疱疹病毒对抗病毒药物抗性的回顾

本文就单纯疱疹病毒（ＨＳＶ）、水痘带状疱疹病毒（ＶＺＶ）、人巨细胞病毒（ＨＣＭＶ）、ＥＢ病毒（ＥＢＶ）等疱疹病毒的抗病毒药物,产生抗性的机理和抗病毒治疗的策略等方面进行了回顾。     

在昆虫细胞中表达Epstein一Barr病毒膜蛋白

在昆虫细胞中表达Ｅｐｓｔｅｉｎ一Ｂａｒｒ病毒膜蛋白谷淑燕，刘展，周为民，韩春卉Ｈ，Ｗｏｌｆ（中国预防医学科学院病毒学研究所，北京１０００５２）关键词ＥＢ病毒，膜蛋白，昆虫杆状病毒，基因表达ＥＢ病毒（Ｅｐｓｔｅｉｎ一ＢａｒｒＶｉｒｕｓ，ＥＢＶ）与人的多...     

TORCH综合征与先天性畸形

近年来,先天性感染引起新生儿畸形死亡的人数日益增加, Ｔ Ｏ Ｒ Ｃ Ｈ 是一组能引起先天性感染的病原微生物。１９７１ 年 Ｎａｈｍ ｉａｓ 等将引起先天性感染的病原体用英文字头命名,称为 Ｔ Ｏ Ｒ Ｃ Ｈ 感染或 Ｔ Ｏ Ｒ Ｃ Ｈ 综合征。 Ｔ 代表弓形体（ Ｔｏｘｏｐｌａｓｍ ａ ｇｏｎｄｉｉ, Ｔ Ｏ Ｘ Ｏ）, Ｏ为其它（ Ｏｔｈｅｒ,包括很多种病毒）, Ｒ 表示风疹病毒（ Ｒｕｂｅｌｌａ ｖｉｒｕｓ）, Ｃ代表巨细胞病毒（ Ｃｙｔｏｍ ｅｇａｌｏｖｉｒｕｓ, Ｃ Ｍ Ｖ）, Ｈ 表示单纯疱疹病毒（ Ｈｅｒｐｅｓ ｓｉｍ ｐｌｅｘ ｖｉｒｕｓ, Ｈ Ｓ Ｖ）。随着病原微生物学、免疫学和流行性病学研究的进展,又发现了多种能引起先天性感染的病原微生物,如水痘--带状疱疹病毒（ Ｖａｒｉｃｅｌｌａ ｚｏｓｔｅｒ ｖｉｒｕｓ, Ｖ Ｚ Ｖ）,麻疹病毒（ Ｍｅａｓｌｅｓ ｖｉｒｕｓ, Ｍ Ｖ）, 流 行性腮 腺炎 病毒（ Ｐａｒｏｔｉｔｉｓ ｖｉｒｕｓ, Ｐ Ｖ）, 人类免 疫缺 陷病毒 （ Ｈｕｍ ａｎｉｍ ｍ ｕｎｏｄｅｆｉｃｉｅｎｃｙ ｖｉｒｕｓ, Ｈ Ｉ Ｖ）,丙型肝炎病毒（ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｃ ｖｉｒｕｓ, Ｈ Ｃ Ｖ）,人类疱疹病毒６型（ Ｈｕｍ ａｎ ｈｅｒｐｅｓ ｖｉｒｕｓ ｔｙｐｅ ６, Ｈ Ｈ Ｖ ６）,肠道病毒（ Ｅｎｔｅｒｏｖｉｒｕｓ, Ｅ Ｖ）,乙型肝炎病毒（ Ｈｅｐａｔｉｔｉｓ Ｂ ｖｉｒｕｓ, Ｈ Ｂ Ｖ）,人类乳头瘤病毒（ Ｈｕｍ ａｎ ｐａｐｉｌｌｏｍ ａｖｉｒｕｓ, Ｈ Ｐ Ｖ）, Ｅ Ｂ 病毒（ Ｅｐｓｔｅｉｎ Ｂａｒｒ ｖｉｒｕｓ, Ｅ Ｂ Ｖ）,人类微小病毒 Ｂ１９（ Ｈｕｍ ａｎ ｐａｒｖｏｖｉｒｕｓ Ｂ１９, Ｈ Ｐ Ｖ Ｂ１９）和人类嗜血细胞病毒１ 型（ Ｈ Ｔ Ｌ Ｖ １）等。 Ｔ Ｏ Ｒ Ｃ Ｈ 感染的特点是孕妇患其中任何一种疾病后,本人的症状极其轻微,或根本没有症状和特征。病原体虽不相同,却能使胎儿或新生儿出现相同或相似的临床表现,有时还很严重,甚至导致死亡。如在怀孕早期感染,则发生流产、死胎和胎儿畸形。中晚期感染,导致胎儿不同程度畸形和脏器损害。     

