茶氨酸制备工艺研究

研究了一种从提取茶多酚后的残留液中提纯茶氨酸的制备工艺;首先通过ZTC+1型天然澄清剂对茶多酚生产废液絮凝处理,随后应用一种特制的弱极性大孔树脂(JAD-1000)对处理液进行初步分离,制备质量分数在50%以上的茶氨酸粗品;结果表明絮凝处理,不仅对蛋白质去除率达80%以上,对果胶等杂质也有很好的去除效果(去除率达32.0%),杂质总去除率达36.2%,同时对茶氨酸的回收率达到98%以上;JAD-1000初步分离可得质量分数在53%以上的茶氨酸,回收率也达到78%以上,醇洗馏份中基本没有茶氨酸。     

离子交换法提取茶氨酸的研究

本研究应用国产７３２阳离子交换树脂,从茶愈伤组织浸提液中提取茶氨酸。通过静态、动态试验,对洗脱液的ｐＨ、离子强度、样液浓度和流速等因素进行了考察,比较在不同条件下,树脂对茶氨酸的吸附情况。结果表明用ｐＨ９．１８,２／１５ｍｏｌ／ＬＮａ２ＨＰＯ４作洗脱液,控制流速在０．７ＢＶ／ｈ,可分离到茶氨酸,得率７０％。     

HD-8树脂分离天花粉中的L-瓜氨酸

本文研究了用HD8阳离子交换树脂从天花粉中分离L瓜氨酸的工艺条件。采用HD8阳离子交换树脂从天花粉水提取液中交换L瓜氨酸,该树脂对L瓜氨酸的静态交换容量为50.8mg·mL1。在流速为3BV·h1,提取液中L瓜氨酸浓度为9.64mg·mL1时,HD8树脂对L瓜氨酸的动态交换容量为46.8mg·mL1树脂,其动态平衡时间为12min。NH4OH洗脱HD8树脂载荷的L瓜氨酸效果好。控制洗脱液流速为5BV·h1,用8BV0.25mol·L1的NH4OH即可完全洗脱L瓜氨酸。采用HZ803大孔径吸附树脂吸附L瓜氨酸洗脱液中的色素,真空浓缩,并在pH=5.97、4℃条件下结晶L瓜氨酸,其收得率为7.24%,其中L瓜氨酸含量为82.7%。与等电点法相比,产品纯度提高2.36倍。     

应用树脂吸附分离制取茶多酚

从茶中分离制取天然抗氧化剂茶多酚,现行工业化生产多采用有机溶剂萃取和金属盐沉淀法,这两种方法,工艺繁琐,有机溶剂、金属盐或酸、碱损耗大,严重污染环境,提取率低、得率低、成本高、销售困难。笔者采用大孔吸附树脂层析法从茶中分离,纯化茶多酚,制得低含咖啡碱的茶多酚粗制品,得率为１８％～２１％,纯度≥７０％,ＥＧＣＧ＞２０％,咖啡碱＜２％。吸附树脂具有表面积大,吸附量大,吸附与洗脱高峰集中,不用或少用除乙醇外的有机溶剂,洗脱与再生容易,成本低,得率高等优点,大有开发前景。     

阳离子交换树脂对甜菜碱的吸附特性研究

目的：阐明阳离子交换树脂吸附甜菜碱的机理和特性,获得从甜菜废糖蜜中提取分离甜菜碱的工艺路线。方法：采用雷氏盐比色法测定甜菜碱含量,根据吸附等温线的图形拟合方程。结果：阳离子交换树脂吸附甜菜碱是指数型的吸附等温线类型,并且可以与Freundlich方程很好地拟合。采用阳离子交换树脂从废糖蜜中分离甜菜碱,树脂动态吸附量最大为40mg/ml,吸附流速为40ml/min,盐酸洗脱浓度为1.5mol/L,洗脱速度为30ml/min进行解吸时,解吸率为33%,甜菜碱提取率为58%。结论：阳离子交换树脂吸附甜菜碱的特性为从废糖蜜中提取分离甜菜碱提供了理论依据,使工艺操作简单、易行。     

