TNF—α转换酶的结构特征及抑制剂

肿瘤环因子－α转换酶（ｔｕｍｏｒ ｎｒｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ－α ｃｏｎｖｅ ｒｔｉｎｇ ｅｎｚｙｍｅ,ＴＡＣＥ）将２６ｋＤ膜结合型ＴＮＦ－α前体水解为具有生物活性的可溶性１７ｋＤ ＴＮＦ－α。ＴＡＣＥ基因克隆的成功,主宰其为金属水解蛋白（ａｄａｍａｌｙｓｉｎ）家族的膜结合型异整合素金属蛋白酶。发现许多金属蛋白酶抑制剂ｈｙｄｒｏｘａｍａｔｅ类化全物能抑制ＴＡＣＥ活性阻断ＴＮＦ－α释放,并保护脓毒     

TNF—α—IL—1β及LPS对血管平滑肌细胞一氧化氮合酶基因表达的…

通过ＲＮＡ印迹分析和亚硝酸盐含量测定检查ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＬＰＳ对大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）诱导型一氧化氮合酶基因表达及ＮＯ生成的影响,结果表明,ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＬＰＳ均能显诱导ＶＳＭＣｉＳ基因表达和促进ＮＯ生成,其作用强度与浓度和作用时间有关;双因素（ＴＮＦ－α＋ＬＰＳ,ＬＰＳ＋ＩＬ－１β）对诱导ｉＮＯＳ基因表达及ＮＯ生成产生协同作用,ＰｏｌｙｍｙｘｉｎＢ和地塞米松可部分凶制     

地塞米松、噻庚啶和山莨菪碱对LPS诱导大鼠肝脏TNFα表达的影响

地塞米松（Ｄｅｘ）、噻庚啶（Ｃｙｐ） 和山莨菪碱（Ａｎｉ） 对脂多糖（ＬＰＳ） 诱导的大鼠肝脏ＴＮＦα表达的影响。Ｗｉｓｔａｒ大鼠４０ 只, 静脉注射ＬＰＳ（ＥｃｏｌｉＯ１１１Ｂ４ ５ｍ ｇ／ｋｇ） 后, 立即静脉给予Ｄｅｘ ５ｍ ｇ／ｋｇ、Ｃｙｐ５ｍ ｇ／ｋｇ 或Ａｍ ｉ１０ｍ ｇ／ｋｇ,于ＬＰＳ攻击后２ｈ 取动物的肝脏,ＡＰＡＡＰ法进行ＴＮＦα免疫组织化学研究,Ｎｏｒｔｈ－ｅｒｎ 杂交分析ＴＮＦαｍ ＲＮＡ 表达水平。结果发现ＬＰＳ攻击后２ｈ, 肝脏ＴＮＦαｍ ＲＮＡ 表达水平显著增高, 肝脏枯否氏细胞胞浆内有大量的ＴＮＦα红染颗粒。Ｄｅｘ、Ｃｙｐ 或Ａｎｉ均能显著降低大鼠肝脏ＴＮＦαｍ ＲＮＡ 水平和ＴＮＦα含量。结果表明Ｄｅｘ、Ｃｙｐ 和Ａｎｉ均显著抑制ＬＰＳ诱导的ＴＮＦα基因表达, 可能有抗感染性休克作用。     

肿瘤坏死因子－α（TNF－α）对常见呼吸道病毒的抑制作用

用人重组肿瘤坏死因子－α（Ｔｕｍｏｒｎｅｃｒｏｓｉｓｆａｃｔｏｒ－α,ＴＮＦ－α）和人天然α干扰素（Ｉｎｔｅｒｆｅｒｏｎ－α－,ＩＦＮ－α）在人胚胎肺纤维母细胞（ＨＥＦ）和Ｈｅｐ－２细胞系上对常见呼吸道病毒所致细胞病变抑制进行比较观察。病毒包括不同型别的腺病毒５株,单疱病毒Ⅰ型（ＨＳＶ－Ｉ）１株,鼻病毒１株,仙台病毒１株,ＶＳＶ１株。结果提示ＴＮＦ－α和ＩＦＮ－α均具有广谱抗病毒活性。ＴＮＦ－α的抑毒作用能被ＴＮＦ－α申抗和ＩＦＮ－β单抗完全去除,被ＩＦＮ－α单抗部分去除ＴＮＦ－α的抗病毒效应。ＴＮＦ－－α中和试验的结果提示：ＴＮＦ抗病毒活性仍为ＩＦＮ－β诱生所介导。     

