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用PCR法和DNA杂交法检测同一献血员的白细胞及血清中的HCMV-DNA,并用ELISA法检测血清中的HCMV-IgM、IgG(测四个不度),连续两年共检测白细胞和血清样本各200人份。PCR法检测白细胞中的HCMV-DNA阳性率分别为63%和70%,DNA杂交法检测的阳性率为42%和50%。PCR法检测血清中的HCMV-DNA的阳性率为49%和53%,DNA杂交法检测的阳性率为33%和39%。H 相似文献
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用做标记的两种酵母菌完整染色体DNA的简化制备法 总被引:3,自引:2,他引:1
已知分子量在小的染色体DNA分子标记是脉冲电泳研究中用以估算样本染色DNA分子大小必不可和的参照物。对用做标记的啤酒酵母和粟酒裂殖酵母完整染色体DNA几种制备方法的比较研究以及改进研究表明,液氮冷冻研磨法,凝胶包埋法以及凝胶包埋破壁法效果均很好,都得到大量染色体DNA,且彼此此间无明显差异。 相似文献
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红树DNA的十六烷基三甲基溴化铵法提取及其随机扩增多态DNA反应 总被引:7,自引:0,他引:7
采用CTAB法提取了耐盐植物红树DNA,所得DNA样品的紫外吸收A258/A280比值为1.89,纯度能符合限制性内切酶酶切、PCR反应以及DNA重组克隆等分子生物学操作的要求.方法简便,容易掌握,较普通的酚-氯仿法有明显的优点.还探讨了以CTAB法制备的红树DNA为模板进行RAPD反应参数的优化组合 相似文献
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通过优化影响ZnCl2沉淀DNA的若干条件,比较ZnCl2和乙醇分别对大分子DNA、寡核苷酸的沉淀效果,证实ZnCl2法是一种具有很多优点的DNA沉淀方法. 相似文献
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DNA芯片制作原理及其杂交信号检测方法 总被引:28,自引:0,他引:28
文章讨论了DNA芯片的制作原理和杂交信号的检测方法。依其结构,DNA芯片可分为两种形式,DNA阵列和寡核苷酸微芯片。DNA芯片的制作方法主要有光导原位合成法和自动化点样法。DNA芯片与标记的探针或DNA样品杂交,并通过探测杂交信号谱型业实现DNA序列或基因表达的分析。适应于DNA芯片的发展,同时出现了许多新型的杂交信号检测方法。主要有激光荧光扫描显微镜、激光扫描共焦显微镜、结合作用CCD相机的荧光 相似文献
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已知分子量大小的染色体DNA分子标记是脉冲电泳研究中用以估算样本染色体DNA分子大小必不可少的参照物。对用做标记的啤酒酵母(Sacharomycescerevisiae)和粟酒裂殖酵母(Schizosacharomycespombe)完整染色体DNA几种制备方法的比较研究以及改进研究表明,液氮冷冻研磨法,凝胶包埋法以及凝胶包埋破壁法效果均很好,都得到大量染色体DNA,且彼此间无明显差异。表明液氮冷冻研磨法和凝胶包埋法制备上述两种酵母菌染色体DNA分子标记是两种理想的方法,可完全取代凝胶包埋破壁法,即缩短处理时间又降低成本。此外,相同的电泳样本块在不同的电泳条件下,所得结果有一定的差异,表明电泳条件是影响电泳结果的一个重要因素 相似文献
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一种分离回收DNA的简捷方法崔晓江,彭学贤(中国科学院微生物研究所,北京100080)从凝胶中分离回收DNA有多种方法,如常用的低熔点胶法,普通胶液氮速冻法等。Bio101公司生产的Geneclean试剂盒使DNA回收避免了苯酚抽提和乙醇沉淀,简单快... 相似文献
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概述DNA测序技术的现状及进展 总被引:2,自引:0,他引:2
