适于青蒿芽生长和青蒿素积累的光、温和培养方式探讨

探讨了光照、温度和培养方式对青蒿芽生长和青蒿素合成的影响。适宜芽生长和青蒿素积累的光照强度约为３ ０００ ｌｘ,照光时间为２０ ｈ／ｄ ;芽生长和青蒿素积累的最适温度分别为２５ ℃和３０ ℃,通过先２５ ℃（２５ ｄ）后３０ ℃（５ ｄ） 的温度转变二步培养法可以提高青蒿素的产量;青蒿芽生长和青蒿素积累的最佳培养方式为非浸没低转速摇瓶培养。     

适于青蒿芽生长和青蒿素积累的光,温和培养方式探讨

探讨了光照,温度和培养方式对青蒿芽生长和青蒿素合成的影响。适宜芽生长和青蒿素积累的光照强度约为３０００ｌｘ,照光时间为２０ｈ／ｄ,芽生长和青蒿素积累的最适温度为２５℃和３０℃,通过先２５℃（２５ｄ）后３０℃（５ｄ）的温度转变二步培养法可以提高青蒿素的产量;青蒿芽生长和青蒿素积累的最佳培养方式为非浸没代转速摇瓶培养。     

利用新型雾化生物反应器培养青蒿不定芽生产青蒿素

利用新型的超声雾化内环流生物反应器进行青蒿（ＡｒｔｅｍｉｓｉａａｎｎｕａＬ．）不定芽多层培养生产青蒿素。在新型内环流超声雾化生物反应器中,营养雾沿中心导流筒上升并由其顶端和各开孔处溢出后从环隙落下,２～３ｍｉｎ营养雾充满整个反应器。青蒿不定芽在此反应器中生长健壮,形态正常,无玻璃化现象产生,在培养后期,青蒿不定芽长满整个培养空间,部分不定芽可生根。当雾化周期为３ｍｉｎ／９０ｍｉｎ（雾化时间／间隔时间）,通气量为０．５Ｌ／ｍｉｎ时,经２５ｄ分批培养,青蒿素产量为４６．９ｍｇ／Ｌ,分别为固体培养和摇瓶培养的２．９和３．２倍。     

黄花蒿培养细胞中青蒿素合成代谢的体外调节

黄花蒿培养细胞通过两步培养积累青蒿素．第１步在含有０．２～０．４ｍｇ／Ｌ６－苄基氨基嘌呤（６－ＢＡ）和３～４ｍｇ／Ｌ吲哚乙酸（ＩＡＡ）的Ｎ６培养基中进行细胞的增殖培养,第２步将培养好的细胞转入含０．２～０．４ｍｇ／Ｌ６－ＢＡ和０．２～０．４ｍｇ／ＬＩＡＡ的改良Ｎ６培养基中进行青蒿素的合成．青蒿素的合成量为１９０μｇ／ｇ干细胞左右．当在第２步培养中加入青蒿素合成前体青蒿酸,青蒿素合成量比仅靠激素诱导提高了３倍多．青蒿素的合成途径是植物固醇合成途径的分支途径,当在青蒿素合成过程即第２步培养中加入固醇生物合成抑制剂双氯苯咪唑和氯化氯胆碱处理,可使代谢向合成青蒿素的方向移动,青蒿素合成量明显提高．经２００ｍｇ／Ｌ氯化氯胆碱处理２ｄ,黄花蒿细胞合成青蒿素量为３７２μｇ／ｇ干细胞;经２０ｍｇ／Ｌ双氯苯咪唑处理４ｄ,黄花蒿细胞合成青蒿素量为１５４０μｇ／ｇ干细胞,比靠激素诱导提高了８倍多,与诱导脱分化细胞的黄花蒿叶中所含的青蒿素（３０００μｇ／ｇ干细胞）处于同一个数量级．以上结果表明：在通过植物激素调节可以合成青蒿素的黄花蒿培养细胞中,缺乏青蒿素合成前体是青蒿素合成量低的重要原因．因此,在青蒿素合成的过程中通过体外调节,     

