低pH对水稻黄化叶片硝酸还原酶活性暗诱导的调节

在低pH条件下,水稻离体黄化叶片的硝酸还原酶(NR)活性能在暗中诱导产生,其诱导过程约有2h的滞后期,亚胺环已酮(CHI,5ppm)和Na_2WO_4(25 mmol/L)能完全抑制这种诱导作用。在最适pH 3.0时,H~3标记氨基酸掺入NR的量比pH 7.0时约高2倍,表明酶活性的产生与酶蛋白的重新合成有关。 当低pH暗诱导时,BA(5ppm)和ABA(15ppm)能使酶活性分别提高约30％和80％,但它们都不能取代低pH在NR活性暗诱导中的作用。当存在1ppm CHI的时候,BA仍促进NR活性,而ABA则加强CHI对酶活性的抑制作用,这提示BA与ABA在低pH暗诱导条件下促进NR活性的机制是不同的。在pH 7.0的光诱导条件下,ABA对NR活性起抑制作用。     

硝酸还原酶的研究——Ⅱ.6-BA和光对小麦硝酸还原酶诱导的影响

黄化麦苗在暗中不能由NO_2~-诱导产生NR,而生长在水中的黄化麦苗经6小时以上的预照光,则可在随后的暗期中由NO_3~-诱导产生高活性的NR。白光、红光和远红光的短暂照光,不能使麦苗获得在暗中由NO_3~-诱导高活性NR的能力。无论在诱导介质或非诱导介质中,这种诱导能力在暗中都逐渐消失。DCMU可部分抑制黄化麦苗NR的光下诱导。预照光后植株的NR暗诱导被砷酸钠抑制。葡萄糖能促进离体黄化叶片在暗中诱导形成高于对照的酶活性。预照光通过光合产物为NR合成提供能量,可能是使麦苗能在暗中诱导NR的原因之一。6-BA可促进麦苗NR诱导。单独6-BA对NR无明显诱导作用,但它可明显促进NO_3~-对酶的诱导。NO_3~-、NO_3~-和6-BA的诱导作用均受环己酰亚胺抑制。6-BA缩短了NR诱导的滞后期,6-BA对NR诱导的促进紧密平行于它对叶绿素积累的促进。而光合作用影响NR的诱导,6-BA缩短NR诱导滞后期可能与6-BA加快叶绿体的发育,促进光合作用之间存在着紧密的联系。     

油菜素内酯对水稻幼苗硝酸还原酶活性的影响（简报）

油菜素内酯(BR)明显提高水稻幼苗的硝酸还原酶(NR)活性,并促进NO_3~-的吸收。环己亚胺(CHI)和脱落酸(ABA)都抑制 NR活性,而这些抑制不为 BR所逆转。BR和苄基腺嘌呤(BA)单独处理都促进NR活性,但两者不表现加成作用。     

6BA和KCl对黄化黄瓜离体子叶中叶绿素积累和硝酸还原酶活性诱导的影响

6BA和KCI能促进黄化黄瓜离体子叶光下叶绿素积累和诱导硝酸还原酶活性形成,这与它们提高体内的ATP含量有关。6BA和KGI对叶绿素积累和硝酸还原酶的诱导形成还具有加成作用。 脱落酸(ABA)和 6BA之间存在拮抗作用,但是 ABA不能抵消 KCI对硝酸还原酶诱导形成的促进作用,同时无论在光下或完全黑暗条件下,6BA对硝酸还原酶的促进作用均明显可见,而KCI仅在光下呈促进作用,表明6BA和KCI在硝酸还原酶诱导过程中的作用机理可能是不同的。     

红景天苷对脂多糖诱导大鼠肺泡巨噬细胞和Ⅱ型肺泡上皮细胞共培养炎性介质分泌的影响

本研究旨在探讨红景天苷(salidroside, Sal)对脂多糖(lipopolysaccharide, LPS)诱导大鼠肺泡巨噬细胞NR 8383和II型肺泡上皮细胞RLE-6TN共培养炎性活化的影响。CCK-8比色法检测细胞增殖百分率,Western blot检测磷酸化AKT (p-AKT)和总AKT蛋白表达,酶联免疫吸附法测定细胞培养上清中肿瘤坏死因子α(tumor necrosis factorα, TNF-α)、巨噬细胞炎性蛋白2(macrophage inflammatory protein-2, MIP-2)和白介素10 (interleukin-10, IL-10)的含量。结果显示:与对照组相比,32和128μg/mL Sal预处理RLE-6TN细胞或共培养RLE-6TN和NR 8383细胞1 h后继续培养24 h,细胞增殖百分率显著增加(P 0.05);与对照组相比,32和128μg/mL Sal预处理RLE-6TN细胞,p-AKT/AKT蛋白比值显著增加(P 0.05)。32μg/mL Sal预处理不仅抑制LPS诱导NR 8383细胞分泌TNF-α和MIP-2 (P 0.05),而且加强RLE-6TN和NR 8383细胞共培养对LPS诱导NR 8383细胞分泌TNF-α和MIP-2的抑制作用(P 0.05)。此外,32μg/mL Sal预处理能促进LPS诱导NR 8383细胞分泌IL-10 (P 0.05),并能加强RLE-6TN和NR 8383细胞共培养对LPS诱导NR 8383细胞分泌IL-10的促进作用(P 0.05)。以上结果提示,Sal不仅能直接抑制LPS诱导的NR 8383炎性活化,还可能通过PI3K/AKT信号通路促进RLE-6TN增殖,参与II型肺泡上皮细胞对LPS诱导肺泡巨噬细胞炎性活化的调节作用。     