概述DNA测序技术的现状及进展邓炜,柴建华(复旦大学遗传研究所,上海200433)关键词DNA测序自1977年Sanger建立“DNA双脱氧链未端终止测序法”以来,DNA序列测定已成为实验室中常规技术。Sanger因此而第二次荣膺诺贝尔奖。由于有了成... 相似文献
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采用一种新的DNA-DNA发校方法-微孔板法对郴毒假单胞菌酵米面亚种及伯克霍尔德氏菌属中11个的DNA-DNA同源性进行测定。结果发现郴毒假单胞菌酵米面亚种与唐菖蒲伯克霍尔德氏菌及椰毒伯克霍尔德氏菌的DNA-DNA同源性均大于75%,建议这3个种应合并为同一个种,命名为唐菖蒲的伯克霍尔德氏菌(Brukholderia gladioli)。 相似文献
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人r型基因工程干扰素中残余DNA的检测 总被引:2,自引:0,他引:2
陈宇光 《生物化学与生物物理进展》1995,22(4):355-357
采用地高辛标记探针,以核酸杂交法检测人r型基因工程干扰素(IFN-r)制品中残余DNA含量,结果表明,自制的二组DNA标准品相应量间显示的色斑相差悬殊,提示高蛋白含量对痕量残余DNA的检测干扰较大,添加IFN-r的DNA标准品比纯DNA标准品更合理,以此测得各样品均符合WHO要求(〈100pg/剂量),方法敏感性为4pg。 相似文献
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我们设计了一种简单电洗脱装置,从琼脂糖胶中回收DNA。该装置由两个带旋盖的小管、两块透析膜和一个凝胶屏障组成。在电场作用下,DNA从凝胶中迁移出来,通过凝胶屏障进入由凝胶屏障和透析膜组成的回收小仓。用微量吸样器收集DNA,乙醇沉淀和清洗。该法DNA的回收率约85%;回收的DNA可用于基因工程常规实验。 相似文献
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非特异性DNA的催化活性(1)——应用酚试剂及FeCl3检测DNA的酯酶活性 总被引:2,自引:0,他引:2
分别应用酚试剂与FeCl3来检测萘酚,表明DNA能催化乙醛萘酯的水解,印证了以前关于DNA具有酯酶活性的结论。FeCl3法可以作为检测DNA酯酶活性的一种定量方法。 相似文献
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细胞培养中支原体污染的检测和去除 总被引:5,自引:0,他引:5
细胞培养过程中的支原体污染相当普遍。如何快速,简便地检测支原体,并且采取有效措施去除支原体一直是细胞工作者们亟待解决的难题。支原体检测方法有培养法,DNA荧光染色法,单克隆抗体免疫荧光法。生化法,DNA探针杂交法,PCR法,支原体去除方法有药物法。免疫法,稀释法,加热法。本文就近年来有关支原体的检测及去除作一综述。 相似文献
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采用核酸分子杂交Southern印迹法,以32P标记的HBVDNA为探针,检测HBsAg阳性母亲引产的40例胎儿的肝、肾组织。结果有2例胎肝和1例胎肾细胞DNA出现大于3.2kb的杂交带,表明HBVDNA已处于整合状态。胎肾细胞基因组中查出HBVDNA整合为首次报道。 相似文献
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报道了分析基因组DNA多态性的方法:未端标记限制性片段的基因组DNA指纹法。通过此方法对莫桑比胸非鲫核DNA进行了初步的分析。结果表明,此方法是一种简单,灵敏,稳定,可变换带复杂程度和有着广泛应用前景的一种鉴定生物基因型的方法。 相似文献
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以大豆为外源DNA供体,用浸种及幼苗期浇灌法和花粉管通道法直接将大豆总DNA导入受体水稻,经常规栽培获得水稻后代种子。采用微量凯氏定氮法和氨基酸自动分析仪进行水稻后代种子糙米的粗蛋白含量和氨基酸含量的测定。结果显示:三组经大豆DNA溶液处理获得的水稻后代种子糙米粗蛋白平均含量分别为16.42%、16.80%和19.87%,与对照组相比有明显提高,统计分析都达到极显的差异(P<0.01);在氨基酸 相似文献