭＡＤ传导信号的伴侣。受体调节ＳＭＡＤ传导信号必须先     

SMAD3与细胞周期蛋折CyclinB的相互作用

ＳＡＭＤｓ是ＴＧＦβ家族的细胞内信号介导。为了研究ＳＭＡＤ３的信号传递过程,我们以ＳＡＭＤ３为诱饵蛋白用酵母双杂交系统筛选与ＳＡＭＤ３相互作用的蛋白,发现Ｃｙｃｌｉｎ Ｂ可以与ＳＭＡＤ３发生相互作用,并在ＣＯＳ７细胞中证实了该相互作用。提示ＴＧＦβ可能通过ＳＭＡＤｓ与细胞周期素的相互作用来调节细胞周期的变化。     

SDF1—CXCR4轴的新作用

基质衍生因子 1 (ｓｔｒｏｍａｌｄｅｒｉｖｅｄｆａｃｔｏｒ 1 ,ＳＤＦ1 )是ＣＸＣ家族趋化蛋白 ,1 988年由日本学者Ｎｉｓｈｉｋａｗａ等[1] 首先克隆发现 ,其受体为ＣＸＣＲ4,属Ｇ蛋白偶联受体家族。ＳＤＦ1与ＣＸＣＲ4作用 ,构成ＳＤＦ 1 ＣＸＣＲ4反应轴 ,转导特定的信号、介导不同的效应。过去认为 ,ＳＤＦ1 ＣＸＣＲ4轴介导的效应主要包括参与胚胎、血管、心脏形成以及Ｂ细胞生成等生理过程 ,与炎症反应无关。近年来的研究报告显示ＳＤＦ1 ＣＸＣＲ4轴在多种状态下发挥独特作用 :介导炎症细胞跨膜迁移、对Ｔ淋巴细胞增殖起共刺激…     

Rho蛋白

常见的异源三聚体ＧＴＰ结合蛋白 ,是通过其 (亚基在无活性的ＧＤＰ结合状态和有活性的ＧＴＰ结合状态之间的转换来完成对膜相关受体传来的信号反应 ,而与之同样起“分子开关”作用的另一类小分子Ｇ蛋白 (ｓｍａｌｌＧｐｒｏｔｅｉｎ ,又称ＧＴＰａｓｅ ,即ＧＴＰ酶 ) ,它们的激活不是直接通过与激动型的Ｇ蛋白偶联受体 (Ｇｐｒｏｔｅｉｎ ｃｏｕｐｌｅｄｒｅｃｅｐｔｏｒ,ＧＰＣＲ)相互作用而调节其活性 ,而是通过鸟嘌呤核苷交换因子(ｇｕａｎｉｎｅｎｕｃｌｅｏｔｉｄｅｅｘｃｈａｎｇｅｆａｃｔｏｒ,ＧＥＦ)来控制这类小分子Ｇ蛋白的ＧＴ…     

可溶性55kD人肿瘤坏死因子受体(shTNFR55)在变铅青链霉菌中的分泌表达

从 Ｈｅ Ｌａ 细胞中提取总 Ｒ Ｎ Ａ,采用反转录 Ｐ Ｃ Ｒ 技术,从该总 Ｒ Ｎ Ａ 中扩增了约 ５３０ ｂｐ 的ｓｈ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ５５ 基因的 ｃ Ｄ Ｎ Ａ,并克隆至质粒 ｐ Ｕ Ｃ ｍ ｅｌ中酪蛋白酶 ｍ ｅｌ Ｃｌ 分泌信号肽编码序列的下游,构建成含融合基因 ｍ ｅｌ／ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ 的重组质粒 ｐ Ｕ Ｃ ｍ ｅｌ／ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ．把融合基因 ｍ ｅｌ／ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ 插入链霉菌表达质粒 ｐ Ｉ Ｊ４５９ 的多克隆位点,使之位于 ｅｒｍ 强启动子的下游,得到重组表达质粒 ｐ Ｉ Ｊ４５９ ｍ ｅｌ／ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ．经 Ｓｏｕｔｈｅｒｎ 杂交证明重组质粒 ｐ Ｉ Ｊ４５９ ｍ ｅｌ／ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ 插入了 ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ５５ 基因片段．对重组菌株 Ｓｔｒｅｐｔｏｍ ｙｃｅｓ ｌｉｖｉｄａｎｓ（ｐ Ｉ Ｊ４５９ ｍ ｅｌ／ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ）的发酵液进行 Ｓ Ｄ Ｓ Ｐ Ａ Ｇ Ｅ、受体配基杂交（ Ｌｉｇａｎｄ ｂｌｏｔ）分析、对 Ｔ Ｎ Ｆ 敏感的 Ｌ９２９ 细胞的细胞毒性中和试验表明,可溶性肿瘤坏死因子受体 ｓ Ｔ Ｎ Ｆ Ｒ５５ 在链霉菌中得到了分泌表达,表达产物具有生物学活性．表达产物的分子量约在 ２６～２８ ｋ Ｄ 之间．     

