前噬菌体

随着微生物基因组测序工作的广泛展开,前噬菌体在宿主菌基因组中普遍存在的事实已逐渐为人们所接受.相关研究工作的深入揭示前噬菌体并不只是细菌体内一个简单的寄生体,相反是细菌生理活动相当活跃的参与者,在宿主菌生命活动中发挥着重要的作用.对前噬菌体的深入了解将丰富人们对多种生命现象的认识.本文即是关于前噬菌体的分类、分布、鉴定、进化及其与宿主菌相互作用等知识点的一个简单综述.     

核因子-κB的激活及其在急性肺损伤中的作用

核转录因子NF κB是一类具有多向性转录调节作用的蛋白质因子 ,它能与多种细胞因子、粘附分子基因启动子部位的κB位点发生结合 ,增强这些基因的转录和表达。已有报道NF κB的激活将导致TNF、IL 1、IL 6、IL 8、ICAM 1、P selectin等基因的过度表达 ,而后者在急性肺损伤发病中起着极其重要的作用。本文着重综述核因子 κB蛋白家族成员的情况及其相互作用 ,NF κB可能的激活途径及其在急性肺损伤发病中的作用、致病因素和机制 ,并简单介绍了几种影响NF κB活性的药物。这些发现将为急性肺损伤及一切NF κB在其中发挥作用的疾病的治疗提供一条新的思路和重要的治疗手段。     

肽抗生素hPAB-β3拷贝工程菌的发酵与重组蛋白纯化

肽抗生素 (peptideantibiotics)是近年来发现的生物体基因编码的具有抗微生物活性的小肽 ,在临床病原菌对常用抗生素耐药性日益严重的今天 ,人们希望将肽抗生素开发为一种新型的抗感染制剂。为大量制备人源肽抗生素hPAB β ,本研究在前期对筛选出的 3拷贝优势工程菌的摇瓶发酵条件进行摸索的基础上 ,采用 3.7L发酵罐对发酵pH值、溶氧条件 (PO2 )和补料时机、方式等参数进行优化。同时 ,对表达产物进行了如下纯化 :利用Ni NTA亲和层析捕获 3拷贝融合蛋白 ,继而用 2mol/L羟胺裂解 ,产物用SOURCE 30RPC填料进行反相层析 ,目标肽经GSH…     

重组人肽抗生素hPAB—β及其突变体的活性测定与筛选

从人体基因组中克隆了一个编码肽抗生素样的基因。按基因编码产物的氨基酸序列 ,化学合成目的产物 ,药物敏感测定法证实产物具有杀菌活性后 ,又用基因工程法人工表达了目的产物。测定表达的重组人肽抗生素hPAB β及其突变体的抗菌活性 ,筛选理想的活性分子。方法是应用平板法和最小抑菌浓度 (MinimumInhibitionConceng tration ,MIC)测定法检测重组表达的hPAB β及突变体hPAB β38,hPAB β34对 8株实验室保存菌株及 10株临床分离菌株的杀菌能力 ,并以化学合成的肽抗生素hPAB β作对照 ;根据各目的分子抗菌能力的强弱 ,筛选理想的目…     

猪血蛋白质水解液用石灰乳脱酸制备复合L—氨基酸的研究

以硫酸水解猪血蛋白质、用石灰乳脱酸提取复合L—氨基酸。水解最佳时间20小时。氨基酸生成率和产率分别为49.2%和34%。样品经氨基酸分析仪测定,含17种氨基酸,其中包括7种人体营养必需氨基酸。本法生产工艺和设备简单,生产周期短,容易脱色,,原辅料消耗低,,产品得率高。     

蟾蜍人造室外越冬的新方法

人工养殖蟾蜍,对于解决各医学科研单位,医学院校,中等卫生学校不定期的实验动物来源有重要的意义。而蟾蜍的越冬是人工养殖的关键。我们通过二年多的实践,摸索出了一种蟾蜍人造室外越冬的新方法,现介绍如下。     

结核分枝杆菌38kDa-U1融合抗原的表达、纯化及其抗原活性测定

由于结核病人抗体反应存在异质性,把单一抗原用于血清学诊断存在阳性率较低的缺陷。为获得适于结核病临床诊断用抗原,本研究将结核分枝杆菌38 ku抗原和尿蛋白(urine protein 1,U1)进行融合表达、纯化并测定其抗原活性。用基因拼接法将结核分枝杆菌编码38 ku抗原和U1蛋白的基因拼接在一起,克隆到pMD18-T上,进一步构建重组质料pET28a-38kDa-U1,并转化E.coliBL21,通过IPTG诱导实现其高效表达,采用亲和层析纯化表达产物。用纯化的融合抗原免疫家兔获得抗血清,用该血清以及活动性肺结核病人血清对纯化产物的抗原活性进行测定。结果成功构…     

推行本科生导师制 提升医学微生物学教学质量

本科生导师制是在适应新时期高等医学教育培养体制下产生的一种"以满足学生个性发展和创新精神需要"为理念的制度,它在很大程度上克服了医学微生物学传统教学模式的弊端,体现了"以学生为主体,以提高能力素质为核心"的教学理念,充分调动了学生的积极性和创造力,增强了学生的实践技能和综合素质,切实提高了医学微生物学的教学质量,值得深入学习和推广。     

伤寒沙门菌感染过程中体内诱导表达蛋白抗原的筛选

在感染过程中,病原体会表达一系列基因产物以适应体内环境.因此,病原体只在宿主体内表达或高表达的基因可能与致病机制密切相关.本研究用体内诱导抗原技术（in vivo induced antigen technology,IVIAT）来筛选伤寒沙门菌感染过程中体内诱导表达的抗原,共筛选到7个体内诱导（in vivo induced,IVI）抗原,分别是BcfD（菌毛结构亚单位）、GrxC（谷氧还蛋白3）、SapB（ABC转运系统）、T3663（ABC未知转运系统）、T3816（可能的有关硫氰酸酶的硫转移酶）、T1497（可能的TonB依赖受体）和T3689（功能未知）,其中BcfD,GrxC,SapB,T3663和T3689这5个抗原与吸附处理后的健康志愿者的血清无交叉免疫反应.这些筛选到的体内诱导抗原是新药和疫苗开发的潜在靶标,同时也有利于新诊断方法的研究.     

细菌Ⅶ型分泌系统的研究进展

细菌分泌系统参与细菌物质转运,是细菌蛋白或DNA胞外分泌的重要途径,与细菌的生长和致病性密切相关。迄今为止,已发现了Ⅰ～Ⅶ型分泌系统。Ⅰ～Ⅵ型分泌系统存在于革兰阴性菌中,其中Ⅳ型也存在于革兰阳性菌中;Ⅶ型则存在于革兰阳性菌中。Ⅶ型分泌系统是近年来发现的一种特殊分泌系统,能介导病原微生物毒力蛋白分泌,与宿主相互作用,并参与细菌体内锌铁平衡等,在革兰阳性菌的生长代谢及致病过程中发挥重要作用。本文综述细菌Ⅶ型分泌系统的类型、功能及表达调控,以增进对这一新型细菌蛋白分泌机制的认识。