内循环气升式生物反应器培养甘草细胞

自行设计研制了７Ｌ,９Ｌ及２５Ｌ内循环气升式生物反应器,并应用于甘草细胞的放大培养研究。在接种量为８％（Ｗ／Ｖ）通气率为０．２—０．２５ｖｖｍ的条件下,甘草细胞在反应器中生长迅速。其中在９Ｌ反应器中生长最好,最高生物量达１６．２５ｇ／Ｌ,生长速率达０．９ｇ／Ｌ．ｄ,均高于摇瓶培养。培养过程中ｐＨ值、溶氧状况通过电极自动显示记录,说明设计的气升式生物反应器适合于甘草细胞的大规模培养。     

青蒿素在露水草毛状根中的生物转化

露水草毛状根培养系中加入青蒿素培养８ｄ后,青蒿素转化去氧青蒿素。根据光谱数据,对去氧青蒿素的结构进行了鉴定。结果表明,通过水草毛状根能将青蒿素进行选择性还原为去氧青蒿素。     

黄孢原毛皮革菌降解苯胺的工艺研究

通过正交试验优化筛选了适合黄孢原毛皮革菌降解苯胺的适宜培养基和摇瓶培养降解条件。结果表明：其适宜降解的液体培养基组成为：蔗糖20g／L,可溶性淀粉20g／L,(NH4)2SO4l0g／L,Mn^2 lμmol／L,Tween-800．3％,蛋白胨30g／L。适宜降解的摇瓶培养条件为：接种量为20％、pH为7．0、温度为30℃、培养时间为12d．此条件下的苯胺最高降解率可达95．5％。     

灵芝液体发酵条件的研究

本文采用液体摇瓶培养法,对灵芝（ＧａｎｏｄｅｒｍａＬｕｃｉｄｕｍ）液体发酵的适用温度、摇瓶装量、摇瓶转速、培养基初始ｐＨ、碳、氮源及其最适浓度进行了探讨。结果表明,灵芝液体发酵的适用温度为２５℃,摇瓶装量为１００～１２０ｍｌ／５００ｍｌ三角瓶,摇瓶转速为１２０～１５０ｒｐｍ,培养基初始ｐＨ为４５～５０,适用碳,氮源分别是玉米粉,黄豆饼粉,其最适浓度分别为３％、２５％     

液化沙雷氏菌胞外脂肪酶产生条件的研究

新分离的一株液化沙雷氏菌（Ｓｅｒｒａｔｉａｌｉｑｕｅｆａｃｉｅｎｓ）能产生大量胞外碱性脂肪酶,本文在摇瓶发酵水平上考察了培养基组成、培养条件等因素对其生成脂肪酶的影响。在优选条件下,即培养基组成为（％）玉米油１．２５,豆饼粉２．０,蛋白胨１．０,酵母膏０．２,Ｋ_２ＨＰＯ_４０．２,ＭｇＳＯ_４·７Ｈ_２Ｏ０．１,初始ｐＨ为７．２５时,２８℃,１５０ｒ／ｍｉｎ旋转摇床振荡培养４０ｈ,该菌株的发酵液酶活达到４３ｕ／     

Acetobacter xylinum生产纤维素的最适培养基成分

探索出胶醋杆菌在摇瓶培养最适培养基成分为蛋白胨浓度１．０％、酵母膏０．５％、葡萄糖浓度２．０％、柠檬酸０．１１５％、乙醇１％、Ｎａ２ＨＰＯ４０．５％,ｐＨ６．０,１６０ｒ／ｍｉｎ的条件下进行摇瓶培养,细菌纤维素最大产量为７．５５ｇ／ｌ。     

