农杆菌介导红江橙遗传转化的研究初报

用红江橙实生苗的上胚轴为材料 ,初步研究以根癌农杆菌介导的 GUS基因转化。结果表明 :以卡那霉素作为选择试剂进行选择培养时 ,Km浓度为 5 0 mg/L;外植体以平放为好 ;抑菌剂选择头孢霉素较好。GUS基因瞬时表达检测 ,70 .4%的外植体呈阳性反应 ;GUS基因稳定表达检测 ,在获得的 1 2株抗性植株中 ,GUS反应呈阳性所占比例为 1 6.7%。     

沙田柚不同外植体离体培养与植株再生的研究

利用组织培养进行柑桔良种的快速繁殖可以克服常规方法费时的缺点 ,为进一步进行无病原体苗木繁育、诱变育种及遗传转化创造有利条件。目前我国开展此项工作较为广泛 ,已先后在红江橙 [1 ]、柠檬 [2 ]、金柑 [3]、甜橙 [4]及蕉柑 [5]等柑桔类中建立了组织培养的再生体系 ,但在柚类中相关的研究较少。笔者以沙田柚为材料 ,在离体培养条件下 ,成功诱导上下胚轴、根段及子叶的不定芽形成和植株再生。1 　材料与方法1 .1 　植物材料沙田柚种子 ( Citrus grandis Osbeck cv.Shatian Yu)经表面消毒后黑暗培养无菌苗 ,当苗长至 2 0 d左右时 ,将上…     

成年沙田柚树试管嫁接及微繁殖的研究

分别以两类沙田柚侧芽为接穗、酸柚为砧木进行了试管嫁接,结果表明:不同嫁接方式、接穗大小以及不同激素处理均直接影响到试管嫁接成活率.对大田侧芽而言,接穗大小以茎尖为宜,1.0mg/LGA3或0.5mg/L6-BA处理效果较佳,嫁接成活率分别达50%和30%;对侧枝沙培萌发的侧芽而言,接穗大小以茎尖 1个节间为宜,2.0mg/LGA3或0.5mg/L6-BA处理效果较佳,嫁接成活率分别达90%和80%.在相同条件下,后者的嫁接成活率一般明显高于前者.两种沙田柚嫁接苗的试管微繁殖没有明显区别,在MS 6-BA0.1mg/L培养基上均可分化不定芽,继代的嫁接成活率可达90%以上.     

吖啶橙失活处理应用于不对称融合初步探讨

马铃薯栽培种和野生种叶肉原生质体经过吖啶橙（ＡＯ）处理后,暗培养两天,再光照４ｈ而失活．失活程度取决于ＡＯ处理时间、ＡＯ浓度、光照时机等．四倍体失活浓度高于二倍体,处理后马上光照失活效果最强烈,８ｄ后光照其小细胞团同未光照处理相差不大。ＡＯ失活的栽培种ＮＯ７同罗丹明６Ｇ（Ｒ６Ｇ）失活的Ｓｏｌａｎｕｍｂｕｌｂｏｃａｓｔａｎｕｍ融合后可以发生代谢互补恢复分裂,已得到假定的杂种小愈伤组织．     

马铃薯野生种叶肉原生质体培养及其植株再生（简报）

马铃薯野生种叶肉原生质体培养及其植株再生（简报）何亚文,李耿光,张兰英（中国科学院华南植物研究所,广州５１０６５０）ＭＥＳＯＰＨＹＬＬＰＲＯＴＯＰＬＡＳＴＣＵＬＴＵＲＥＡＮＤＰＬＡＮＴＬＥＴＲＥＧＥＮＥＲＡＴＩＯＮＦＲＯＭＷＩＬＤＳＰＥＣＩＥＳＯＦＰ...     