病毒感染与细胞凋亡

本文叙述了ＥＢ病毒、甲级病毒、单纯疱疹病毒１型（ＨＳＶ－１）、牛痘病毒、腺病毒、人类免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）和杆状病毒等感染细胞后对宿主细胞凋亡的影响,初步探讨了可能的机制,并作了展望。     

鼻咽癌Epstein－Barr病毒受体（EBVR／CR＿2）基因的病毒结合区的序列测定

Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒（ＥＢＶ）进入鼻咽上皮细胞的途径,是人们研究ＥＢＶ与鼻咽癌（ＮＰＣ）的病因关系时所必须回答的一个问题。用抗ＥＢＶ受体（ＥＢＶＲ／ＣＲ＿２）单抗检测上皮细胞中该受体的表达已有报道,但对上皮细胞中ＥＢＶＲ／ＣＲ＿２的基因结构仍需研究。我们采用ＰＣＲ扩增和不对称ＰＣＲ直接测序法,首次检测了１０例ＮＰＣ及３例正常人胚鼻咽上皮（Ｈｕｍａｎｅｍｂｒｙｏｎｉｃｎａｓｏｐａｒｙｎｇｅａｌｅｐｉｔｈｅｌｉｕｍ,ＨＥＮＥ）组织样本中ＥＢＶＲ／ＣＲ＿２的ＥＢＶ结合区的编码序列。这一片段的ＤＮＡ序列测定结果显示,人ＮＰＣ细胞和正常ＨＥＮＥ细胞的ＥＢＶＲ／ＣＲ＿２的ＥＢＶ结合区的编码序列,与正常人Ｂ淋巴细胞的ＥＢＶＲ／ＣＲ＿２的相应序列完全相同,提示ＥＢＶ感染鼻咽上皮细胞可能与ＥＢＶＲ／ＣＲ＿２基因的ＥＢＶ结合区结构改变无直接关系。     

广东两株人免疫缺陷病毒的分离和鉴定

从我省两名经性途径感染艾滋病的病人中采血,分离外周血单核细胞（ＰＢＭＣｓ）,将其与正常人ＰＢＭＣｓ共培养分离人免疫缺陷病毒（ＨＩＶ）,３周后检测上清ＨＩＶ－１ｐ２４抗原（ＥＬＩＳＡ法）超过阈值。将共培养第四周细胞和上清分别感染Ｈ９细胞（Ｔ细胞淋巴瘤传代细胞）,一周后检测ＨＩＶ－１ ｐ２４怕,证明有病毒生长。用ＨＩＶ－１ ＥＮＶ基因引物的套式聚合酶链反应（Ｎｅｓｔｅｄ ＰＣＲ）证实,两株新分离的病毒     