人类疱疹病毒6型可诱生TNF－α

用生物活性法和双抗体夹心桥联酶免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法检测了人类疱疹病素６型（ＨＨＶ－６）ＧＳ株和南京地方株ＣＮ５,８,１０感染的淋巴细胞培养上清中的肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的水平,发现培养２４ｈ即可检出高水平的ＴＮＦ,４８～７２ｈ述到峰值,此后逐渐下降,与未感染耐照组比较有及其显著的差异（Ｐ＜０．００１）。ＧＳ株与地方株同诱生ＴＮＦ水平无儿著性差异（Ｐ＞０．１）,三株地方株诱生ＴＮＦ也无显著性差异（Ｐ＞０．０５）。ＴＮＦ－α单抗可以完全中和培养上清中ＴＮＦ的活性,证实上清中有ＴＮＦ－α。与ＬＰＳ比较,ＨＨＶ－６诱生ＴＮＦ－α的能力要强得多。     

抗氧化剂对牛主动脉内皮细胞NF—kB激活的抑制作用

利用Ｗｅｓｔｅｒｎ印迹法考查了过氧化氢和肿瘤坏死因子诱导的ＩｋＢ－α蛋白质降解结果表明这两种物质能在相近的作用时间内诱导牛主动脉内皮细胞发生ＩｋＢ－α蛋白质降解，但是其作用其强度有明显差异。结合荧光染色技术检查ＮＦ－ｋＢ的激活即核转位情况，考查了不同抗氧化剂对全外培养的牛主动脉血管内皮细胞转录因子ＮＦ－ｋＢ激活现象的影响。结果表明吡咯烷二硫代氨基甲酸酯（ＰＤＴＣ）能够明显抑制肿瘤坏死因子（ＴＮＦ－     

3种人肿瘤坏死因子衍生物的研制

本文在详细分析肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）结构的基础上应用ＰＣＲ技术和基因工程手段改造人ＴＮＦ分子,构建了３种人ＴＮＦ的衍生物。３种人ＴＮＦ衍生物是;Ｎ端缺失７个氨基酸且８、９、１０位的ＰｒｏＳｅｒＡｓｐ改为ＡｒｇＬｙｓＡｒｇ的ＴＮＦ（简写为ｈＴＮＦＤ１）：Ｃ端１５７位Ｌｅｕ改为Ｐｈｅ的ＴＮＦ（简写为ｈＴＮＦＤ２）;Ｎ端和Ｃ端同时作上述改变的ＴＮＦ（简写为ｈＴＮＦＤ３）。这３种衍生物在大肠杆菌中均获得较高表述,它们对Ｌ９２９细胞的细胞毒活性较重组天然人ＴＮＦ有很大升高,尤其是ｈＴＮＦＤ１和ｈＴＮＦＤ３,升高达３个数量级。文中对３种衍生物活性升高的原因作了分析。     

TNF-α、IL-1β及LPS对血管平滑肌细胞一氧化氮合酶基因表达的影响及作用机制研究

通过ＲＮＡ印迹分析和亚硝酸盐含量测定检查ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＬＰＳ对大鼠血管平滑肌细胞（ＶＳＭＣ）诱导型一氧化氮合酶（ｉＮＯＳ）基因表达及ＮＯ生成的影响．结果表明,ＴＮＦ－α、ＩＬ－１β和ＬＰＳ均能显著诱导ＶＳＭＣｉＮＯＳ基因表达和促进ＮＯ生成,其作用强度与浓度和作用时间有关;双因素（ＴＮＦ－α＋ＬＰＳ,ＬＰＳ＋ＩＬ－１β）对诱导ｉＮＯＳ基因表达及ＮＯ生成产生协同作用．ＰｏｌｙｍｙｘｉｎＢ和地塞米松可部分抑制ＴＮＦ－α对ｉＮＯＳ基因表达的诱导作用及ＮＯ生成     

TNF受体的信号传导

ＴＮＦ是一种具有广泛生物学活性的细胞因子,它有两种受体ＴＮＦＲＩ和ＴＮＲＩＩ。ＴＮＦＲＩ通过与ＴＲＡＤＤ,ＦＡＤＤ和ＲＩＰ等分子结构向细胞内传导程序化死亡的信号。ＴＮＦＲＩ的聚合还能激活ＳＭａｓｅ。产生神经酰胺,ＴＮＦＲＩＩ的细胞内区能与ＴＦＡＦ２和ＴＲＡＦ１结合,后者进一步激活ＮＦ－ｋＢ核因子。ＴＮＦＲＩ和ＴＮＦＲＩＩ通过ＴＲＡＤＤ与ＴＲＡＦ２的相互作用而将两者的作用联系起来。     