转化生长因子－β（TGF－β）受体及其信号传递

转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）受体及其信号传递虞冠华,葛锡锐,姚（中国科学院上海细胞生物学研究所上海２０００３１）转化生长因子－β（ＴｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ－β,ＴＧＦ－β）是具有多种生物学功能的细胞生长因子,其信号通过细胞表...     

生物技术文献与专利统计(1999年度)

类别文献(篇数)专利(件数)ＡＧＥＮＥＴＩＣＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧＡＮＤＦＥＲＭＥＮＴＡＴＩＯＮＡ1ＮｕｃｌｅｉｃＡｃｉｄＴｅｃｈｎｏｌｏｇｙ20574151Ａ2Ｆｅｒｍｅｎｔａｔｉｏｎ1326498ＢＥＮＧＩＮＥＥＲＩＮＧＢ1ＢｉｏｃｈｅｍｉｃａｌＥｎｇｉｎｅｅｒｉｎｇ432131ＣＡＮＡＬＹＳＩＳＣ1ＳｅｎｓｏｒｓａｎｄＡｎａｌｙｓｉｓ11293ＤＰＨＡＲＭＡＣＥＵＴＩＣＡＬＳＤ1....     

用酵母双杂交系统研究Smad3和Smad4的相互作用

Ｓｍ ａｄ３ 和 Ｓｍ ａｄ４ 是将 Ｔ Ｇ Ｆ β的信号从细胞外传递到细胞核内的重要的信号传导蛋白． Ｔ Ｇ Ｆ β与其受体结合后,激活受体的磷酸激酶,使 Ｓｍ ａｄ３ 发生磷酸化,活化的 Ｓｍ ａｄ３ 与 Ｓｍ ａｄ４ 结合,形成异源复合物,进入到核中．然后 Ｓｍ ａｄ４ 以 Ｄ Ｎ Ａ 结合蛋白的形式与特定的 Ｄ Ｎ Ａ 结合,将 Ｔ Ｇ Ｆ β的信号传到核内．激活转录,诱导背中胚层的形成,抑制细胞的分化等．经研究利用酵母双杂交试验,鉴定了 Ｓｍ ａｄ３ 和 Ｓｍ ａｄ４ 相互作用的功能区域．构建 Ｓｍ ａｄ３ 和 Ｓｍ ａｄ４ 的 Ｃ 端、 Ｎ 端和中间连接区的突变体,将这些突变体克隆到 ｐ Ｇ Ａ Ｄ４２４ 和 ｐ Ｇ Ｂ Ｔ９ 载体中,并转化到 Ｈ Ｆ７ Ｃ 酵母中．通过 Ｌｅｕ－ ／ Ｔｒｐ－ ／ Ｈｉｓ－ Ｓ Ｄ 平板上菌落的形成,和 Ｘ－ ｇａｌ显色反应鉴定转化到酵母中的两个克隆质粒的相互作用．结果显示 Ｓｍ ａｄ４ 与 Ｓｍ ａｄ３ 异源相五作用时,主要是通过 Ｓｍ ａｄ４ 的中间连接区．在同源作用时, Ｓｍ ａｄ３ 是通过 Ｃ 端,而 Ｓｍ ａｄ４ 是通过中间连接区进行的．     

