用聚乙二醇(PEG)／无机盐双水相体系从枯草杆菌发酵液中提取a-淀粉酶的研究

本文报道分别用聚乙二醇(PEG)／磷酸盐和PEG／(NH·)2SO4双水相体系从枯草轩菌发酵液中提取a-淀粉酶。研究了PEG的平均分子量、PEG浓度,成相的盐的浓度和Nacl的浓度对a-淀粉酶和蛋白质的分配系数以及相比的影响,确定了最佳的操作条件。实验表明在180%PEG 1500／10％磷酸盐／0．05M NaCl的体系中,a-淀粉酶的分配系数为6.62,蛋白质分配系数为1．14,相比为2．5,a-淀粉酶总收率为94．3％,在16％PEG 1500／12％(NH₄)₂SO₄／O．05M NaCl体系中,a-淀粉酶分配系数为82,蛋白质分配系数为5．2,相比为O．92,酶收率为99％,结果表明用PEG／无机盐双水相体系直接从含有菌体的发酵液中提取a-淀粉酶是可行的。     

超临界CO2萃取鱼腥草的挥发油成分

从萃取的压力、温度、流量和时间等条件探讨超临界CO2萃取对鱼腥草(Houttuynia cordata Thunb.)挥发油萃取率的影响,确定最佳萃取条件为萃取压力20mPa、温度35℃、CO2流量40kg/h和萃取时间80min,鱼腥草挥发油得率为1．76％。而水蒸气蒸馏提取和石油醚提取的得率分别为0．05％和0．08％。超临界CO2法萃取的鱼腥草挥发油收率高,萃取时间短。     

吸附层析分离麻黄生物碱的过程优化

研究了用吸附层析取代现有的二甲苯萃取麻黄生物碱的工艺,重点考察了洗脱剂和操作条件对产品纯度和回收率的影响,发现在树脂吸附后的洗脱中,0．08M草酸的洗脱率最高,达99．3％,纯化倍数大于20;在操作条件中,进料量、pH和料液在层析柱中的停留时间影响最大：进料量增大导致纯度和收率的下降,树脂的动态吸附容量为27．5mg／mL树脂;停留时间在20rain时纯度较高,而洗脱率随停留时间减少却略有下降;pH=10时吸附性能较好。     

Separation of Flavonoids from Bamboo Leaves by Aqueous Two-Phase Extraction

以竹叶黄酮水提溶液为原料,采用PEG(聚乙二醇)/(NH4 )2SO4双水相体系对竹叶黄酮进行萃取,考察了PEG平均相对分子质量、PEG质量分数、(NH4)2SO4质量分数、pH值、NaCl质量分数、原液质量分数、萃取温度等对双水相及竹叶黄酮萃取效果的影响.双水相萃取法提取竹叶黄酮的最优条件为:PEG 400 31％,(NH4)2 SO4 11％,pH3.9,NaCl 0.7％,原液51.5％,萃取温度20℃,在此条件下得到的竹叶黄酮萃取率为97.8％.结果说明,双水相萃取法操作简单方便,成本低,不会引起生物质失活或变性,适合于黄酮类化合物的萃取分离.     

Geotrichum sp．SYBC WU-3脂肪酶的双水相萃取和酶学性质

初步研究双水相体系对Geotrichum sp．SYBC WU-3脂肪酶的萃取分离效果,选用PEC4000／NaH2 PO4作为戍相系统进行系统研究,考察影响脂肪酶萃取的各种因素（如PEG相对分子质量及质量分数、NaH2PO4质量浓度、pH）,并采用正交实验进一步优化实验条件,确定双水相萃取体系为PEG质量分数为30％、NaH2PO4质量分数为20％、体系pH为6,在此条件下Geotrichum sp．SYBC WU-3脂肪酶经硫酸铵沉淀和双水相萃取两步纯化的纯化倍数达到最大,较Geotrichum sp．SYBC WU-3脂肪酶粗酶纯化了22倍。Geotrichum sp．SYBC WU-3脂肪酶纯酶为低温碱性脂肪酶,最适反应温度为15oC,最适pH为9．5,相对分子质量为3．58×10^4。     

双水相萃取法分离竹叶黄酮的工艺研究

以竹叶黄酮水提溶液为原料,采用PEG(聚乙二醇)/(NH4)2SO4双水相体系对竹叶黄酮进行萃取,考察了PEG平均相对分子质量、PEG质量分数、(NH4)2SO4质量分数、pH值、NaCl质量分数、原液质量分数、萃取温度等对双水相及竹叶黄酮萃取效果的影响。双水相萃取法提取竹叶黄酮的最优条件为:PEG 400 31%,(NH4)2SO411%,pH 3.9,NaCl 0.7%,原液51.5%,萃取温度20℃,在此条件下得到的竹叶黄酮萃取率为97.8%。结果说明,双水相萃取法操作简单方便,成本低,不会引起生物质失活或变性,适合于黄酮类化合物的萃取分离。     