红豆杉细胞培养的研究

从红豆杉（Ｔａｘｕｓｃｈｉｎｅｎｓｉｓ（Ｐｉｌｇ）Ｒｅｈｄ）的嫩茎及针叶诱导的出愈伤组织,对愈伤组织培养及细胞悬浮培养进行了研究,利用ＨＰＬＣ方法测定它们合成紫杉醇的能力,发现了能够提高培养细胞生长速率及紫杉醇含量的一些因子,红豆杉愈伤组织及悬浮培养细胞的生长速率已分别达到０．２５ｇ／Ｌ．ｄ和０．２８ｇ／Ｌ．ｄ。而他们的紫杉醇含量分别是０．００２６％和０．０１２％。     

玫瑰茄悬浮细胞合成花青素的光效应研究

光照对悬浮培养的玫瑰茄细胞生物量无影响。随着光照强度增大,玫瑰茄细胞合成花青素的量增加,光照强度３１．０ｗ／ｍ２为饱和光照强度,超过该强度,玫瑰茄细胞合成花青素的量不再进一步增加;可见光中蓝光（４２０～５３０ｎｍ）是促进玫瑰茄细胞合成花青素最有效单色光,光强为３０．０ｗ／ｍ２,接种量为０．２ｇ湿细胞的５０ｍｌ培养液经１６ｄ培养,花青素产量为８．９７ｍｇ／５０ｍｌ,高出相同光照强度全色光下的６．５３ｍｇ／ｍｌ;黄光和绿光分别有一定的促进作用。当黑暗下的培养时间不超过８ｄ,后期经过不少于８ｄ的光照可以诱导出和全程光照相当的花青素产量,分别为６．６４和６．７２ｍｇ／５０ｍｌ（总培养时间不少于１６ｄ）。当黑暗下培养时间超过１２ｄ,由于营养成分消耗,光照延长,花青素产量也无法提高,添加１０ｍｌ新鲜培养基再进行光诱导,花青素产量可以提高（６．７５ｍｇ／５０ｍｌ）。     

利用气升式内环流生物反应器培养青蒿毛状根生产青蒿素

利用自制的气升式内环流生物反应器进行青蒿（ArtemisiaannuaL．）毛状根多层培养生产青蒿素。毛状根培养物在培养过程中均匀分布在生物反应器的筛网间，或以不锈钢网为附着点向四周生长，在25℃和12h／d光照周期下，经20d分批培养获得生物量干重22．57g／L，青蒿素产量374．4mg／L，并对培养过程中蔗糖、磷酸盐、硝酸盐和氨盐消耗的动力学进行了分析。     

芽孢杆菌M50产生β—甘露聚糖酶的条件研究

从土壤中分离到９株产生β－甘露聚糖酶的芽孢杆菌（Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．）。Ｂａｃｉｌｌｕｓ ｓｐ．Ｍ５０２５０ｍＬ三角瓶摇瓶培养试验,以４％的魔芋粉为碳源,１．０％（ＮＨ４）２ＳＯ４为氮源,０．３５％Ｎａ２ＣＯ３,３０～３４℃培养６０ｈ产酶达到高峰。酶活力为１８０～２２０ｕ／ｍＬ。１００Ｌ罐发酵,在３０～３２℃,１：０．７５ｖｖｍ通气量,２００ｒ／ｍｉｎ条件下,发酵液酶活力高达３３０ｕ／ｍＬ。     

用无血清培养基在填充床生物反应生产rHuEPO

在填充床生物反应器用含５％ＦＢＳ的ＤＭＥＭ：Ｆ１２培养基培养产重组人促红细胞生成素（ｒＨｕＥＰＯ）的细胞Ｃ２８￣１０ｄ后,使用自制的无血清生产培养基（ＳＦＭ－ｐ）生产ｒＨｕＥＰＯ。ＳＦＭ－ｐ培养基既能维持细胞生长,又能生产ＥＰＯ,也便于纯化分离ｒＨｕＥＰＯ。使用填充床生物反应器培养细胞,能维持培养２０￣２５ｄ,ｒＨｕＥＰＯ表达水平达１２￣２８．４ｍｇ／Ｌ之间,反应器的产率达到７１．０ｍｇ／Ｌ／ｄ,     

