重组人白细胞介素－2在离子色谱分离时的复性

采用ＨＰＩＥＣ应用ＣＭ交换柱分离纯化Ｅ．ｃｏｌｉ工程菌表达的ｒＩＬ－２,与空气氧化复性相比较,又有１倍以上的变性ｒＩＬ－２在色谱过程中得到复性,且溶液ｐＨ影响ｒＩＬ－２的复性和纯化效果：ｐＨ７．０时ｒＩＬ－２复性率高于ｐＨ８．０时,但纯度明显低于ｐＨ８．０时分离的ｒＩＬ－２．     

重组白细胞介素-2纯化过程中影响活性的因素探讨

<正> 白细胞介素-2(Interleukin-2,IL-2)是一种重要的免疫调节剂,具有促进T细胞增殖和分化,调节NK细胞活性,诱导LAK等功能,在肿瘤治疗上有广泛的应用前景。我们的前文就重组菌中IL-2包含体的制备、性质及重组rIL-2的纯化进行了研究,本文就重组rIL-2纯化过程中影响其活性的有关因素进行了探讨。     

大肠杆菌表达的重组白细胞介素-2的初步纯化

本文对大肠杆菌表达产生的重组白细胞介素-2进行了纯化研究。通过比较两种方法制备的rIL-2包含体的纯度,发现用4mol/L脲溶解可溶性细菌蛋白后可使rIL-2包含体纯度达70％;在高浓度变性剂条件下进行凝胶过滤,解决了rIL-2易聚合的问题;结合透析,利用空气氧化形成高活性氧化型rIL-2;经SephadexG-100凝胶过滤,DEAE离子交换等步骤纯化,得到了均一性rIL-2,纯度达98％,比活达4.3×10~6u/mg蛋白,得率为30.8％。     

MTT法快速测定TNF活性

肿瘤坏死因子(TNF)能特异地杀伤肿瘤细胞,对正常组织无明显的毒性作用,因而受到人们的普遍关注。近年来的研究发现,TNF还具有抗病毒、兔疫调节、伤口愈合等作用,同时临床研究也表明,体内TNF量异常与肿瘤、感染、自身免疫等均有关系。因此,建立一个简易、快速、稳定的TNF检测方法对基础理论的研究,尤其是临床上的普及应用是非常必须的。     

转化生长因子-β1对前单核白血病细胞系THP-1的分化诱导作用

本文研究了重组人转化生长因子-β1对前单核白血病细胞系THP-1细胞增殖抑制作用和分化诱导作用。细胞染色计数和~3H-TdR掺入数据表明,在0.078—1.25 ng/ml浓度范围内,rhTGF-β1剂量与增殖抑制呈正相关。在抑制细胞增殖的同时,rhTGF-β1诱导细胞分化,诱导体系中细胞形态和生长方式均发生明显变化,细胞转为贴壁生长,表现出Mφ的细胞形态。α-醋酸萘酚酯酶、硝基蓝四唑还原、细胞吞噬试验均表明细胞具有Mφ的生物功能。电镜观察显示分化细胞具有典型的巨噬细胞样细胞形态,胞内出现Mφ所特有的亚细胞结构初级溶酶体和次级溶酶体。另外,TGF-β特异性中和单抗TB 21对实验体系THP-1细胞分化的阻断证明,THP-1细胞的分化确为rhTGF-β1诱导所致。     

人转化生长因子β1cDNA在COS—7细胞中的表达

在测定了ＴＧＦβ１全长序列的基础上,构建了两个ＴＧＦβ１的表达载达ｐＣＭＶβ和ｐＳＶＬβ;分别从转录水平和翻译水平检测了这两个载本在ＣＯＳ－７细胞中的表达。同时利用ＣＯＳ－７短暂表达系统,建立了ＴＧＦβ１的生物测活法;并分别研究了上清收获时间、表达载体、转染方法对ＴＧＦβ１表达的影响。     

转化生长因子－β（TGF－β）受体及其信号传递

转化生长因子－β（ＴＧＦ－β）受体及其信号传递虞冠华,葛锡锐,姚（中国科学院上海细胞生物学研究所上海２０００３１）转化生长因子－β（ＴｒａｎｓｆｏｒｍｉｎｇＧｒｏｗｔｈＦａｃｔｏｒ－β,ＴＧＦ－β）是具有多种生物学功能的细胞生长因子,其信号通过细胞表...     

转化生长因子—β（TGF—β）的结构

1978年,Delarco和Todar首先发现病毒转化的细胞能分泌一种具有使正常大鼠肾成纤维细胞表型发生转化能力的因子,它在表皮生长因子(EGF)存在的情况下使贴壁生长的细胞特性发生改变,获得在软琼脂培养基上生长形成克隆的能力,并失去生长密度依赖的抑制作用。因此,这种细胞因子被命名为转化生长因子-β(TGF-β)。在过去的10年中,发现TGF-β实际上是一种具有多种生物学功能的细胞因     

转化生长因子—β1对前单核白血病细胞系THP—1的分化诱导作用

本文研究了重组人转化生长因子０β１对前单核白血病细胞系ＴＨＰ－１细胞增殖抑制作用和分化诱导作用。细胞染色计数和＾３Ｈ－ＴｄＲ掺入数据表明,在０．０７８－１．２５ｎｇ／ｍｌ浓度范围内,ｒｈＴＧＦ－β１剂量与增殖抑制呈正相关,在抑制细胞增殖的同时,ｒｈＴＧＦ－β１诱导细胞分化,诱导体系中细胞形态和生长方式的发生明显变化,细胞转为贴壁生长,表现出Ｍφ的细胞形态。α－醋酸萘酚酯酶、硝基蓝四唑的、细胞吞噬试