离子交换树脂纯化还原型谷胱甘肽(GSH)的研究

研究005×7阳离子交换树脂分离纯化谷胱甘肽(GSH)的工艺条件。考察了005×7阳离子交换树脂对GSH的静态吸附量,洗脱时铵离子浓度、洗脱流速等对分离纯化产品GSH的影响。根据试验结果确定最佳工艺条件为:最适上柱pH为3.0,洗脱流速为:2.4ml/min,洗脱液为0.5mol/L的NH4Cl溶液;收集洗脱液,浓缩,乙醇沉淀,真空冷冻干燥,用高效液相色谱检测产品GSH,所得GSH纯度为60.8%,GSH的平均收得率为61.3%。说明此分离纯化GSH工艺可行。     

沉淀法从茶叶中提取茶氨酸

茶叶浸提液分别用1%壳聚糖和D101大孔吸附树脂去杂后,用碱式碳酸铜沉淀茶氨酸。茶氨酸铜盐用1mol/L硫酸解析,分别用H_2S、Ba(OH)_2除去Cu~(2 )、SO_4~(2 )后,浓缩重结晶得到茶氨酸,提取率34%,纯度99．28%。     

发酵液中L-色氨酸分离纯化工艺研究

通过静态吸附实验,考察了温度、pH值对001×7阳离子交换树脂平衡吸附量的影响,并测定了吸附动力学曲线。通过动态实验,测定了动态吸附曲线和洗脱曲线。最后确定了001×7阳离子交换树脂分离纯化L-色氨酸的最佳工艺条件:用001×7阳离子交换树脂吸附L-色氨酸,以浓度为2 mol.L-1氨水进行洗脱,收集的流份经D315阴离子交换树脂脱色,浓缩结晶后得L-色氨酸成品,总提取率为73.0%。     

大孔吸附树脂分离富集苜蓿皂甙的研究

本项工作以对苜蓿皂甙的吸附量和解吸率为指标筛选大孔吸附树脂。研究结果表明,X-5吸附树脂具有较好的吸附性能和解吸效果。研究应用正交试验方法进一步对大孔吸附树脂分离纯化苜蓿皂甙的工艺条件进行试验分析,确定苜蓿皂甙分离富集的最佳操作条件为:上样浓度8mg/mL,色谱柱的径高比1∶7,药材-树脂比例1∶3;吸附完全后,先以水洗脱,除去杂质,再以50%乙醇洗脱,可以得到纯度较好的苜蓿皂甙。     

大孔吸附树脂分离纯化番石榴叶总黄酮的研究

考察大孔吸附树脂吸附分离番石榴叶总黄酮的工艺条件.以静态饱和吸附量、静态洗脱率、动态饱和吸附量、动态洗脱率为考察指标,比较了D101、AB-8两种大孔树脂分离纯化番石榴叶总黄酮的优劣.又以总黄酮回收率为指标,对最佳树脂吸附工艺参数进行了研究.在考察的2种树脂中,AB-8型树脂最适于番石榴叶总黄酮的分离纯化,其工艺条件为:4倍树脂体积50%乙醇洗脱,速度2mL/min.树脂可重复使用4次.其平均总黄酮回收率为87.47%.所得总黄酮纯度为74.03%     

茶叶中咖啡因和茶多酚提取技术研究

本文研究茶叶品种和质量、提取剂种类和萃取溶剂量对咖啡因和茶多酚提取得率、提取率和纯度的影响,结果表明:茶叶质量高,咖啡因和茶多酚的含量、得率和纯度就高。95％乙醇提取咖啡因和茶多酚的得率、提取率和纯度最高。1％氧化钙水溶液单纯提取咖啡因的得率、提取率和纯度较高。增加萃取次数和萃取溶剂量可提高咖啡因和茶多酚的得率,对产品纯度没有影响。     

