免疫组化染色阳性对照的设立、制作与应用

目的探讨如何设立免疫组化染色的阳性对照,使操作更简单、结果可靠和方法实用。方法选取阑尾、乳腺和扁桃体等不同类型的组织,通过HE切片观察,选取合适相应抗原表达的区域,将组织切成0.3cm*0.3cm大小,重新作石蜡包埋,连续切片厚4μm,贴在待检查组织旁边作为对照,进行CK、CK19、SMA、CD20、CD3、ER、PR、等36种抗体的免疫组化染色,并观察组织中抗原的表达是否正确,筛选出适合作为免疫组化染色阳性对照的组织。结果乳腺皮肤和扁桃体组织仅部分抗体染色阳性,而阑尾组织中有多种抗原表达,34种抗体染色均呈阳性,染色阳性的其他相对区域的组织细胞呈阴性染色。结论阑尾组织可作为大多抗体染色的阳性对照和阴性对照。方法简单,操作方便,节省抗体,适用于临床批量工作,对免疫组化的染色过程起到很好的质控作用。但对于某些抗体染色,如ER、PR等抗体的阳性对照,则应选用相应的组织如含正常导管上皮乳腺导管癌组织作对照。     

HE染色细胞核灰染的处理方法比较研究

目的探讨HE染色细胞核灰染的处理方法,提高HE染色质量。方法收集10例HE染色发灰的胃粘膜、肠息肉和子宫内膜等不同类型的组织,重新切片,通过调整苏木素染色条件以及染色前对组织进行修复处理,设对照组,比较各种处理方法的染色效果。结果通过延长时间、水浴加热和微波加热等调整苏木素染色条件的方法以及水煮修复处理法能够不同程度地促进核染色,但灰染现象未能彻底解决。PBS、EDTA、柠檬酸分别采用高压和微波修复处理均能较好地改善HE染色细胞核灰染现象,以PBS微波处理法效果最佳。结论 PBS微波处理法是HE染色细胞核灰染现象的一种有效处理方法。     

人的类胚胎干细胞中碱性磷酸酶的检测方法和条件

检测人的类胚胎干细胞 (em bryonic stem cells,ES细胞 )中的碱性磷酸酶活性 ,以判别 ES细胞是否处于未分化状态 ,为分离和培养出高度未分化人的类胚胎干细胞 ,建立人类 ES细胞系 ,从而建立体外研究细胞分化和发育调控机制的模型提供方便。本文对检测 ES细胞中碱性磷酸酶活性的钙钴法和α-奈基磷酸技术方法和条件进行了探讨。结果显示 :检测 ES细胞中的碱性磷酸酶用α-奈基磷酸法较钙钴法为好 ,操作更简单 ,不会出现假阳性。分离和培养出高度未分化人的类胚胎干细胞(embryonic stem cells,ES细胞 ) ,建立人类 ES细胞系 ,再定向诱导其…     

免疫组织化学技术制片的规范和质量控制

随着免疫组织化学技术的不断发展,该技术在组织学研究和病理诊断尤其是在肿瘤鉴别诊断的应用越来越广泛.     

小鼠眼球标本固定液及制片方法的改进

在小鼠眼球标本石蜡切片制作过程中,由于眼球组织结构的特殊,各部分组织的软硬度不同,各层组织之间连接性差,如用常规10％甲醛液固定,眼球经过固定后用乙醇脱水,各层组织由于收缩率的不同容易造成组织分离,特别是造成视网膜的分离甚至脱落。其他的一些固定液虽然可以保证眼球内部各层组织完整,但是细胞肿胀肥大,细胞着色不均匀,给在显微镜下观察带来困难。因此我们结合眼球的结构特点,总结出一种比较适合固定眼球组织的固定液以及采用适当的取材方式,有助于制作高质量的眼球组织HE片,介绍如下。     

PAS染色在骨骼肌糖原贮积症诊断中的应用

目的探讨PAS染色在骨骼肌糖原贮积症诊断中的作用。方法用组织化学方法高碘酸-schiff(periodic acid schiff,PAS)染色方法显示糖原贮积症肌纤维胞浆内糖原的贮积。结果糖原贮积症患者肌纤维胞浆内聚集的红至红紫色颗粒为糖原。结论 PAS染色对于判断细胞内糖原贮积的糖原病和多糖体贮积性疾病的诊断是必要的。     