牛免疫缺陷病毒长末端重复序列(BIV一LTR)在大肠杆菌中的启动子功能

牛免疫缺陷病毒（ＢＩＶ）的长末端重复序列（ＬＴＲ）含有病毒的启动子,调控病毒在真核细胞中的表达。我们将ＢＩＶＬＴＲ与萤火虫荧光素酶基因连接构建成重组质粒ｐＢＩＶ一Ｌｕｃ,该质粒能在Ｅｃｏｌｉ中有效地表达出荧光素酶的活性,从而证明ＢＩＶＬＴＲ在大肠杆菌中也具有启动子功能。Ｍｕｎｇｂｅａｎ核酸酶作图分析发现,ＢＩＶＬＴＲ在Ｅｃｏｌｉ中的转录起始位点位于Ｕ_３区,而不是在真核细胞中的Ｕ＿３一Ｒ交界处。同时我们也证实了ＢＩＶＬＴＲ在Ｅ,ｃｏｌｉ中仍可被ＢＩＶｔａｔ蛋白特异性地反式激活,为研究ｔａｔ蛋白的作用机制提供了一条新的途径。     

肛门生殖器区肿瘤组织中HPV的快速检测和分型

迄今已发现的人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）型已超过７７型,其中至少有３０个型与泌尿生殖道肿瘤有关。所以ＨＰＶ的检测与分型对于泌尿生殖道肿瘤的病因和预后将是非常重要的。ＨＰＶ有很大的异质性,故用常规的诊断技术来测定未知标本中的ＨＰＶ基因型有一定困难。为此,我们应用了反向点杂交法（ＲＯＢ）来检测ＨＰＶ分型。即用７种序列特异性寡核苷酸探针分别对应７型ＨＰＶ（ＨＰＶ６Ｂ、１１、１６、１８、３１、３３、３５）,这些     

人乳头瘤病毒及其疫苗的研究

人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）是一种致瘤病毒，在人类广泛传播，能在人的皮肤或粘膜引起良性肿瘤，并与人类多种癌症有关。已发现ＨＰＶ有６０个以上的型别，均以人为单一宿主。近几年的研究对病毒基因组与基因编码产物有了深入了解，对病毒的可能致癌机理作了深入探讨。由于ＨＰＶ不能在体内外增殖，无法以培养法获得大量病毒及制备疫苗，又由于病毒的ＤＮＡ性质，疫苗不能以完整病毒颗粒制备，ＨＰＶ疫苗的研究存在一定的难度，但已设计了一些高科技的ＨＰＶ疫苗。本文对近几年来ＨＰＶ及其疫苗的研究作一简要综述。     

鼻咽癌Epstein—Barr病毒受体（EBVR／CR2）基因的病毒结合区的序列测定

Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒（ＥＢＶ）进入鼻咽上皮细胞的途径,是人们研究ＥＢＶ与鼻咽癌（ＮＰＣ）的病因关系时所必须回答的一个问题。用抗ＥＢＣ受体（ＥＢＶＲ／ＣＲ２）单抗检测上皮细胞中该受体的表达已有报道,但对上皮细胞中ＥＢＶＲ／ＣＲ２的基因结构仍需研究。我们采用ＰＣＲ扩增和不对称ＰＣＲ直接测序法,首次检测了１０例ＮＰＣ及３例正常人胚鼻咽上皮（Ｈｕｍａｎ ｅｍｂｒｙｏｎｉｃ ｎａｓｏｐｈａｒｙｎｇｅ     

丝状病毒研究进展

１９９１年丝状病毒科的分类正式公式,它包括马堡病毒（ＭＢＧＶ）和埃博拉病毒（ＥＢＯＶ）,近年来埃博拉病毒在中非重新出现,频频流行,引起世界极大关注。本文从病毒生物学性状,致病性与免疫性,微生物学检查和防治原则等方面综述了近年的研究成果。     