人肿瘤坏死因子可溶性受体I与人IgG：Fc的融合基因的构建及其在大？…

采用ＰＣＲ方法引入编码氨基酸残基序列为ＧＧＧＧＳＧＧＧＧＳ的镜头,将ｓＴＮＦＲ１ ｃＤＮＡ与人ＩｇＧ：Ｆｃ ｃＤＮＡ片段连接,构成融合基因ｆｕｓｉｏｎ １。将ｆｕｓｉｏｎ １克隆在ｐＢＳⅡ ＳＫ＾＋载体上。测定序列后,转入ｐＲＳＥＴ－Ｂ表达载体,在大肠杆菌中表达,得到分子量为４５ｋＤａ的蛋白,超声破碎后电泳证明表达的蛋白为包涵体,经免疫蛋白印迹证实为我们构建的融合蛋白。     

粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子受体α链（GM-CSFRα）的克隆与表达

ＧＭ-ＣＳＦ高亲和力受体至少由两条链组成,低亲和力的α链及无结合力活性的β链。本文采用ＲＴ-ＰＣＲ的方法,从ＧＭ-ＣＳＦ依赖细胞株ＴＦ-１中克隆了全长的ＧＭ-ＣＳＦＲα链Ｃｄｎａ（包括信号肽部分）,经酶切及全基因测序鉴定,并分别在原核及真核细胞表达系统中表达。在大肠杆菌中ＧＭ-ＣＳＦＲα以ＧＳＴ融合蛋白形式表达,谷胱甘肽Ｓｅｐｈａｒｏｓｅ４Ｂ亲和层析纯化融合蛋白。ＧＳＴＣＳＦＲαＣ无受体活性,推测主要与缺乏翻译后修饰有关。将全基因克隆入真核表达载体Ｐｓｖｌ中,转染ＣＯＳ-７细胞瞬时表达以重建ＧＭ-ＣＳＦ的低亲和力受体,１２５ＩＧＭ-ＣＳＦ平衡结合实验证明转染后的ＣＯＳ-７细胞膜上有受体的表达,Ｃｒｏｓｓｌｉｎｋｉｎｇ显示表达的受体α链分子量略低于ＴＦ-１细胞。胞外区基因（ＣＳＦＲαＢ）克隆入Ｐｓｖｌ构建的Ｐｓｖｌ／ＣＳＦＲαＢ表达载体,转染ＣＯＳ-７细胞后,Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ检测表达细胞上清,有单一的反应带,表达上清有ＧＭ-ＣＳＦ的受体活性。     

GRO家族:与细胞生长相关的趋化因子

ＲＯ(ｇｒｏｗｔｈ ｒｅｌａｔｅｄｏｎｃｏｇｅｎｅ)家族是一类属于ＣＸＣ族的趋化因子 ,包括ＧＲＯα、ＧＲＯβ、ＧＲＯγ ,系统命名为ＣＸＣＬ1、ＣＸＣＬ2、ＣＸＣＬ3。1 987年分离并测序了ＧＲＯｃＤＮＡ ,并推测其表达与细胞生长相关 ,类似于ｃ ｆｏｓ原癌基因 ,因此而得名为ＧＲＯ。因ＧＲＯ可如丝裂原样刺激黑色素瘤细胞生长 ,曾被称为ＭＧＳＡ(ｍｅｌａｎｏｍａｇｒｏｗｔｈｓｔｉｍｕｌａｔｏｒｙａｃｔｉｖｉｔｙ)。小鼠的相对应基因为ＫＣ ,发现于ＣＯＳ细胞 ,是ＰＤＧＦ(ｐｌａｔｅｌｅｔ ｄｅｒｉｖｅｄｇｒｏｗｔｈｆａｃｔ…     

TGF—β超家族信号传导机制研究进展

ＴＧＦ－β超家族由一大类具有共同生物学特性的细胞因子所组成,在生长控制、物质代谢等方面均有极其重要的作用。它们与Ⅱ型受体和Ⅰ型受体形成异在聚体复合物后激活Ⅰ型受体,然后通过被称为ＳＭＡＤ蛋白的信号蛋白,将信号从细胞浆转导到细胞核中。     

