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本文通过聚合酶链式反应(PCR),从整合有人T细胞白血病病毒Ⅰ型(HTLV-I)的MT-2细胞株中,扩增出HTLV-I外膜蛋白(env)的全基因(1.45kb),并成功地克隆入pUC19载体,构建成env基因克隆env/pUC19.利用原核高效表达载体pGEX-2T,在大肠杆菌中有效地表达了与谷胱甘肽S-转移酶(GST)融合的env羧基末端抗原的重组蛋白,融合基因的转录由tac启动子调控。SDS-PAGE结果表明,有一约52kD的目的蛋白带,表达量占菌体总蛋白的10%;WesterNblott及ELISA结果显示,表达产物能与HTLV-I多抗血清结合。本研究为研制HTLV-I的诊断试剂及进一步了解env的免疫学和生物学性质打下了基础。 相似文献
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人类T细胞白血病病毒I型(HTLV-I)是成人T细胞白血病(ATL)的病因。HTLV-I基因组中的pX基因区域编码p40^tax和p27^rex蛋白,前者可反式激活病毒的LTR和IL-2R及c-fos、TGFβ1等细胞基因,加强转录过程,在白血病发生中发挥重要作用。p27^rex蛋白则在转录后水平进行反馈性调节。白血病的发生机理是多因子参加的多步骤过程。 相似文献
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本文以数学模式来探讨抗病毒免疫应答、病毒含量以及病毒变异性间的关系。由数学模式表明的结果并与人血病病毒I型(HTLV-I)和人类免疫缺陷病毒I型(HIV-1)感染中杀伤性T细胞反应和病毒变异性研究的研究资料进行比较,获得较为一致的结果。 相似文献
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福建沿海地区人T淋巴细胞白血病病毒1型膜基因的克隆和系统树分析 总被引:9,自引:2,他引:7
人T淋巴细胞白血病病毒1型(HTLV-1)是最早发现的一种RNA肿瘤病毒。利用HTLV-1基因组长末重复区(LTR)或膜基因(emv)序列进行系统树分析,可分为C、J、WA、CA和M5个亚型。为了解我国HTLV-1流行区毒株的主要基因型别,从福建莆田地区克隆出3株HTLV-1的env基因。其序列与已知各亚型代表株进行系统树分析,结果表明均为C亚型。首次证实了中国大陆HTLV-1C亚型的存在。该地区 相似文献
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人类嗜T细胞白血病Ⅰ型病毒(HTLV-Ⅰ)是成人T细胞白血病(ATL)的致病因子,其编码的TAX蛋白的反式激活在白血病形成中有重要作用。NF-kB是细胞活化和产生细胞因子的重要转录调控因子。正常情况下,NF-kB因子与抑制性蛋白IKB结合,形成复合物存在于胞质中。TAX蛋白可与IKB激酶γ(IKKγ)直接结合,而后启动TAX对IKKα和IKKβ的结合,并使之发生磷酸化。后者使IKB蛋白降解,NF- 相似文献
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传染性法氏囊病病毒中国强毒株节段cDNA基因的克隆和序列分析 总被引:2,自引:2,他引:0
以来自哈尔滨传染性法氏囊病病毒(IBDV)强素株(Harbin 毒株,H)的基因组RNA为模板,用反转录聚合酶链反应(RP-PCR)的方法得到了其A节段的全长cDNA片段,分5端(1659bp)和3端(1444bp)上下两段分别克隆到pGEMB-T载体上,测定了其核苷酸顺序,在长为3101bp中含有两个阅读枢ORF A1和ORF A2,分别编码1012个氨酸酸的前体蛋白(VP2-4-3)和145个 相似文献
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PCR法检测外环境水中脊髓灰质炎病毒I型基因的研究 总被引:1,自引:0,他引:1
应用聚合酶链反应(PCR)技术检测外环境水中分离的脊髓灰质炎病毒I型(PVI)毒株基因型,发现所分离的22株病毒,均为疫苗SabinI相关株,脊髓灰质炎病毒的温度敏感(T特征)试验亦提示为弱毒标,与PCR试验相吻合,表明实施强化免疫和常规免疫后,外环境中的脊髓灰质炎病毒已被疫苗相关株循环所取代,同时证实用了PCR作为相环境中PVI病毒株的基因型分析的检测方法是特异和敏感的。 相似文献
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本研究借助免疫电镜和溃变纤维电镜追踪等技术,探索我国南方特产,昼行动物“灵长类原宗”树鼠句(TBC)下丘脑视交叉上核(SCN)的突触,特别是SCN中5-羟色胺(5-HT)能和视纤维传入的突触联系的超微结构特征,结果表明:TBC的SCN主要包含不对称性GrayⅠ型(GTⅠ)和对称性GrayⅡ型(GTⅡ)两种突触类型。其中GTⅠ突触的后膜下颇多呈现“三体一线”的节下小体。5-HT能末梢在TBC的SCN(主要在其腹侧)中形成丰富的GTⅠ和GTⅡ突触。还观察到SCN中5-HT能末梢和非5-HT能轴突构成颇多的轴-轴突触,5-HT能末梢既可为突触前也可为突触后成分。这在大鼠SCN中未见报道,而视纤维传入在SCN腹外侧区主要形成GTⅠ突触 相似文献