细胞信号转导分子在TNF—α诱导c—jun基因表达中的作用

前期研究表明ｐ３８丝裂原活化蛋白激酶（ＭＡＰＫ）通过磷酸化心肌细胞增强因子２（ｍｙｏｃｙｔｅ ｅｎｈａｎｃｅｒ ｆａｃｔｏｒ２,ＭＥＦ２）转录因子家族成员调节ｃ－Ｊｕｎ蛋白表达。ｃ－ｊｕｎ的启动子区存在ＭＥＦ２位点,ＭＥＦ２转录因子家族成员以同源或异源二聚体形式与其结合。研究了ｐ３８和ＢＭＫ１（ｂｉｇ ＭＡＰ ｋｉｎａｓｅ１）在ＴＮＦ－α诱导ｃ－ｊｕｎ基因表达中的调控作用。ｐ３８上调ＭＥＦ２Ａ的转     

核因子—kB的激活及其在急性肺损伤中的作用

核转录因子ＮＫ－ｋＢ是一类具有多向性转录调节作用的蛋白质因子,它能与多种细胞因子、粘附分子基因启动子部位的ｋＢ位点发生结合,增强这些基因的转录和表达,已有报道ＮＦ－ｋＢ的激活将导致ＴＮＦ、ＩＬ－１、ＩＬ－６、ＩＬ－８、ＩＣＡＭ－１、Ｐ－ｓｅｌｅｃｔｉｎ等基因的过度表达,而后者在急性肺损伤发病中起着极其重要的作用。本文着重综述核因子－ｋＢ蛋白家族成员的情况及其相互作用,ＮＦ－ｋＢ可能的激活途径及其在     

小鼠骨髓 内皮细胞无血清条件培养液及其超滤组分对粒巨噬系祖细胞？…

本研究通过传代培养小鼠骨髓内皮细胞系细胞,惧无血清条件培养液（ｍＢＭＥＣ－ＣＭ）,将其作多级串联超滤,获得分子量大于１０、３￣１０、１￣３、０．５￣１ｋＤ和小于０．５ｋＤ超滤组分。进行粒巨噬系造血祖细胞集落形成试验。检测了它们的ｍＢＭＥＣ－ＣＭ和３￣１０组分对粒巨噬系祖细胞（ＣＦＵ－ＧＭ）生长未见明显影响,而分子量大于１０ｋＤ和０．５￣１ｋＤ组分促进ＣＦＵ－ＧＭ的增殖,分子量１￣３ｋＤ和小于０．５     

乙肝病毒表面抗原preS1与人肿瘤坏死因子α融合基因的表达

用ＰＣＲ法获得了ＨＢｓＡｇｐｒｅＳ１（１－６５）肽段基因,将该基因融合在肿瘤坏死因子（ｈＴＮＦα）之后,插入表达载体ＰＳＢ－９２中,使融合基因的５′端直接置于大肠肝菌ＰＬ启动子下游,采用３０℃培养,４２℃诱导,获得了ＴＮＦ与ｐｒｅＳ１（１－６５）融合蛋白的表达产物。ＳＤＳ－ＰＡＧＥ电泳显示表达产物为２５ｋＤ,约占细菌总蛋白的３５％。表达产物经Ｗｅｓｔｅｒｎｂｌｏｔ验证,能分别特异地与ｈＴＮＦα抗体与ｐｒｅＳ１抗体结合,稀释复性后,该融合蛋白还具有ＴＮＦ的生理功能（对Ｌ９２９细胞的细胞毒活性）。经ＤＮＡ序列测定,ｐｒｅＳ１（１－６５）肽基因正确地融合在ｈＴＮＦα基因之后。该结果提供了一种制备ｐｒｅＳ１的新方法,为进一步开展治疗肝癌和乙肝的导向药物打下基础。     

耐氧双歧杆菌及其B-CW对荷瘤鼠TNF-α的体内诱导

本文采用放射免疫方法（ＲＩＡ）,检测荷Ｓ１８０肿瘤小鼠外周血中ＴＮＦ－α的含量,观察双歧杆菌（Ｂｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ）及其细菌壁（ＣｅｌＷａｌｓｏｆＢｉｆｉｄｏｂａｃｔｅｒｉｕｍ,Ｂ－ＣＷ）的免疫调节作用,探讨其抗肿瘤机制。结果表明该菌及其Ｂ－ＣＷ均可明显地促进机体产生ＴＮＦ－α,发挥抗肿瘤作用     

血小板衍生因子的信号传递需要过氧化氢的产生

血小板衍生因子的信号传递需要过氧化氢的产生近年来的研究提示细胞内的Ｈ２Ｏ２可以作为第二信使起着信号传递分子的作用,在哺乳动物细胞内Ｈ２Ｏ２,作为转录因子—核因子－ｋＢ（ＮＦ－ｋＢ）的间接活化因子,参与宿主防御反应的信号传递过程。最近Ｓｕｎｄａｒｅｓａ...     