Epstein-Barr病毒诱导永生化人上皮细胞恶性转化

为了使ＥＢ病毒能直接感染人上皮细胞,将ｐＳＧ－ＣＲ２－Ｈｙｇ载体转入永生化人上皮细胞（２９３细胞）中。通过间接免疫荧光法测定发现,转化的细胞表达ＥＢ病毒受体。用ＥＢ病毒感染ＣＲ２－２９３细胞后,２３％的细胞可表达ＥＢ病毒抗原。用ＴＰＡ作用于这些细胞后,表达病毒抗原的细胞数增加。用ＰＣＲ法从ＥＢ病毒感染细胞ＤＮＡ中扩增出ＥＢ病毒ＤＮＡＷ片段。在ＴＰＡ持续作用下,ＥＢ病毒感染细胞的形态特征发生改变。把ＥＢ病毒感染细胞接种在裸鼠皮下,每周注射ＴＰＡ,可诱导细胞在裸鼠体内形成肿瘤。经组织病理检查确诊,肿瘤为低分化上皮细胞癌。杂交试验证明,肿瘤组织细胞中有ＥＢ病毒ＥＢＥＲｓ存在。上述结果表明,ＥＢ病毒在ＴＰＡ协同作用下,可诱导永生化上皮细胞恶性转化。     

肝炎病毒与EB病毒重叠感染

为探讨肝炎病毒（ＨＶ）与ＥＢ病毒（ＥＢＶ）重叠感染的状况和后果,我们用免疫酶法对１５４例各型病毒性肝炎患者作了ＥＢＶＩｇＡ抗体检测。结果发现,急性肝炎、慢性轻度肝炎、慢性中度肝炎、肝炎肝硬化、慢性重型肝炎和原发性肝癌ＶＧＡ－ＩｇＡ抗体的阳性率分别为２４．０％、３０．０％、５３．３％、６３．３％、４０．０％和７２．７％,与健康人（５．３％）比较,有非常显著升高（Ｐ＜０．０１）;原发性肝癌又较急性肝炎和慢性轻度肝炎高,并有非常显著意义差异（Ｐ＜０．０１）。ＨＢＶ和ＨＡＶ＋ＨＢＶ感染者比较,前者又较后者低（Ｐ＜０．０１）。重叠感染者的临床表现均为“肝炎型”,未见咽炎、腺热、胃肠、肺炎、肾炎、神经等类型。重叠感染者的ＣＤ＋３及ＣＤ＋４Ｔ细胞下降,ＣＤ＋８Ｔ细胞及ＩｇＧ,ＩｇＭ升高,与健康人比较差异非常显著意义（Ｐ＜０．０１）。结果提示：ＨＶ感染,不仅因免疫失调易感ＥＢＶ,又可因重叠感染而进一步使免疫功能失调;对病毒性肝炎的处理应强调免疫调节治疗。     

人乳头瘤病毒疫苗的研究进展

人乳头瘤病毒（ＨＰＶ）是公认的几种瘤病毒之一,与多种人类良、恶性肿瘤的发生密切相关。有效疫苗的研制,对控制ＨＰＶ感染和ＨＰＶ相关肿瘤的免疫治疗都有十分重要的意义。本文就近年来ＨＰＶ的肽疫苗、重组病毒（细菌）疫苗,病毒样颗粒（ＶＬＰ）疫苗以及ＤＮＡ疫苗的研究进展作一综述。     

湖北地区宫颈癌组织中人乳头瘤病毒16型E7基因的分离,克隆和序…

采用加端聚合链反应技术,从湖北地区一宫颈癌患者癌组织ＤＮＡ中分离出人乳头瘤病毒１６型（ＨＰＶ１６）Ｅ７基因,并在ｐＵＣ１８载体中克隆,经限生核酸内切酶分析和ＤＮＡ序列分析,确认了含ＨＰＶ１６Ｅ７重组克隆质粒,命名ｐｆＨＰＶ１６Ｅ７－ＨＢ。ＤＮＡ序列分析表明,ＨＰＶ１６Ｅ７－ＨＢ基因全长２９４ｂｐ（与报道的标准基因长度相同）但其核苷酸顺序中的两处发生了Ｃ－（Ｔ）突变,即第４３位密码子ＣＡＡ变为ＴＡＡ     