向日葵下胚轴原生质体高频率愈伤组织形成与根发生

向日葵籽苗下胚轴原生质体,培养在含有ＢＡ０．５ｍｇ／Ｌ,２,４－Ｄ０．５ｍｇ／Ｌ,ＮＡＡ０．１ｍｇ／Ｌ和葡萄糖０．５５ｍｇ／Ｌ的改良Ｋａｏ培养基中,２４～２８ｈ后,原生质体开始分裂。包埋在琼脂糖０．６％中的原生质体,培养５ｄ后,分裂频率达９５％以上。生长旺盛的小愈伤组织转移到含有２ｉｐ０．１ｍｇ／Ｌ,ＩＡＡ０．０１ｍｇ／Ｌ,腺嘌呤４０ｍｇ／Ｌ和ＧＡ３０．０１ｍｇ／Ｌ的Ｔｈｏｍｐｓｏｎ液体培养基上１３ｄ后,原生质体诱导的少数愈伤组织发生根分化。     

芥蓝下胚轴离体培养及高频率植株的再生

三个芥蓝品种下胚轴离体植株再生的条件的研究结果表明：下胚轴切口处可直接诱导出芽,诱导“早花尖叶芥蓝”、“中花尖叶芥蓝”和“迟花尖叶芥蓝”直接出芽的最佳激素组合分别为2．0mgL-1BA,0．3mgL-1NAA＋2．0mgL-1BA,0．5mgL-1NAA＋2．0mgL-1BA,其相应的芽发生频率分别为84．6％,86．7％,93．3％。诱导芽发生的最适蔗糖浓度是1％。培养基中加入4．0mgL-1AgNO3和500mgL-1MES可显著提高芽再生频率。再生芽在MS附加0．1mgL-1NAA的培养基上诱导生根形成完整植株。离体再生苗与种子萌发实生苗田间生长外形差别不大,但长势稍慢。     

可乐茄叶肉原生质体培养再生植株

本文报道茄属果树可乐茄（ＳｏｌａｎｕｍｑｕｉｔｏｅｎｓｅＬａｍ．）叶肉原生质体的分离、培养及植株再生。幼嫩叶片原生质体经酶游离、纯化后,以１×１０４个／ｍｌ密度培养于稍加改良Ｋ８ｐ（附加２,４－Ｄ０．５ｍｇＬ（－１）、ＮＡＡ１．０ｍｇＬ（－１）和ＢＡ０．５ｍｇＬ（－１））的培养基中,三天后开始分裂,一周分裂３—４次。一个月形成小细胞团,植板率为０．１—０．２％,小细胞团转培养于ＭＳ＋２,４－Ｄ０．５ｍｇＬ（－１）上增殖后进行分化。原生质体来源愈伤组织在ＩＡＡ（０．１—１．０ｍｇＬ（－１））与ＢＡ或ＺＴ组合的培养基中能诱导器官发生,芽分化率最高可达４２．９％;但ＩＡＡ、ＢＡ、ＺＴ三者一起使用未见任何器官分化。小芽在ＭＳ＋ＩＡＡ０．２ｍｇＬ（－１）中生根成植株。可乐茄叶肉原生质体的植株再生,可应用于育种和茄属植物遗传工程研究。     

马铃薯叶肉原生质体再生植株的研究

马铃薯两个品系小叶子x多子白和乌盟601的叶肉原生质体在原生质体培养基中诱导出愈伤组织,叶肉原生质体来源的愈伤组织转移到MS＋2mg/1ZT+0.1mg/1 IAA培养基中,培养至70天以后,开始发生芽的分化,待芽生长到2－3cm高度时,转入MS＋0．05mg/1 NAA培养基中,很快出根长成完整植株,带1－2片叶的茎段移栽入灭菌的混合土壤中生长并结出薯块。     

农杆菌介导的枳壳转化系统建立研究初报

以枳壳为对象 ,进行了农杆菌介导的上胚轴转化系统建立研究 ,得到了携带柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因的枳壳转化植株。研究表明 :枳壳各类外植体中 ,上胚轴是较好的转化材料 ;上胚轴出芽部位主要在形态学上端。以卡那霉素为选择剂 ,外植体水平面放置时 ,选择剂的剂量是 50～ 70mg/ L。转化研究中发现感染液中乙酰丁香酮 10 0μmol/ L的加入促进转化外植体 Gus表达阳性率的提高。延迟 1a的选择培养 ,有助于 Gus阳性芽的增多。所得 Gus阳性无性系经 Southern blot杂交检测 ,证明外源基因已稳定整合到了植物基因组中 ,所得 Gus阳性植株确为携带柑桔衰退病病毒外壳蛋白基因的转化植株