骨巨细胞瘤M-CSF、IL-1和TNF-α免疫组织化学研究

本实验应用免疫组织化学方法,检测巨噬细胞相关抗原、巨噬细胞集落刺激因子（Ｍ┐ＣＳＦ）、白细胞介素┐１（ＩＬ┐１）和肿瘤坏死因子┐α（ＴＮＦ┐α）在骨巨细胞瘤（ＧＣＴ）中的表达,结果表明,在ＧＣＴ中,Ｍ┐ＣＳＦ主要由纤维母细胞样基质细胞（ＦＣ）分泌;巨噬细胞样基质细胞（ＨＣ）是单核┐巨噬细胞系早期的未成熟细胞,主要分泌ＩＬ┐１和ＴＮＦ┐α,少数多核巨细胞（ＭＧＣ）也可产生ＴＮＦ┐α。本文提示,ＧＣＴ中的三种主要细胞能分泌Ｍ┐ＣＳＦ、ＩＬ┐１和ＴＮＦ┐α细胞因子,通过自分泌或旁分泌作用相互影响,共同促进ＧＣＴ的发生、发展及其侵袭性的生物学行为     

TNF受体家庭介导的细胞凋亡信号转导

肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）家庭是一类多功能的细胞因子,具有诱导细胞凋亡、抗病毒、免疫调节等多种生物学活性,其中一些成员可以通过和细胞膜上相应受体结合,启动细胞内的凋亡机制,而诱导细胞凋亡,一些蛋白质（如ＴＲＡＤＤ、ＦＡＤＤ、ＲＩＰ、ＲＡＩＤＤ等）参与这些信号传递过程,越来赵多的ＴＮＦ家庭成员,ＴＮＦ受体以及与细胞凋亡相产在的Ｃａｓｐａｓｅ蛋白酶２成员被人们发现。     

内源性NO在LPS和TNFα诱导离体兔肺动脉反应性变化中 …

目的：探讨脂多糖（Ｌｉｐｏｐｏｌｙｓａｃｃｈａｒｉｄｅ,ＬＰＳ）和肿瘤坏死因子α（ｔｕｍｏｒ ｎｅｃｒｏｓｉｓ ｆａｃｔｏｒ ａｌｐｈａ,ＴＮＦα）所致离体肺动脉反应性张力变化与肺动脉源性一氧化氮（ｎｉｔｒｉｃ ｏｘｉｅ,ＮＯ）的关系。方法：离体兔肺动脉环用ＬＰＳ＋ＴＮＦα、ＬＰＳ或深剂孵育２ｈ和６ｈ,检测肺动脉对乙酰胆碱（ＡＣｈ）、硝普钠（ＳＮＰ）和苯肾上腺素（ＰＥ）的累积剂量反应,以及一氧化氮     

人类疱疹病毒6型可诱生TNF—α

用生物活性法和双抗体夹心桥联酶免疫吸附（ＥＬＩＳＡ）法检测了人类疱疹病毒６型（ＨＨＶ－６）ＧＳ株和南京地方株ＣＮ５,８,１０感染的淋巴细胞培养上清中的肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）的水平,发现培养２４ｈ即可检出高水平的ＴＮＦ,４８～７２ｈ达到峰值,此后逐渐下降,与未感染对照组比较有极其显著有差异（Ｐ〈０．００１）。ＧＳ株与地方株间诱生ＴＮＦ水平无显著性差异（Ｐ〉０．１）,三株地方株诱生ＴＮＦ也无显著性差异     

TNF家族新成员——OPGL

１９９８年美国Ａｍｇｅｎ公司的ＬａｃｅｙＤＬ等首次克隆了ｏｓｔｅｏｐｒｏｔｅｇｅｒｉｎ的配体（ＯＰＧＬ），它是肿瘤坏死因子（ＴＮＦ）家族的新成员。最近ＫｏｎｇＹＹ等通过基因缺失小鼠研究了ＯＰＧＬ的诸多功能。人ＯＰＧＬ和鼠ＯＰＧＬ分别为３１７ａａ和３１６ａａ蛋白质，为典型的Ⅱ型跨膜蛋白，Ｎ末端是短的胞内结构域，Ｃ末端是较长的胞外结构域，４９位ａａ～６９位ａａ为疏水跨膜结构域，Ｃ末端区域由两个结构域组成：主轴区域（Ｌｅｕ７０→Ｇｌｙ１５７）和活性配体区域（Ｌｙｓ１５８→Ｃ末端）。此区域含９个保…