Epstein—Barr病毒膜抗原基因免疫的研究

将Ｅｐｓｔｅｉｎ－Ｂａｒｒ病毒（ＥＢＶ）膜抗原（ＭＡ）ＢＬＬＦ１基因,插入含有ＣＭＶ启动子的真核表达载体ｐｃＤＮＡ３下游ＢａｍＨＩ位点,构建成真核表达质粒ｐｃＤＮＡ３－ＭＡ。将纯化的ＤＮＡ注射Ｂａｌｂ／ｃ小鼠股四头肌。经免疫的动物产生抗ＥＢ病毒ＭＡ特异性的抗体和中和抗体,依赖抗体细胞介导的细胞毒作用（ＡＤＣＣ）,特异性Ｔ淋巴细胞增生性反应及细胞毒性Ｔ淋巴细胞（ＣＴＬ）杀伤作用。基因免疫与基因－蛋白     

病毒基因工程国家重点实验室开放指南

病毒基因工程国家重点实验室开放指南（一）病毒基因工程国家重点实验室（ＳｔａｔｅＫｅｙＬａｂｏｒａｔｏｒｙｆｏｒＭｏｌｅｃｕｌａｒＶｉｒｏｌｏｇｙａｎｄＧｅｎｅｔｉｃＥｎｇｉｎｅｒｉｎｇ,ＳＫＬＭＢＧＥ）,始建于１９８７年。固定人员３０人,客坐人员每年...     

过量表达的hTR75可独立介绍hTNFα的细胞毒性

利用细小ＲＮＡ病毒属脑炎和心肌炎病毒（ＥＭＣＶ）的内核糖体进入位点（ＩＲＥＳ）元件构建了人肿瘤坏死因子受体－７５基因（ｈＴＲ７５）和新霉素抗性基因（ｎｅｏ＾Ｒ）的双顺反子表达载体,通过电脉冲转染ＢＨＫ－２１细胞,筛选出分别和同时稳定过量表达两种ｈＴＮＦ受体的细胞株。这些细胞在ｍＲＮＡ和蛋白质水平均可检测到ｈＴＲ７５的表达。利用野生型和具有两种受体选择性结合活性的ｈＴＮＦα突变体对这些细胞株进行测定     

乙肝疫苗的研究概况

我国是病毒性肝炎的高发区。肝炎病毒包括至少５种：甲型肝炎病毒（ＨＡＶ）、乙型肝炎病毒（ＨＢＶ）、丙型肝炎病毒（ＨＣＶ）、丁型肝炎病毒（ＨＤＶ）、戊型肝炎病毒（ＨＥＶ）,其中尤其以乙型肝炎病毒危害最严重。在我国ＨＢＶ的携带率达１０％以上。目前对于乙型肝...     

在昆虫细胞中同时表达蓝舌病毒VP3与VP7蛋白可装配成核心样颗粒

将蓝舌病毒（ＢＴＶ）１３型Ｓ７与Ｌ３基因同时插入杆状病毒双表达载体ｐＥａｓｔＢａｃＤｕａｌ,获得重组杆状病毒ｒｖＢａｃＢＴＶＰ３７。该病毒在昆虫细胞中同时高水平表达ＢＴＶ１３ ＶＰ３与ＶＰ７蛋白,可以高效自动装配出２０面体的６０￣７０ｎｍ空心颗粒。分析表明,所获颗粒为空心的ＢＴＶ核心样颗粒（ＣＬＰ）,其成分为ＶＰ３与ＶＰ７,不含ＢＴＶ其它任何蛋白与核酸。这种装配需要ＶＰ３与ＶＰ７的共同参与,二者缺