NO可能作为Ca^2＋的下游信号介导乙烯诱导的蚕豆气孔关闭

以蚕豆（Vicia faba L．）为材料,利用药理学实验,结合激光共聚焦显微技术和分光光度法．探讨Ca^2＋和一氧化氮（nitric oxide,NO）在乙烯（ethylene,Eth）调控气孔运动信号转导中的作用。结果表明．光下乙烯利（0．004％,0．04％,0．4％）可诱导蚕豆叶片气孔关闭,且具有时间和剂量效应：NO清除剂cPTIO、硝酸还原酶（nitrate reductase,NR）抑制剂NaN3及胞外Ca^2＋螯合剂EGTA可部分逆转乙烯诱导的气孔关闭;乙烯能够明显增加气孔保卫细胞NO水平;提高蚕豆叶片NO含量和NR活性．并且NO的含量变化与NR活性的变化趋势基本一致;NR抑制剂NaN3可抑制乙烯诱导的气孔保卫细胞和叶片NO含量的增加;清除胞外Ca^2＋可减弱乙烯对NO含量和NR活性的诱导效应。说明Ca^2＋和NO均参与乙烯诱导的蚕豆气孔关闭,且NO（主要由NR途径合成）可能位于Ca^2＋下游参与调控这一信号转导过程。     

硝酸盐对硝酸还原酶活性的诱导及硝酸还原酶基因的克隆

硝酸盐在植物体内的积累过多已成为影响蔬菜品质并影响人类健康的重要因素。硝酸还原酶（NR）是硝酸盐代谢中的关键酶,提高其活性有利于硝酸盐的降解。为了解植物不同组织中NR的活性,用活体测定法检测了经50mmol/L的KNO₃诱导不同时间后的油菜、豌豆和番茄幼苗根茎叶中NR活性,同时为了明确外源诱导剂浓度与植物体内NR活性的关系,检测了经不同浓度KNO₃诱导2h后的矮脚黄、抗热605、小白菜和番茄叶片中的NRA。结果表明,不同植物组织NR活性有很大差异,叶中NR活性较高,根其次,茎最低;不同植物的NR活性随诱导时间呈不同的变化趋势,相同植物不同组织的NR活性变化趋势相似;不同植物叶片NRA为最高时KNO₃浓度不同。用30mmol/L的KNO3诱导番茄苗2h后,从番茄根和叶中提取总RNA,用RT-PCR方法获得NR cDNA,全长2736bp,编码911个氨基酸。为进一步利用该基因提高植物对硝酸盐的降解能力打下基础。     

植物体内NO3^—可给性对硝酸还原酶活性的调节

评述植物叶片中NO_3~-可给性对活体硝酸还原酶(NR)活性的调节,指出根部NO_3~-的不断供给及液泡内NO_3~-的外流可以使细胞质内的NO_3~-维持一定水平,这对NR的诱导及整个NO_3~-还原系统高活力的稳定是必需的。NO_3~-对NR的诱导反映在NR的mRNA转录水平上。     

雌激素快速影响大鼠发育期海马NMDA受体活性的机制

为了探讨雌激素对发育期大鼠海马NMDA受体活性的快速影响,对出生后18d的雄性大鼠进行苯甲酸雌二醇皮下注射,1h后用WesternBlot检测海马NMDA受体NR1和NR2B亚基、雌激素β受体、ERK1/2蛋白的表达,以及NR2B和ERK1/2的磷酸化水平;并通过海马内给予雌激素受体拮抗剂ICI182,780和MEK1/2抑制剂U0126预处理,进一步分析苯甲酸雌二醇影响NR2B和ERK1/2磷酸化的作用机制。结果显示,苯甲酸雌二醇不影响NR1、NR2B、ERβ和ERK1/2的表达,但能快速增强NR2B和ERK1/2的磷酸化水平。雌激素受体拮抗剂ICI182,780和MEK1/2抑制剂U0126均能明显抑制苯甲酸雌二醇诱导的NR2B和ERK1/2磷酸化水平的增加。以上结果提示,雌激素可能通过雌激素受体的非基因组机制激活ERK/MAPK信号转导通路,快速诱导NMDA受体NR2B亚基磷酸化,激活NMDA受体。     

