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1.
青扦胚性细胞悬浮培养中影响体细胞胚发生因素的研究 总被引:4,自引:0,他引:4
试验以青扦(Piceawilsoni)的胚性愈伤组织为材料,以改良59基本成分附加24-D1mg/L及KT1mg/L为培养介质,比较了液体悬浮与半固体二种培养方式对胚性愈伤组织增殖和体细胞发生的影响,研究了液体悬浮培养过程中影响体细胞胚发生的因素。结果表明:液体悬浮培养好于半固体培养,它的胚性愈伤组织的生长率为268%,是半固体培养的124倍;体细胞胚的分化率为93%,是半固体培养的22倍;悬浮培养较佳的培养条件为:初始细胞密度为2%(鲜重),蔗糖浓度为20g/L,摇床转速为100r/min,pH为58。经过两个月悬浮培养,将培养物转至1/2改良59附加ABA1mg/L的分化培养基上,3个月后每g培养物上可获得285个正常的子叶期体细胞胚。 相似文献
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李耿光 《植物生理与分子生物学学报》1996,(3)
向日葵籽苗下胚轴原生质体,培养在含有BA0.5mg/L,2,4-D0.5mg/L,NAA0.1mg/L和葡萄糖0.55mg/L的改良Kao培养基中,24~28h后,原生质体开始分裂。包埋在琼脂糖0.6%中的原生质体,培养5d后,分裂频率达95%以上。生长旺盛的小愈伤组织转移到含有2ip0.1mg/L,IAA0.01mg/L,腺嘌呤40mg/L和GA30.01mg/L的Thompson液体培养基上13d后,原生质体诱导的少数愈伤组织发生根分化。 相似文献
3.
陆地棉胚性愈伤组织原生质体的制备,培养及植株再生 总被引:8,自引:0,他引:8
以陆地棉栽培品种“鲁棉6号”下胚轴的胚性愈伤组织为材料,制备并培养原生质体。采用继代培养7 ̄9d、活力旺盛的胚性愈伤组织,在1%纤维素酶、1%果胶酶、0.7mmol/L KH2PO4、2.5mmol/L Ca^2+、0.5mol/L甘露醇、pH5.8、30℃的条件下,具活力的原生质体得率最高。经分离纯化后,原生质体在含有0.45mol/L葡萄糖的K3无机盐、NT有机物并附加0.1mg/L,2,4- 相似文献
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大叶紫花苜蓿愈伤组织原生质体再生植株 总被引:15,自引:0,他引:15
大叶紫花苜蓿下胚轴诱导的愈伤组织在继代培养基上生长快速,易于分散。继代第12d的愈伤组织原生质体的得率为6.5×107/g鲜重。原生质体培养基为SH基本培养基,含有1.0mg/L2,4-0、0.5mg/LBA、2.0g/LCH、2%蔗糖、6%葡萄糖、5mmol/LMES,培养密度为1.0×105/mL。培养至第12d时的原生质体再生细胞植板率为3.7%。由原生质体形成的小愈伤组织在含2.0mg/L2,4-D的MS固体培养基上大量增殖。增殖的愈伤组织转移至2.0mg/L2-ip+0.1mg/LNAA的B5培养基上,形成体细胞胚并发育成完整植株。 相似文献
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杏愈伤组织的超低温保存 总被引:11,自引:1,他引:10
杏茎段在附加1.0mg/L 2,4-D和0.1mg/L BA的改良MS培养基中诱导出愈伤组织,放入10%DMSO+0.5mol/L山梨醇或葡萄糖的冰冻保护剂中,以1C/min的降温速度降至-40℃,停留2h后投入液氮保存,在40℃水浴中化冻。继代培养8次生长15-20d的愈伤组织保存后的相对存活率最高,不同品种基因型保存效果差异很大,保存后的愈伤组织生长量比对照减少,但经过2次继代培养后不再表现差 相似文献
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10.
中麻黄悬浮培养体系的建立 总被引:5,自引:1,他引:4
本文用中麻黄无菌苗为外植体,其切段培养在附加2mg/L2,4-D和0.5mg/L 6 BA的MS培养基上,全部脱分化形成白色疏松愈伤组织。愈伤组织继代培养于MS+0.5mg/L2,4-D+0.2mg/L6BA+0.2mg/L NAA+4%蔗糖的培养某上。以继代培养愈伤组织为材料进行悬浮培养,培养基为附加0.2mg/L2,4-D+0.1mg/L6BA+0.1mg/LNAA+2%蔗糖的MS液体培养基,得到分散性好,细胞形状接近圆形,细胞大小均一,细胞团多由2-30个细胞组成的悬浮培养体系。第三代悬浮培养细胞增长率为0.35g·fw/20ml·d,细胞有丝分裂指数为11.2%。条件培养和高密度接种可缩短延迟期,条件培养不能提高分裂指数,1g/10ml接种密度可使分裂指数提高至21.2%。 相似文献
11.
粉叶小檗愈伤组织的培养及小檗碱的含量 总被引:8,自引:0,他引:8
由粉叶小檗(Berberis pruinosa)的茎、腋芽、叶、实生苗的子叶及胚轴均可诱导出愈伤组织。B5+2,4-D0.5mg/L+KT0.2mg/L培养基对诱导较好,而B5+2,4-D0.5mg/L+KT0.5mg/L对愈伤组织生长较适宜。接种量在0.4-0.8g(20ml培养基)之间较为适宜。经薄层层析-分光光度法、薄层扫描法是鉴定,证明愈伤组织具有合成小檗碱的能力,含量高达1.8148%。 相似文献
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湿地松体细胞胚胎发生和植株再生 总被引:20,自引:0,他引:20
以湿地松的未成熟合子胚为外植体,在附加8mg/L,2,4-D和4mg/L BA的LP培养基上诱导出胚性愈伤组织。在含1mg/L,2,4-D和0.5mg/L BA的培养基上保持并增殖。提高培养基的渗透压后,愈伤组织内大量的胚性胚柄细胞团和早期原胚。 相似文献
13.