榄香烯对急性血瘀模型大鼠血液流变性的影响

本文观察了榄香烯对急性血瘀模型大鼠血液流变性的影响。实验结果表明：榄香烯６．２５－２５ｍｇ／ｋｇ／ｄ,ｉｐ×７ｄ,可使血瘀模型鼠的高低切变率全血粘度和还原粘度、血浆粘度、血沉、红细胞聚集指数、纤维蛋白原及红细胞电泳时间等显著降低（Ｐ＜０．０５、Ｐ＜０．０１）。提示榄香烯有活血化瘀作用     

金针菇FV088菌株液体培养工艺的研究

通过单因子试验统计分析,优化筛选了适于金针菇（Flammulinavelutipes）FV088的适宜培养基和摇瓶培养条件,结果表明,其适宜的液体培养基组成为：5.0％玉米粉,2．0％鼓皮,0．L％KH₂PO₄,0．05％MgSO₄·7H₂O,10μgVB₁／100ml,50μgVB₂／100ml;适宜的摇瓶培养条件为：培养基的起始pH6．0～7．0,500ml     

全缘金粟兰的组织培养和繁殖

１植物名称全缘金粟兰（Ｃｈｌｏｒａｎｔｈｕｓｈｏｌｏｓｔｅｇｉｕｓ）。２材料类别顶芽、带节的茎段。３培养条件（１）芽繁殖培养基：ＭＳ＋６－ＢＡ２．０～３．０ｍｇ·Ｌ－１（单位下同）＋ＩＢＡ０．２～０．３;（２）生根培养基：ＭＳ＋ＩＢＡ０．５。培养基中添加３％蔗糖,０．８％琼脂,ｐＨ５．８。培养温度为２５～２８℃,光照１２ｈ·ｄ－１,光照度约为１５００ｌｘ。４生长与分化情况４．１无菌材料的获得以芽尖和带腋芽的茎段为外植体,经消毒后,在超净工作台上,除掉部分叶片,将其接种于芽繁殖培养基上,经６０ｄ左…     

彩绒革盖菌漆酶及多酚氧化酶活性研究

测定了彩绒革盖菌在ＰＤＹ液体培养基中的漆酶和多酚氧化酶活性。在３０℃,１１０ｒ／ｍｉｎ,恒温振荡培养条件下,漆酶第９ｄ达产酶高峰,最高酶活３９５．６ｕ;多酚氧化酶第１４ｄ达产酶高峰,峰值５４９．０ｕ;酶作用的最适酸碱度为：漆酶ｐＨ４．６,多酚氧化酶ｐＨ５．０;最适作用温度漆酶为２５℃,多酚氧化酶为３０℃;Ｋ＾＋、Ｚｎ＾２＋等离子对漆酶有激活作用,Ｍｎ＾２＋、Ｂａ＾２＋、Ｍｇ＾２＋等离子对多酚氧化酶     

用国产微孔玻璃珠初步纯化人u-PA

用国产微孔玻璃珠从ＣＤ－１工程细胞株培养上清中纯化ｕ－ＰＡ,摸索了微孔玻璃珠结合ｕ－ＰＡ的条件和洗脱方法,比较了硫酸铵线性梯度洗脱或２５％乙二醇洗脱ｕ－ＰＡ活性的结果,最后确定洗脱的条件为０．２５ｍｏｌ／ＬＴｒｉｓ、１～２ｍｏｌ／Ｌ（ＮＨ４）２ＳＯ４、ｐＨ９．３。经此一步纯化,ｕ－ＰＡ比活性达到１５３２９ＩＵ／ｍｇ,回收率７８％,还原条件下ＳＤＳ－ＰＡＧＥ分子量为５２×１０３的单链ｕ－ＰＡ占７４％。