黄色短杆菌产L-组氨酸菌株的诱变育种

以黄色短杆菌为出发菌,采用诱变育种的方法选育得到一株能高产L-组氨酸的突变菌株。在加有150g·L-1葡萄 糖;35g·L-1硫酸铵;10g·L-1蛋白胨的发酵培养基中培养72h,产L-组氨酸128.28mg·L-1。     

啤酒废酵母中还原型谷胱甘肽的抽提新方法探讨

采用对羟基苯甲酸酯提取啤酒废酵母菌细胞中的谷胱甘肽（GSH）。研究表明,按菌体与破壁液比例1：2（W／V）加入0．5％的对羟基苯甲酸丙酯,30℃,pH5-pH6,搅拌3h能有效地从啤酒废酵母中提取谷胱甘肽（GSH）,溶液经离心后,上清液中谷胱甘肽（GSH）含量可达96．71mg/100mL。和现有的几种抽提方法比较,对羟基苯甲酸酯提取由于其提取含量高（96．71mg/100mL）、不需要复杂和贵重的仪器、易于放大、经济性强而明显优于其他抽提方法。     

含谷胱甘肽硫转移酶基因工程菌表达条件研究

将重组谷胱甘肽硫转移酶 (GST)大肠杆菌表达株BL2 1(DE3 )PGEX 作为研究对象 ,进行了生长及表达条件的优化研究 ,分析比较了不同培养条件对菌体生长的影响以及诱导剂的添加量对产物表达量的影响。     

谷胱甘肽硫转移酶(GST)的固定化及酶学特性研究

对谷胱甘肽硫转移酶的固定化、游离酶和固定化酶的酶学特性进行了研究,通过试验,确定谷胱甘肽硫转移酶的最佳固定化条件为先用2％壳聚糖吸附酶,然后再加戊二醛交联,交联用戊二醛浓度为1．2％,交联时间6h;游离酶的最适温度为45—55℃,最适pH值为6．5-7．0：固定化酶的最适温度为45-50℃,最适pH值为7．0;游离酶和固定化酶的最适酶促反应时间为30min。     

吸附层析法从啤酒废酵母中提取谷胱甘肽

以壳聚糖作为吸附剂,通过吸附层析法从啤酒废酵母泥为原料,经预处理和细胞破碎后得到的富含谷胱甘肽的抽提液中,分离纯化还原型谷胱甘肽。根据试验结果确定最佳提取条件为：上柱啤酒废酵母抽提液的最适pH值为7．0,最适洗脱剂为pH值为4．4的磷酸盐缓冲液。在最适吸附条件下,还原型谷胱甘肽的平均洗脱率为84．18％,平均回收率79．55％。说明此法是可行的。     

L-组氨酸高产菌株的选育

为得到L-组氨酸的高产菌株,以谷氨酸棒杆菌（Corynebacterium glutamicum）S9114为出发菌株,利用亚硝基胍（NTG）和硫酸二乙酯（DES）进行多次诱变,在D-组氨酸的抗性梯度平板上挑取正突变株,发酵检测,最终挑出一株S6（D—his＇）,可积累L-组氨酸327mg／L,比出发菌株提高47.3％。     

米蛋白分解菌A.0—6的菌种鉴定及其与米曲霉As.3.951菌株的比较

为了进一步认识经多年选育得到的Ａ·０—６米蛋白分解菌,对其进行了形态及培养特性和生理特性的研究试验,认为Ａ·０—６菌株为半知菌类,丛梗孢目,丛梗孢科,曲霉属,黄曲霉群的米曲霉。与在酿造工业生产上应用多年的米曲霉Ａｓ．３．９５１相比,Ａ·０—６菌株具有蛋白酶活力高,米蛋白分解能力强,生长快,易培养等特点,是值得推广应用的优良菌株。     

6-巯基嘌呤筛选L-组氨酸产生菌株

目的：为得到L-组氨酸的高产菌株。方法：以谷氨酸棒杆（Corynebacterium glutamicum）S6为出发菌株,利用亚硝基胍进行多次诱变。结果：在6-巯基嘌呤（MP）的抗性梯度平板上挑取正突变菌株,发酵,最终挑出一株N13（MP）,可积累L-组氨酸561mg／L,比出发菌株提高45．34％。结论：利用结构类似物抗性平板御筛选L-his高产菌株是可行的。     

离子交换树脂纯化还原型谷胱甘肽(GSH)的研究

研究005×7阳离子交换树脂分离纯化谷胱甘肽(GSH)的工艺条件。考察了005×7阳离子交换树脂对GSH的静态吸附量,洗脱时铵离子浓度、洗脱流速等对分离纯化产品GSH的影响。根据试验结果确定最佳工艺条件为:最适上柱pH为3.0,洗脱流速为:2.4ml/min,洗脱液为0.5mol/L的NH4Cl溶液;收集洗脱液,浓缩,乙醇沉淀,真空冷冻干燥,用高效液相色谱检测产品GSH,所得GSH纯度为60.8%,GSH的平均收得率为61.3%。说明此分离纯化GSH工艺可行。     

纤维素酶高产菌株的诱变选育

以T_0为出发株,经理化因子的诱变处理,采用透明圈法,在含有制霉菌素浓度为20U(T_0在制霉菌素浓度大于20U时被抑制)的平板上挑取H_c值(透明圈直径与菌落直径之比)比较大的菌株进行探瓶复筛,测发酵液CMC酶活,得到酶活较高菌株N_6,N_1,D_5,U_(11),CMC酶活分别是T_0的5.4,2.9,3.0,1.8倍。