14.
海边香豌豆胚性愈伤组织的诱导和体细胞胚发生 总被引:2,自引:0,他引:2
将生长14d的海边香豌豆(Lathyrus maritimus(L.)Bigel)无菌苗下胚轴切成0.5cm左右的片段,置于含有1mg/L2,4-D,0.5mg/L BA和0.5%NaCl的MS培养基中,28d后诱导出胚性愈伤组织。将其转入含有适当浓度2,4-D的MS培养基上,又28d后可得到大量球形胚和心形胚以及极少量鱼雷胚和子叶胚。诱导体细胞胚适合的2,4-D浓度为0.5mg/L。较高浓度的2 相似文献
15.
外源激素对金钱松胚外植体愈伤组织的诱导及其器官发生的调节作用 总被引:5,自引:0,他引:5
金钱松胚外植体在培养过程中由于外源激素的种类和配比的不同而存在着几种发育途径:直接从胚外植体表面分化不定芽;先诱导愈伤组织,再从愈伤组织分化不定芽;还可由愈伤组织分化出胚状体。激素BA对外植体不定芽的诱导起着关键作用。激素2,4-D则诱导愈伤组织,BA与2,4-D配比恰当诱导的愈伤组织分化出体细胞胚状体。 LP’附加低浓度的BA或KT(<0.5mg/L)促进不定芽茎的伸长; LP’附加浓度的IBA(<0.5mg/L)诱导不定根的发生。愈伤组织在基本培养基浓度为 ×LP’或1×LP’的分化培养基上不定芽诱导率相似。 相似文献
16.
海岛棉悬浮培养体细胞胚胎发生 总被引:5,自引:0,他引:5
取海岛棉无菌苗下胚轴作外植体,接种在含有激素2,4-D0.1mg/L和KT0.5mg/L的改良MS培养基上。经近2个月的诱导培养,获得淡黄色或淡灰色、松软、湿润、颗粒状的愈伤组织。将此类愈伤组织接入液体培养基进行悬浮培养,3~4个月后产生体细胞胚,获得各个时期的体细胞胚胎。胚性细胞悬浮系经适当的继代培养可长期保持成胚性。 相似文献
17.
青蒿毛状根合成青蒿素的培养条件研究 总被引:14,自引:0,他引:14
对影响青蒿(ArtemisiaannuaL.)毛状根生长及青蒿素合成的培养条件进行了研究,确定最适的培养条件为:初始pH5.8~6.0,摇瓶转速130~150r/min,摇瓶装液量体积分数为25%,光照周期为16h/d,温度为30℃。在此条件下,经过25d培养获得青蒿素产量为223.3mg/L。 相似文献
18.
高寒藏药—抱茎獐牙菜组织培养研究及其愈伤组织有效成分的测定 总被引:6,自引:0,他引:6
从抱茎獐牙菜的胚轴、幼叶及未成熟种子诱导出愈伤组织并再生植株,试验选用MS、B5和N6三种培养基,其中以附加2.4-D3.0mg/L+6-BA0.5mg/L的MS培养基诱导率最高;以附加6-BA0.5mg/L+NAA0.2mg/L的MS培养基分化苗频率最高;以附加2.4-D2.0mg/L+6-BA0.5mg/L的MS培养基愈伤组织的生长最好。结果表明,外植体,培养基,激素等对愈伤组织诱导、继代和分化均有明显影响。采用高压液相色谱法(HPLC)测定抱茎獐牙菜愈伤组织中齐墩果酸含量的结果表明,愈伤组织中齐果墩酸含量因培养基、继代培养时间的不同而有所差异 相似文献
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将苎麻“浏阳大叶绿”的子叶培养在附加0.5mg/LCPA、0.05mg/LBR的CXW培养基上,可获得淡黄色或浅灰绿色的颗粒状愈伤组织。将愈伤组织转移至附加0.1mg/LCPA、0.05mg/LNAA、1.5mg/LZT的CXW培养基上继代,颗粒状结构非常明显。继续培养在添加2mg/LMet,3g/LYE的上述继代培养基上,可分化出一些相互独立的胚状体,继而发育成为胚状体幼苗。 相似文献
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发根农杆菌A4菌株转化苜蓿悬浮培养物 总被引:6,自引:0,他引:6
将苜蓿无菌苗下胚轴切割后,在附加2mg/L2,4D的MS培养基上诱导愈伤组织。愈伤组织在附加05mg/L2,4D的SH培养基中悬浮培养。悬浮培养物在用于转化之前,用045mol/L甘露醇处理1h,然后用016mol/LCaCl2·2H2O洗涤两次。预处理后的悬浮培养物用SH培养基悬浮(10ml/g悬浮培养物),再加02ml农杆菌悬浮液,于25±2℃共培养2d。共培养的悬浮培养物洗涤后在附加05mg/L羧苄青霉素的无激素培养基上选择培养。悬浮培养天数、悬浮培养基激素组成和选择培养基种类明显影响转化频率。纸电泳分析表明70%的转化体可以合成农杆碱和甘露碱。染色体观察显示转化组织细胞存在严重的数目和结构变异 相似文献