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广东两株人免疫缺陷病毒的分离和鉴定 总被引:1,自引:0,他引:1
从我省两名经性途径感染艾滋病的病人中采血,分离外周血单核细胞(PBMCs),将其与正常人PBMCs共培养分离人免疫缺陷病毒(HIV),3周后检测上清HIV-1p24抗原(ELISA法)超过阈值。将共培养第四周细胞和上清分别感染H9细胞(T细胞淋巴瘤传代细胞),一周后检测HIV-1 p24怕,证明有病毒生长。用HIV-1 ENV基因引物的套式聚合酶链反应(Nested PCR)证实,两株新分离的病毒 相似文献
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中枢5-羟色胺能系统与下丘脑-垂体应激激素 总被引:2,自引:0,他引:2
存在于下丘脑的神经末梢所释放的5-羟色胺(5-HT)可增加CRH和肾素释放因子、垂体前叶ACTH和催乳素(PRU、垂体后叶加压素(VP)和催产素(OT)的分泌。5-HT1和/或5-HT2受体激活介导了这些激素分泌。 相似文献
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中枢5—羟色胺能系统与下丘脑—垂体应激激素 总被引:2,自引:0,他引:2
存在于下丘脑的神经末梢所释放的5-羟色胺(5-HT)可增加CRH和肾素释放因子、垂体前叶ACTH和催乳素(PRL)、垂体后叶加压素(VP)和催产素(OT)的分泌。5-HT1和/或5-HT2受体激活介导了这些激素分泌。 相似文献
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从一名国内感染的艾滋病人采血,分离其外周血单核细胞(PMCs)。首先与正常的PMCs共培养,4周后检测其HIV-1p24抗原(ELISA)达到峰值。用此时的细胞及其上清分别感染Jurkat-tat、CEM、MT4细胞,可很快地在这三株细胞中检测到HIV生长,HIV在Jurkat-tat细胞中生长情况最好,同时用病人血清直接感染Jurkat-tat和MT4细胞,4周后检测其细胞上清HIV-1p24抗原(ELISA法)为阳性,但OD值很低(约为PMC共培养组的一半)。用病人的少量全血与正常PMCs共培养,得到的结果与分离病人PMCs法相近。应用间接免疫荧光法(IFA)、免疫酶法(IEA)、蛋白印迹法及HIV-1POl基因和Env基因特异引物的聚合酶链反应(PCR)等证实为HIV-1病毒。分离的HIV在Jurkat-tat细胞中连续传代,细胞被感染后2-3天即出现以大量融合细胞为主的细胞病变,感染后7-10天细胞几乎全部死亡。病毒在连续传代过程中的生长特征及致细胞病变特征不变。此病毒命名为CA-2毒株。 相似文献
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鸡传染性支气管炎病毒免疫原基因cDNA的克隆和序列分析 总被引:3,自引:0,他引:3
从含有鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的鸡胚尿囊液中快速提取病毒RNA,得到约23kb全长IBV RNA。运用反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)得到1.72kb编码全长IBV免疫原糖蛋白S1的基因片段。进一步将此基因片段插入到质粒pUC19中,进行全长片段的序列分析。结果表明,IBV北京株和Beaudette株的核酸同源性为97.8%,与M41株的核酸同源性达98.5%。 相似文献
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人Mn—SOD cDNA的克隆及高效表达 总被引:13,自引:0,他引:13
用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR),以人肝细胞株(L02)总RNA为模板,扩增了人锰超氧化物歧化酶(hMn-SOD)的cDNA。重组到T7启动子控制下的表达载体pET-24a(+)中,构建表爱质粒pET-MnSOD,并转化大肠杆菌BL21(DE3)。SDS-PAGE及蛋白质印迹分析表明,经1mmol/L异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导后,可高效表达一分子量为22kD的蛋白质,与抗人 相似文献
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人巨细胞病毒痘苗重组质粒在T_(32)-Istrati减毒菌苗株中的转化赵庆萱(卫生部兰州生物制品研究所,兰州730046)肖伟华(卫生部长春生物制品研究所,长春130062)人巨细胞病毒(HCMV)痘苗重组质粒(PSC11-115)是具有强启动子的?.. 相似文献