凹叶景天和佛甲草的组织培养

植物名称:凹叶景天(Sedum emar ginatum)、佛甲草(S.lineare)。材料类别:幼嫩叶片培养条件:基本培养基为MS,诱导愈伤组织和芽的培养基附加(1)2,4-D2mg/l,(下同);(2)2,4-D2;BA0.5;(3)NAA5,BA0.05;(4)NAA2,BA0.25;(5)NAA0.2,BA2。诱导生根培养     

诱导痰黏蛋白5AC对支气管哮喘和慢性阻塞性肺疾病的鉴别价值

摘要 目的：对支气管哮喘（BA）患者和慢性阻塞性肺疾病（COPD）患者诱导痰黏蛋白5AC（MUC5AC）、炎症细胞和炎症因子水平进行比较以及相关性分析,评估MUC5AC鉴别BA和COPD的价值。方法：选取2018年9月至2019年9月来海南医学院第一附属医院就诊的BA稳定期患者（BA组）60例,同期COPD稳定期（COPD组）患者60例。诱导痰法采样并处理痰液,检测诱导痰MUC5AC、炎症细胞中性粒细胞（Neu）、巨噬细胞（Mac）、嗜酸性粒细胞（Eos）、淋巴细胞（Lym）、炎症因子血管内皮生长因子（VEGF）、细胞间黏附分子-1（ICAM-1）、白介素13（IL-13）和白介素17（IL-17）水平,通过Pearson相关分析对MUC5AC水平与Neu、Mac、Eos、Lym、VEGF、ICAM-1、IL-13、IL-17的关系进行分析。此外,采用受试者工作特征(ROC)曲线分析MUC5AC、炎症细胞及炎症因子鉴别诊断BA及COPD的效能。结果：COPD组诱导痰MUC5AC水平高于BA组,差异有统计学意义（P＜0.05）;COPD组诱导痰Mac和Eos水平均低于BA组,COPD组诱导痰Neu水平高于BA组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;COPD组诱导痰VEGF、ICAM-1、IL-13和IL-17水平均低于BA组,差异均有统计学意义（P＜0.05）;Pearson相关分析结果显示,诱导痰MUC5AC与炎症细胞Mac、Eos和炎症因子VEGF、ICAM-1、IL-13和IL-17呈负相关（P＜0.05）,与炎症细胞Neu呈正相关（P＜0.05）。经ROC曲线分析可得：诱导痰MUC5AC鉴别BA和COPD的曲线下面积、灵敏度、特异度以及约登指数均高于炎症细胞Neu、Mac、Eos以及炎症因子VEGF、ICAM-1、IL-13、IL-17。结论：COPD患者诱导痰MUC5AC水平高于BA患者,MUC5AC与炎症细胞和炎症因子有关,MUC5AC的检测有助于鉴别BA或COPD,其有望作为临床BA或COPD的监测指标和治疗靶点。     

硝酸还原酶的研究动态

NR的研究已有30多年的历史。近年来,(1)在NR纯化的基础上对其结构和特性已积累了大量资料;(2)根据用新的生物学技术的研究结果,提出酶的诱导可能是酶的从头合成或者酶前体的活化;(3)从NR的合成与降解、活化与钝化等方面,对体内NR活力的调节作了进一步阐述;(4)利用植物NR突变体,开展了NR基因的结构和表达的研究,并取得—定进展。     

白花蛇舌草叶片离体培养及试管无性系的建立

以白花蛇舌草叶片为材料,建立了白花蛇舌草叶片高效不定芽发生、植株再生体系。研究了不同激素及其组合对外植体不定芽发生的效应。结果显示,在MS基本培养基中单纯添加6BA,当6BA浓度为0.1mg/L和0.5mg/L时,不能诱导离体叶片发生不定芽,6BA浓度在1.0～5.0mg/L范围内,诱导率随BA浓度升高而增加,适宜浓度为3.0mg/L;当6BA与NAA配合使用时,其诱导率随着培养基中6BA与NAA的相对比值的提高而提高;以MS+BA3mg/L+NAA0.01mg/L作为继代培养基,建立起白花蛇舌草高效、稳定的试管无性系,为白花蛇舌草遗传转化研究奠定了基础。     

香蕉小茎尖培养和快速繁殖

本文报道14个香蕉品种或品系进行小茎尖离体培养繁殖无病苗。小茎尖培养在改良MS培养基中,附加BA2.0—5.0mg/l,试验结果显示,BA明显促进芽的形成和增殖,随着BA浓度的增高,形成的芽苗数也随着增多。各品种均能诱导丛生芽,但品种间的繁殖率有很大差异。低浓度的Kt或BA有利于诱导生根。培养的试管苗经检验为无病苗。     