利用双水相萃取技术分离纯化尿激酶

通过研究双水相萃取系统的各种影响因素：乙醇／（NH4）2SO4的组成比例、pH值、无机盐的加入、粗酶的浓度等,探索以乙醇／（NH4）2SO4组成的双水相萃取体系纯化尿激酶的最佳条件。建立以乙醇／（NH4）2SO4组成的双水相萃取体系分离纯化尿激酶的新途径。结果表明：双水相萃取系统冰乙醇浓度为65％,（NH4）2SO4浓度为10．0％,pH8．0,酶加入量为30％,且不加入任何其他无机盐的条件下,尿激酶的纯化倍数可达到9．2倍,回收率最高达92％。     

海洋真菌Caldariomyces fumago产氯过氧化物酶的双水相提纯条件

采用聚乙二醇(PEG6000)在(NH4)2SO4高饱和度下沉淀夹带蛋白质富集氯过氧化物酶,再利用磷酸盐溶液复溶解共沉淀物形成的双水相萃取体系高浓度回收酶蛋白,最后再经Sephadex G100柱层析纯化获得高纯度酶试样。结果显示:氯过氧化物酶与PEG共沉淀总活力回收率达85.5%,酶在优化的PEG/磷酸盐双水相系统中上下相分配系数k在0.341以下,酶活力回收率达到69.1%,纯度提高了21.57倍,柱层析可使酶纯度进一步提高到24.79倍,总回收率为37.75%。     

萃取-结晶法制备辣椒碱类化合物工艺研究

为开发一条从辣椒精制备辣椒碱类化合物的工艺路线,考察了皂化、萃取和结晶条件对辣椒碱类化合物收率和纯度的影响,获得了纯化辣椒碱类化合物的最佳工艺条件:5%氢氧化钠溶液皂化辣椒精,皂化液酸化后用乙醚萃取2次,乙醚相用氢氧化钠水溶液萃取3次,所得氢氧化钠萃取液调pH值后结晶,得到辣椒碱类化合物,纯度为98.73%,总收率为78.89%.     

菜籽粕脱毒液中硫代葡萄糖苷提取工艺的研究

本文用两步萃取法从菜籽粕脱毒液中提取硫代葡萄糖苷,以3,5-二硝基水杨酸比色法测定硫代葡萄糖苷含量,采用单因素试验法,分别考察可能影响硫代葡萄糖苷提取效果的各种因素,确定了最佳工艺条件：第一步萃取剂为异辛烷,母液与异辛烷体积比为2：1,搅拌时间为30min,异辛烷萃取次数为2次,异辛烷单次萃取率达71．2％。硫代葡萄糖苷收率为83．7％。     

从发酵液中萃取L-乳酸的工艺

以L-乳酸发酵液为对象,以正丁醇为萃取剂,在pH为2、温度为25℃、n（乳酸）：n（正丁醇）=1：1、乳酸在发酵液中的质量分数为30％时,经3次萃取后,最终的萃取率可达到75．7％。萃取完成后,不需要将乳酸进行反萃,可将所得到的正丁醇-乳酸的混合体系作为底物进行酯化反应,生成乳酸丁酯,从而避开提取纯乳酸的高操作要求。     

双水相体系萃取分离杜仲叶中桃叶珊瑚甙的研究

建立了由高分子化合物聚乙二醇(PEG4000)与葡聚糖40000(D40)形成的双水相体系萃取分离杜仲叶中桃叶珊瑚甙的新方法.考察了萃取体系相图,研究了PEG4000/D40质量分数、样品溶液加入量、pH值和温度等因素对双水相成相及桃叶珊瑚甙萃取率的影响.结果表明:PEG4000的质量分数为11%,D40质量分数为8%、样品溶液加入量为8 g,温度为60℃,溶液pH为7时,双水相体系对桃叶珊瑚甙有较高的萃取率,重复三次可达到66.32%,而且萃取得到的桃叶珊瑚甙产品的纯度达到48.67%,远远高于粗提物中的8.750%.     

超临界二氧化碳萃取鸢尾油的工艺条件研究

本文采用L9（3^4）正交实验考察了二氧化碳超临界萃取中萃取压力、萃取温度和萃取时间对鸢尾精油提取率的影响。结果表明各影响因子的影响顺序为：压力〉时间〉温度;当原料的颗粒度为60-80目、CO2流量为20．0m^3/h时,用超临界二氧化碳萃取鸢尾精油的最佳工艺条件为：萃取压力26．0MPa,萃取温度55．0℃,萃取完成时间为2．5h,此条件下鸢尾香根中鸢尾油的萃取率高达12．71％,得到的精油中鸢尾酮的含量为39．95％,与索氏法和微波提取法相比,超临界萃取具有提取率高和产品质量好的优点。     