三叶虫茶营养成分的分析与评价

通过与老鹰茶虫酿茶和一些品牌绿茶的对比,对三叶虫茶的一般营养成分、茶的生化特征、氨基酸和脂肪酸组成、维生素、矿物质元素进行分析和营养评价,为开发三叶虫茶提供科学依据。方法:用常规方法分析其主要营养素和生化成分;用氨基酸分析仪分析氨基酸组成,并采用WHO推荐的蛋白质模式对蛋白质进行营养评价;维生素和矿物元素含量直接说明其营养功能。三叶虫茶含有36.44%的水浸出物,16.28%的茶多酚、1.39%的氨基酸;氨基酸的种类较为齐全,总含量与传统茶叶相当,9种人体必需氨基酸的总量达到0.722%,是传统茶叶的3~12倍,特别是赖氨酸、蛋氨酸、苏氨酸、色氨酸的含量远远高于常规茶叶,而这4种氨基酸在一般植物食品中都是限制性氨基酸;但其茶氨酸、天门冬氨酸、谷氨酸的含量远远低于常规茶叶,而这3种氨基酸对改善茶汤滋味具有重要作用;三叶虫茶中脂肪酸含量为1.23%,其中多不饱和脂肪酸占35.25%;钙、磷、镁含量较高,铁、铜、锌、锰等的含量丰富;维生素C和维生素E含量与普通茶叶相当。三叶虫茶营养丰富,具备常规茶叶的一些生化特征,可作为茶饮料的代用品;若与普通茶叶混合使用,能在滋味和营养价值上实现互补。     

Effect of shade treatment on theanine biosynthesis in Camellia sinensis seedlings

Theanine synthetase (TS) is a key enzyme involved in theanine biosynthesis. In our recent study, it has been revealed that theanine biosynthesis derived from nitrogen metabolism in tea (Camellia sinensis) plants can be influenced by shading treatment. The expression patterns of CsTS protein in the roots and shoots of tea seedlings were examined by western blot using a self-prepared polyclonal antibody with high specificity and sensitivity. The effect of long-term shade treatment on the levels of theanine synthesis was also investigated using roots and shoots of tea seedlings. Levels of theanine and total free amino acids gradually increased in shoots, reaching their maximum after 22 days of treatment (DOT). The immunoblotting analysis suggested that CsTS protein levels increased gradually up to 22 DOT and expression remained at a high level, except after 1 DOT where levels were low in both roots and shoots. The increased theanine concentration we observed in the shading treatment may be due to increased nitrogen assimilation and reduced theanine catabolism under shade conditions.     

Nonaqueous fractionation and overexpression of fluorescent‐tagged enzymes reveals the subcellular sites of L‐theanine biosynthesis in tea

l ‐Theanine is a specialized metabolite in the tea (Camellia sinensis) plant which can constitute over 50% of the total amino acids. This makes an important contribution to tea functionality and quality, but the subcellular location and mechanism of biosynthesis of l ‐theanine are unclear. Here, we identified five distinct genes potentially capable of synthesizing l ‐theanine in tea. Using a nonaqueous fractionation method, we determined the subcellular distribution of l ‐theanine in tea shoots and roots and used transient expression in Nicotiana or Arabidopsis to investigate in vivo functions of l ‐theanine synthetase and also to determine the subcellular localization of fluorescent‐tagged proteins by confocal laser scanning microscopy. In tea root tissue, the cytosol was the main site of l ‐theanine biosynthesis, and cytosol‐located CsTSI was the key l ‐theanine synthase. In tea shoot tissue, l ‐theanine biosynthesis occurred mainly in the cytosol and chloroplasts and CsGS1.1 and CsGS2 were most likely the key l ‐theanine synthases. In addition, l ‐theanine content and distribution were affected by light in leaf tissue. These results enhance our knowledge of biochemistry and molecular biology of the biosynthesis of functional tea compounds.     

