雌激素快速影响大鼠发育期海马NMDA受体活性的机制

为了探讨雌激素对发育期大鼠海马NMDA受体活性的快速影响,对出生后18d的雄性大鼠进行苯甲酸雌二醇皮下注射,1h后用WesternBlot检测海马NMDA受体NR1和NR2B亚基、雌激素β受体、ERK1/2蛋白的表达,以及NR2B和ERK1/2的磷酸化水平;并通过海马内给予雌激素受体拮抗剂ICI182,780和MEK1/2抑制剂U0126预处理,进一步分析苯甲酸雌二醇影响NR2B和ERK1/2磷酸化的作用机制。结果显示,苯甲酸雌二醇不影响NR1、NR2B、ERβ和ERK1/2的表达,但能快速增强NR2B和ERK1/2的磷酸化水平。雌激素受体拮抗剂ICI182,780和MEK1/2抑制剂U0126均能明显抑制苯甲酸雌二醇诱导的NR2B和ERK1/2磷酸化水平的增加。以上结果提示,雌激素可能通过雌激素受体的非基因组机制激活ERK/MAPK信号转导通路,快速诱导NMDA受体NR2B亚基磷酸化,激活NMDA受体。     

围产期母鼠染毒双酚A对雄性子代脑内谷氨酸N-甲基-D-天冬氨酸受体发育的影响

为了探讨围生期双酚A (bisphenol A,BPA) 暴露对雄性子代大鼠海马和前皮层谷氨酸N- 甲基-D- 天冬氨酸受体(N-methyl-D-aspartate Receptor, NMDAR) 表达的影响,作者通过对妊娠第7 天至仔鼠出生后21 天的母鼠灌胃染毒BPA (200, 50, 5, 0.5 mg/(kg·d)),用Western-blot法分别检测出生后4、7、14、21、56 天的雄性仔鼠海马和前皮层NMDA 受体NR1、NR2A、2B 亚基的表达。结果显示,在海马区,较低剂量(0.5～50 mg/(kg·d))BPA 剂量依赖性地下调NMDA 受体各亚基表达,而高剂量(200 mg/(kg·d)) BPA 最显著下调NR1 表达,却对
NR2A、2B的影响最小;但所有BPA剂量组的NMDA受体亚基表达均显著低于对照组。在前皮层,NMDAR 亚基表达对BPA 的敏感性相对较低,只有较高剂量(50～200 mg/(kg·d)) BPA 可明显下调NR2A、2B 亚基表达。此外,BPA 明显改变NMDAR 的亚基组成,NR2A/NR1 和NR2B/NR1 比值在海马区被200 mg/(kg·d) BPA 上调,在前皮层却被0.5 mg/(kg·d) BPA 上调;其它剂量BPA 均下调两脑区的该比值。以上结果提示,母体围生期双酚A 暴露下调NMDA 受体表达和亚基组成,这可能是BPA 影响雄性子代脑发育的机制之一。     

丰富环境对脑缺血再灌注小鼠神经细胞凋亡和XIAP基因表达的影响

该研究主要探讨丰富环境干预对脑缺血再灌注小鼠神经细胞凋亡的影响。实验采用健康雄性ICR 小鼠,随机分为丰富环境缺血组(IE)、标准环境缺血组(IS),同时分别设丰富环境假手术组(SE)、标准环境假手术组(SS)。通过双侧颈动脉重复结扎建立小鼠全脑缺血再灌注模型,分别在缺血后在丰富环境和标准环境饲养3 d或7 d 后,进行开场行为和水迷宫空间记忆行为检测;同时进行神经细胞损伤的组织学观测,并采用琼脂糖凝胶电泳技术分析DNA 片段化,用RT-PCR 检测X 染色体连锁的凋亡抑制蛋白（X-linked inhibitor of apoptosis protein,XIAP） mRNA的表达。结果表明,丰富环境干预能有效改善脑缺血导致的自发活动、探究行为减少和空间学习记忆能力减退,并对正常小鼠也有促进作用。缺血再灌注4 d的海马神经细胞损伤较严重,神经元密度显著减少,脑组织DNA 片段化明显增强,丰富环境作用使神经细胞损伤和DNA 片段化程度均有所减轻。同时丰富环境作用可抑制反复脑缺血再灌注导致的XIAP mRNA 表达下调。可见,丰富环境干预可改善脑缺血小鼠的自发活动、探究行为和空间学习记忆能力,该作用可能与其抑制神经细胞XIAP基因表达下调、减弱脑缺血再灌注诱导的神经细胞凋亡有关。     

围产期母体染毒双酚A对雄性子代脑内雌激素β受体和芳香酶表达的影响

为了探讨环境雌激素双酚A (bisphenol-A,BPA)对子代发育期脑内雌激素受体(estrogen receptor,ER）和芳香化酶P450arom表达的影响,对妊娠第7天至哺乳期(仔鼠出生后21天)的母鼠灌胃染毒BPA(200、50、5、0.5mg·kg-1/d),用Western-blot法分别检测出生后4、7、14、21、56天雄性仔鼠的海马及前皮层ERβ和P450arom蛋白表达。结果显示,BPA剂量依赖性地上调前皮层和海马P450arom表达,抑制ERβ蛋白表达。在皮层,出生后4~56天各时间点的P450arom和ERβ表达对BPA都很敏感,其中200、50 或5mg·kg原1/d BPA组与对照组相比有显著差异(P＜0.05,P＜0.01 或P＜0.001);在海马内,BPA对生后发育早期P450arom和ERβ表达的影响更为明显,出生后2周内,200 和50mg·kg-1/d BPA组与对照组相比有显著差异(P＜0.05,P＜0.01或P＜0.001)。以上结果提示,母体围产期BPA暴露可通过上调P450arom而促进雄性子鼠皮层和海马的雌激素合成,并由此抑制ERβ表达。这可能是BPA影响雄性子代脑发育的机制之一。