糖茶藨种子脂肪酸含量分析

用超临界萃取技术对产于青藏高原上的糖茶蔗种子中脂肪酸进行萃取,其萃取率为12％。用毛细管气相色谱对萃取的脂肪酸进行了分离和分析。结果表明不饱和脂肪酸的质量分数在90％以上。其中α-亚麻酸（α-linolenic acid）为27.4％,У-亚麻酸（У-linolenic acia）为2．70％。亚油酸（1inoleic acid）40．0%,油酸（oleic acid）21．0％。     

超声微波协同萃取(UMAE)番茄中番茄红素的研究

研究了超声微波协同萃取番茄中的番茄红素。以乙酸乙酯为萃取溶剂并以不同的提取时间、微波功率和液固比作为参数进行实验,并进行了工艺优化。在提取时间367s、微波功率98W和液固比10．6：1的条件下实际提取率可达到97．4％。实验结果表明：UMAE法是一种能够快速有效的提取番茄红素的方法。     

‘鸭梨’果心多酚氧化酶提取方法的优化

以‘鸭梨’为供试材料,通过设定不同实验条件,分析影响果心多酚氧化酶（polyphenoloxidase,PPO）提取效率的部分因素,以期找到提取‘鸭梨’果心多酚氧化酶的最适条件。结果表明：磷酸盐提取缓冲液的pH≥7．0,提取缓冲液中分别含有0．2％TritonX-100、1％SDS、6％-8％PVP、2％PVPP以及每克果心鲜样中加入2mg抗坏血酸时均能高效提取‘鸭梨’果心PP0。     

pH调控双水相萃取色素蛋白复合体及其分配行为研究

为发展色素蛋白复合体分离纯化新方法,探究pH调控PEG1000/柠檬酸钾双水相系统萃取分离纯化色素蛋白复合体。优化萃取条件,光谱法研究其分配行为,检测产物纯度和生物活性。结果表明,最佳萃取条件为调节pH9.0,相组成CPEG100019.0%/C柠檬酸钾20.0%,蛋白质加量3.42 mg/g,K和萃取率达到最大,分别为8.8及86.0%。响应面分析法揭示,PEG1000和柠檬酸钾质量浓度及pH对分配系数和萃取率影响显著。调节pH7.0,反萃取分配系数和反萃取率最小为0.15及86.6%。蛋白质总回收率为74.2%。pH对色素蛋白复合体分配行为具有调控作用,pH大于8.5体系,色素蛋白趋于分配上相,反之分配于下相,PEG1000/柠檬酸钾以及蛋白质加入量不影响色素蛋白复合体分配于上相。电泳表征发现,萃取(pH9.0)上相存在2个蛋白质组分,相对分子量(MW)为7.0 kD及14.0 kD。反萃取(pH7.0)使相对分子量7.0 kD蛋白质组分分配于下相,该组分为LH2β亚基,经萃取和反萃取产物生物活性稳定。pH可调控PEG1000/柠檬酸钾双水相系统萃取分离色素蛋白复合体,产物纯度高,生物活性稳定。     

紫球藻藻红蛋白的分离纯化及光谱学特性

采用4℃反复浸提、离心、硫酸铵沉淀、DEAE—Sepharose Fast Flow离子交换柱层析,从紫球藻（Porphyridium cruentum Naegeli）冻干粉中分离纯化藻红蛋白,分离纯度达到4．85,总收率51．9％;经羟基磷灰石柱层析纯化,藻红蛋白纯度达到5．10,总收率34．0％,聚丙烯酰胺凝胶电泳显示1条带。所分离纯化的藻红蛋白含有3个亚基（α、β、γ）,在可见光区545nm和560nm处有2个吸收峰,在498nm处有1个吸收肩峰。实验结果说明所分离纯化的藻红蛋白纯度符合要求。     

白地霉Cryytococcus neoformans脂肪酶的双水相萃取

本文研究了不同无机盐的双水相体系对白地霉脂肪酶的萃取分离效果,对PEG/（NH4）2SO4成相系统进行了系统的研究,通过考察体系PEG分子量、不同的无机盐、PEG浓度、（NH4）2SO4浓度、离子强度、pH值及（NH4）2SO4浓度对反萃取的影响,并通过正交实验进一步优化了实验条件,初步确定在PEG浓度15%,（NH4）2SO4浓度22.5%,pH8.0,不加NaCl的条件下进行双水相萃取,脂肪酶分离系数和纯化倍数分别为6.8和7.5,比活力达到40.3 U/mg蛋白。     

超临界CO_2萃取大豆油与大豆磷脂工艺条件研究

应用超临界CO2 萃取技术从大豆中直接提取大豆油和纯度为 95 98%的大豆磷脂。探讨了超临界CO2 萃取的压力、温度、流量、时间等条件对大豆油和大豆磷脂的影响 ,确定其最佳萃取条件 :萃取压力 2 5MPa ,温度 5 0℃ ,CO2 流量 30kg h ,萃取时间15 0min ,大豆磷脂夹带剂乙醇的流量为 3kg h ,得率分别为 15 72 %和 1 95 4 %。