衣藻培养及其硝酸还原酶活力的测定

本文通过提高培养基的pH和磷酸盐浓度解决了衣藻在硝酸盐培养基上生长不良的问题用完全合成培养基代替土壤提取液培养基。用钼酸钠和氯化钙代替钼酸铵和硝酸钙,消除了培养基中影响硝酸还原酶(NR)诱导的因素。用单藻落繁殖的保种方法保持了NR的诱导特性。在酶反应后用乙酸锌和甲硫吩嗪处理,去除了反应过剩的NADH和衣藻粗提取液中的某些物质对亚硝酸显色反应的抑制,建立了满意的NR活力测定技术。     

衣藻培养及其硝酸还原酶活力的测定

本文通过提高培养基的pH和磷酸盐浓度解决了衣藻在硝酸盐培养基上生长不良的问题。用完全合成培养基代替土壤提取液培养基。用钼酸钠和氯化钙代替钼酸铵和硝酸钙,消除了培养基中影响硝酸还原酶(NR)诱导的因素。用单藻落繁殖的保种方法保持了NR的诱导特性。在酶反应后用乙酸锌和甲硫吩嗪处理,去除了反应过剩的NADH和衣藻粗提取液中的某些物质对亚硝酸显色反应的抑制,建立了满意的NR活力测定技术。     

蝴蝶兰的组织培养研究

探讨蝴蝶兰的组织培养技术和方法。实验表明：改良型M1培养基诱导原球茎有良好的效果,M1 BA5．0mg/L对花梗芽的诱导最合适,Ml BA3．0mg／L对茎尖诱导原球茎最合适。降低分裂素浓度后,原球茎可以分化成完整植株,壮苗阶段以改良型M2 BA0．1mg/L NAA0．5mg／L效果较佳。移栽基质选用水苔,成活率高。     

川芎的组织培养及植株再生

植物名称:川芎(Ligusticum wallichii Franch)材料类别:长有1—2片真叶的幼嫩茎段和叶片培养条件:基本培养基采用MS。诱导愈伤组织培养基为MS,每升补加2,4-D2.0毫克,6BA0.4毫克;诱导芽分化培养基为MS,每升补加6BA0.4毫克、IAA0.5毫克;诱导根分化培养基为1/2MS,每升补加6BA0.2毫克,IAA1.0毫克。培养温度     

灰绿黄堇愈伤组织培养及生物总碱含量的初步研究

将灰绿黄堇(Corydalis adunca Maxim．)无菌试管苗的茎段接种于附加不同BA和NAA浓度组合的MS培养基上,诱导出愈伤组织。实验表明较高浓度的BA和较低浓度的NAA组合有利于灰绿黄堇愈伤组织的诱导和生长以及愈伤组织中生物碱的合成。在附加BA2．00mg／L NAA0．2mg／L的MS培养基上,灰绿黄堇愈伤组织生长快,诱导率较高,合成的生物总碱含量较高,可达0．312％。     

生菜硝酸还原酶基因的克隆及高氮水平下外源γ-氨基丁酸对其表达和叶片硝酸盐含量的影响

硝酸还原酶(NR)是硝酸盐代谢的关键酶。该研究在成功克隆生菜NR基因的同时,进行了高氮水平下外源γ-氨基丁酸(GABA)对生菜叶片NR基因表达和NO3--N含量的研究。结果表明:(1)生菜NR基因(GenBank登录号为KP122207)序列长1 791bp,编码585个氨基酸残基,蛋白保守结构域含钼辅蛋白超家族、细胞色素b5超家族和FNR超家族;生菜NR基因与菊苣NR基因亲缘关系最近,序列一致性为93%,与烟草、甜菜、黄瓜、大豆等NR序列的一致性均在80%以上。(2)高氮水平下外源2.5mmol/L GABA处理生菜可诱导NR基因上调表达,并显著提高了生菜叶片NR、亚硝酸还原酶(NiR)、谷氨酸脱羧酶(GAD)活性和NH4+-N含量,降低了NO3--N、NO2--N含量;虽然NO3--N含量与NR、GAD、NiR活性、NO2--N、NH4+-N含量均呈显著相关关系,但与NR活性的相关系数最高且达极显著水平。研究认为,高氮水平下外源GABA可通过诱导NR基因上调表达、增强相关酶活性来影响无机氮代谢,从而降低了生菜叶片硝酸盐含量,其中NR在该过程中发挥着至关重要的作用,为生产中GABA的施用及降低叶菜类蔬菜硝酸盐含量提供了理论依据。