大规模茶叶细胞悬浮培养茶氨酸合成工艺优化研究

以婺源绿茶为材料进行茶叶愈伤组织悬浮培养,采用正交实验设计进行了大规模茶叶细胞悬浮培养合成茶氨酸工艺条件优化研究。结果显示,NH4+/NO-30.0/60.0mmol/L、K+100.0mmol/L、Mg++3.0mmol/L、H2PO-43.0mmol/L、蔗糖30.0g/L、水解酪蛋白2.0g/L条件下,茶叶细胞生长量(速率)和茶氨酸积累量均达到最高值;提高培养基中蔗糖和水解酪蛋白浓度可延长细胞对数生长期和稳定生长期,从而有利于茶氨酸积累;H2PO-4浓度主要影响细胞生长速率和茶氨酸积累速率的同步性,低H2PO4-浓度环境中茶氨酸积累速率峰值滞后于细胞增长速率峰值,高H2PO4-浓度环境中早于细胞生长速率峰值出现时间;K+和Mg++对细胞生长的影响不明显,但影响茶氨酸合成酶活性,维持适量的K+和Mg++有利于茶氨酸积累。先加入一定量盐酸乙胺再每天进行少量补充,茶氨酸合成量比一次性加入的效果要好。从生产效率考虑,培养周期以19～22d为宜。     

白莺山古茶的化学成分分析与栽培茶树的起源

应用高压液相色谱(HPLC)技术,对白莺山古茶的大理茶素、儿茶素类、茶掊素、没食子酸、咖啡因和茶氨酸的含量进行分析.同时,应用分光光度法测定茶多糖和茶多酚含量.在与野生大理茶及栽培大叶茶(普洱生茶)进行多成分比较的基础上,结合形态性状的变异与进化,讨论白莺山古茶种质资源的多样性与野生大理茶和栽培大叶茶的相互关系.分析研究结果不仅为白莺山古茶的品质评价提供可靠的科学数据,为白莺山丰富的古茶种质资源的深人系统研究和合理开发利用提供基础,同时,通过多种过渡类型的化学成分分析与比较,为栽培大叶茶的起源和大理茶作为大叶茶的野生基源之一的假说提供了植物化学方面的证据.     

Chemical Analysis of Old Tea Trees in Bai Ying Shan Mountain and the Origin of Cultivated Tea

The contents of dalichasu (1,2-di-O-galloyl-4,6-O-(S) hexahydroxydiphenoyl-β-D-glucopyranose), catechins, theogallin, gallic acid, caffeine and theanine in old tea trees from Bai Ying Shan mountain were quantitatively analyzed by HPLC method, while their total polysaccharides and polyphenols were measured by an UV Vis spectrophotometer. Based on the chemical composition and morphological variation, the germplasm resource diversity of tea trees in Bai Ying Shan Mountain and their relationship with wild Camellia taliensis and cultivated tea (Csinensis var assamica) were discussed. The results provided not only the scientific data of quality evaluation of the old tea trees in Bai Ying Shan Mountain, but also the chemical evidence for the origin of cultivated tea and the hypothesis that Ctaliensis might be one of the origins of cultivated tea during the long natural variation and artificial breeding.     

8个茶树品种生化成分分析及抗性成分的初步鉴定

【目的】筛选和鉴定茶树中与假眼小绿叶蝉Empoasca vitis G?the相关的抗性成分。【方法】采用氨基酸分析仪和超高效液相色谱法分别分析8个茶树品种的氨基酸及其组分、咖啡碱和茶多酚及其组分的含量。采用人工饲料喂饲法对可能的抗性物质进行初步鉴定。【结果】通过对假眼小绿叶蝉抗性水平差异较大的茶树品种的30多种生化物质的分析,筛选出抗、感茶树品种间差异较大的物质,包括茶多酚、天冬氨酸、γ-氨基丁酸、绿原酸和茶氨酸。分别将其作为可变因子设置不同浓度梯度,加入到人工饲料饲养假眼小绿叶蝉,统计5种化学成份不同浓度人工饲料上假眼小绿叶蝉的成活率,初步确定了这5种化学成份对假眼小绿叶蝉成活率的影响。其中,γ-氨基丁酸可能是茶树抗虫物质之一。【结论】为阐明茶树抗叶蝉的化学机理奠定基础。     

茶树鲜花饮料澄清技术研究

茶树鲜花与茶叶具有相似的营养成分,榨汁后经调配可开发成适口性好、风味独特的鲜花饮料。对茶树鲜花饮料的壳聚糖絮凝、酶法澄清、超滤澄清效果进行了比较,结果表明,采用10万分子截留量的超滤膜处理获得能够较好的澄清效果,且对茶多酚造成的操作损失较小。