抗真菌蛋白Rs—AFPs基因在大肠杆菌中的表达

将抗真菌蛋白Ｒｓ－ＡＦＰ１和Ｒｓ－ＡＦＰ２全长ｃＤＮＡ插入表达质粒ｐＥＴ－２２ｂ／ＮｃｏＩ＋ＳａｃＩ位点,构建成融合蛋白表达载体ｐＲＡＦ１和ｐＲＡＦ２．将不含信号肽编码序列的Ｒｓ－ＡＦＰ１和Ｒｓ－ＡＦＰ２ｃＤＮＡ分别插入ｐＥＴ－２２ｂ／Ｎｃｏｌ＋Ｓａｃｌ和ｐＥＴ－２２ｂ／Ｎｄｅｌ＋ＳａｃＩ位点,构建成不含信号肽序列的融合蛋白表达载体ｐＲＡＦ３、ｐＲＡＦ４和非融合蛋白表达载体ｐＲＡＦ５和ｐＲＡＦ６．将构建的上述各种表达载体转化Ｅ．ｃｏｌｉＢＬ２１,挑菌落培养,ＩＰＴＧ诱导,使Ｒｓ－ＡＦＰｓ基因得到表达,并用体外抑菌试验检测表达产物的活性,结果表明,各种表达载体的表达产物均具有不同程度的抑菌活性,其中,ｐＲＡＦ３和ｐＲＡＦ４表达产物的抑菌活性较明显．     

人主动脉硫酸乙酰肝素蛋白聚糖对培养的人血管壁细胞生长的作用

通过培养的人主动脉平滑肌细胞（ｈＡＳＭＣ）及脐静脉内皮细胞（ｈＵＶＥＣ）,应用３Ｈ－ＴｄＲ参入、Ｎｏｒｔｈｅｒｎｂｌｏｔ分析、逆转录多聚酶链反应（ＲＴ－ＰＣＲ）、放射免疫分析（ＲＩＡ）、和紫外比色法等技术观察了人主动脉中硫酸乙酰肝素蛋白聚糖（ＨＳＰＧ）对ｈＡＳＭＣ和ｈＵＶＥＣＤＮＡ合成的作用及对血小板源生长因子（ＰＤＧＦ）、ＰＤＧＦ受体、转化生长因子β（ＴＧＦ－β）、内皮素－１（ＥＴ－１）或碱性成纤维细胞生长因子（ｂＦＧＦ）基因表达和肾素－血管紧张系统（ＲＡＳ）的影响,结果显示,ＨＳＰＧ明显抑制培养的ｈＡＳＭＣ基础的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：１０３８５±３２６３ｖｓ,２５５４１±６４２１,Ｐ＜０．０１）及外源性ＰＤＧＦ诱导的ＤＮＡ合成（ｃｐｍ值为：９８７８±１９４７ｖｓ．１３４８１±４４ｌ０,Ｐ＜０．０５）;抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－Ｂｐ和ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,提高ＰＤＧＦａ和β受体ｍＲＮＡ的表达;显著降低ｈＡＳＭＣ培养液中血管紧张素Ⅱ（ＡｎｇⅡ）的浓度和血管紧张素转换酶（ＡＣＥ）的活性,推测ＨＳＰＧ抑制ＰＤＧＦＡ链、ＴＧＦ－β及ＥＴ－１ｍＲＮＡ表达,降低ＡＣＥ活性及ＡｎｇⅡ浓度是其抑制ｈＡＳＭＣ增殖的重要机     

芸苔属植物S受体蛋白激酶的研究

植物的发育过程中信号传导离不开接受信号的受体。受体是靶细胞接受信号或对其作出初步反应的一些特殊蛋白质。主要是细胞表面受体 ,是一类跨膜蛋白质 ,根据其结构和作用方式可分为三大类 :离子通道关联受体、Ｇ蛋白关联受体、酶联受体。酶联受体蛋白本身就是一种酶与酶相联系 ,通常是蛋白质激酶 ,可以使细胞内一些蛋白质磷酸化。在植物自交不亲和 (Ｓｅｌｆ-ｉｎｃｏｍｐａｔｉｂｉｌｉｔｙ ,ＳＩ)反应中 ,有一种重要参与物质 ,称为Ｓ受体蛋白激酶 (Ｓｒｅｃｅｐｔｏｒｋｉｎａｓｅ,ＳＲＫ)就属于酶联受体。自交不亲和现象在芸苔属 (Ｂｒａ…