不同的抗原修复方法和染色条件对P53蛋白免疫组织化学方法结果的影响

用免疫组织化学技术检测肿瘤组织中Ｐ53 基因蛋白产物的表达 ,是探讨Ｐ53 基因与多种肿瘤的相关性研究的主要手段之一。在免疫组织化学检测中 ,不同的抗原修复方法对Ｐ53 蛋白检测结果的阳性率和染色强度有不同的影响。本文在免疫组织化学检测Ｐ53 蛋白时对不同的抗原修复方法和染色条件进行了探讨 ,摸索出能较佳地显示Ｐ53 蛋白的免疫组织化学方法条件。介绍如下 :1.材料和方法1 1材料 :经临床病理诊断为恶性肿瘤如肺癌、乳腺癌、宫颈癌、卵巢癌和大肠癌等福尔马林固定、石蜡包埋的组织 ;单克隆抗体Ｐ53 ＤＯ - 7和ＬＳＡＢ试剂盒为ＤＡＫ…     

利用微波技术用相同酶标抗体系统进行免疫组织化学双重显色

利用微波技术用相同酶标抗体系统进行免疫组织化学双重显色梁英杰吴惠茜（中山医科大学病理教研室,广州５１００８９）为了在同一组织切片上同时检测两种抗原成分,需要进行免疫组化双重染色。利用微波技术,灭活上一重染色中抗体及其复合物的活性,从而阻断双重染色之间...     

骨巨细胞瘤M-CSF、IL-1和TNF-α免疫组织化学研究

本实验应用免疫组织化学方法,检测巨噬细胞相关抗原、巨噬细胞集落刺激因子（Ｍ┐ＣＳＦ）、白细胞介素┐１（ＩＬ┐１）和肿瘤坏死因子┐α（ＴＮＦ┐α）在骨巨细胞瘤（ＧＣＴ）中的表达,结果表明,在ＧＣＴ中,Ｍ┐ＣＳＦ主要由纤维母细胞样基质细胞（ＦＣ）分泌;巨噬细胞样基质细胞（ＨＣ）是单核┐巨噬细胞系早期的未成熟细胞,主要分泌ＩＬ┐１和ＴＮＦ┐α,少数多核巨细胞（ＭＧＣ）也可产生ＴＮＦ┐α。本文提示,ＧＣＴ中的三种主要细胞能分泌Ｍ┐ＣＳＦ、ＩＬ┐１和ＴＮＦ┐α细胞因子,通过自分泌或旁分泌作用相互影响,共同促进ＧＣＴ的发生、发展及其侵袭性的生物学行为     

改良乙酰胆碱酯酶染色在快速病理诊断先天性巨结肠中的应用

目的对乙酰胆碱酯酶组织化学染色方法进行改良,使染色操作更加快速和简单,以便能用于术中先天性巨结肠的快速病理诊断。方法以传统的亚铁氰化铜法为基础并进行改良,将底物碘化乙酰硫代胆碱的浓度增加10倍,高浓度的底物加快渗透组织,缩短孵育染色时间。在孵育染色后用DAB(二氨基联苯胺)处理,使阳性产物更加稳定,颜色由棕色加深为棕黑色,不容易退色,更易于观察。结果先天性巨结肠症的直肠黏膜固有层腺体之间可见增生的胆碱能纤维,乙酰胆碱酯酶阳性呈棕黑色,而正常直肠黏膜固有层腺体之间没有增生的胆碱能纤维,乙酰胆碱酯酶染色为阴性。与传统的亚铁氰化铜法相比较,本改良法染色特异性无明显差异,但孵育染色时间从原来的60~120min缩短至10~15min。结论本改良法使乙酰胆碱酯酶染色操作比传统方法更加快速和简单,结果稳定可靠,可用于手术中先天性巨结肠的快速病理诊断,对临床医生制定先天性巨结肠的治疗方案具有十分重要的意义。