从麻疯树上胚轴外植体再生植株

以麻疯树上胚轴为实验材料在MS添加IBA和BA的培养基上进行离体培养实验.结果表明,在IBA O.1 mg/L与BA 0.2～0.7 mg/L组合的条件下,不定芽从上胚轴外植体的表面直接被诱导分化,其中以在MS IBA 0.1 mg/L BA 0.5 mg/L上的诱导率最高.从愈伤组织来源的植株再生需要IBA 0.5 mg/L与BA 0.1 mg/L、IBA 0.5 mg/L与BA0.2mg/L以及IBA1.0mg/L与BA0.5mg/L的激素组合,其分化的最佳培养基是MS IBA1.0 mg/L BA0.5 mg/L.生长健壮的不定芽和再生植株能在无激素的MS基本培养基上生根.发育良好的再生苗可成功地转移到温室栽培而没有可见的变异.     

川芎高频再生体系的建立

为建立川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)高频再生体系,优化了诱导和分化培养基及培养条件.以叶柄为外植体,以MS为基本培养基,KT2.0 mg/L+ IAA0.5mg/L的激素组合对不定芽分化最有利.在此基础上,针对外植体来源、培养条件和愈伤组织继代时间3个因素进行优化.结果表明:采用川芎无菌苗叶柄作为外植体,黑暗条件下诱导出愈伤组织,再在光照下继代培养15d后转入分化培养基中对不定芽诱导最为有利,分化率为44.4％.分化后得到的不定芽在含NAA0.5 mg/L和IBA 0.5 mg/L的1/2MS培养基上生根率达90％,移栽存活率为95％.     

黄花补血草愈伤组织的诱导和植株再生

以黄花补血草(Limonium aureum(L.)Hill.)无菌苗为材料,研究了不同激素配比条件下不同外植体愈伤组织的诱导及植株再生.结果表明,黄花补血草无菌苗叶片、叶柄和幼根均可作为离体培养的外植体,但叶片和叶柄的诱导率明显高于幼根.将外植体接种于分别添加0.5 mg/L NAA或1.0 mg/L 2,4-D或0.3-0.5 mg/L 6-BA 0.5-2.0 mg/L NAA的MS培养基上,经过14-28 d培养后,可脱分化产生乳白色、红色或浅绿色颗粒状或致密愈伤组织,频率达到70%以上.在MS 0.3 mg/L 6-BA 1.0 mg/L NAA培养基上,红色和绿色颗粒状愈伤组织经过1-2次继代后,均可分化产生不定芽,进而形成丛生芽,分化率达到100%.将高约3 cm的丛生芽切下,接种于分别添加0.5 mg/L IAA或0.5 mg/L IBA的1/2 MS培养基上可产生不定根,获得完整的再生植株.     

云南大叶茶体细胞胚发生及体细胞胚苗形成体系的建立

利用云南大叶茶(Camellia sinensis var.assamica Kitamura)胚性细胞系(CL_1)中悬浮培养物,建立了高频率同步化体细胞胚发生及体胚苗形成体系。以改良的MS为基本培养基,将CL_1中培养物由液体保持培养基(0.1mg/L 2,4-D 0.5mg/L 6-BA)继代转入液体诱导培养基(0.05mg/L 2,4-D 0.50mg/L6-BA),暗培养诱导28d,转入不含任何激素的液体分化培养基中再培养28d,获得了不同发育时期的体细胞胚,其发生频率为81.5％。不同发育时期的体细胞胚用不同目的细胞筛收集,在液体生长培养基(1/2 MS 1.0mg/L GA_3 0.5mg/L 6-BA)中培养发育成熟。ABA有利于高质量体细胞胚的形成。20～70月大小的体细胞胚在固体生长培养基中成苗转换率为75％。在液体悬浮培养条件下观察记录了体细胞胚发育过程,证实其过程与合子胚的形态发生过程相似。     

墨兰的无菌播种和植株再生

墨兰的无菌播种结果发现,在不添加细胞分裂素的培养基上,种子可以发芽,但只有原球茎和根状茎产生;不可能进一步分化成苗,只有在含有不同激素成分的MS或KnudsonC培养基上,才有可能诱导芽的分化,其中以附加6-BA 0.5-1.0mg/L+NAA 0.1mg/L诱导效果最佳,在附加6-BA 2.0mg/L+NAA 0.4mg/L的MS培养基中,能加速芽的增殖,根状茎转入含有相同激素成分的液体增殖培养基中振荡培养,可大大提高芽的分化速率。添加0.5%活性炭对芽的分化有明显增效作用。在附加NAA 0.2mg/L的MS培养基中;幼苗的生根效果最佳。     

川芎高频再生体系的建立

为建立川芎(Ligusticum chuanxiong Hort.)高频再生体系,优化了诱导和分化培养基及培养条件。以叶柄为外植体,以MS为基本培养基,KT 2.0 mg/L+IAA 0.5 mg/L的激素组合对不定芽分化最有利。在此基础上,针对外植体来源、培养条件和愈伤组织继代时间3个因素进行优化。结果表明:采用川芎无菌苗叶柄作为外植体,黑暗条件下诱导出愈伤组织,再在光照下继代培养15 d后转入分化培养基中对不定芽诱导最为有利,分化率为44.4%。分化后得到的不定芽在含NAA 0.5 mg/L和IBA 0.5 mg/L的 1/2MS培养基上生根率达90%,移栽存活率为95%。     

濒危植物盐桦离体组织培养特性的研究

目的:探讨新疆濒危植物盐桦离体组织培养的特性。方法:从盐桦原生地阿尔泰阿拉哈克盐湖边采摘盐桦休眠实生苗上的落叶枝条,待其萌发后分别取带芽嫩茎、嫩茎茎段及嫩叶芽尖三种不同材料接种于启动培养基,比较三种盐桦离体组织的诱导分化,继而设计不同激素、不同水平的单因子试验和正交试验,筛选适宜盐桦外植体芽增殖和生根的分化培养基。结果:诱导盐桦芽增殖的最佳外植体是带芽嫩茎,盐桦外植体增殖、壮苗最适培养基为:MS 6-BA 1.0mg/L IBA 0.5mg/L;盐桦外植体生根最适培养基为:1/2MS IBA 0.5mg/L 蔗糖30g/L 琼脂7% 暗光处理3d。结论:本研究筛选获得适宜盐桦芽增殖和生根的最佳培养条件,为高效扩繁和保存盐桦种质资源奠定了基础。     

金线莲外植体筛选及愈伤组织诱导研究

以金线莲茎段、叶片、茎片、不定芽为试材,分别在添加6-BA、ZT、NAA、KT 5个不同处理的MS及1/2MS培养基上培养,诱导愈伤组织。结果表明,以茎段、茎片、不定芽为外植体,在MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA0.5 mg/L、MS + NAA 2.0 mg/L + KT 0.1 mg/L和MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L + ZT 0.2 mg/L培养基中培养,均能成功诱导愈伤组织。不定芽为诱导愈伤组织最佳外植体,最佳培养基为MS + 6-BA 2.0 mg/L + NAA 0.5 mg/L + KT 0.2 mg/L。     

菜用太和香椿离体繁殖

植物名称:太和香椿(Toona sinensis)名贵品种安徽“黑油椿”和“红油椿”。材料类别:成年树的一年生休眠条。培养条件:休眠条经冷藏和催芽处理。冷藏温度为4±1℃。催芽溶液:水(对照)、BA1.0mg/L水溶液、2％蔗糖溶液。其中以BA液最好,休眠条萌生新条多,生长好;蔗糖溶液抑制休眠条上芽的萌发。剪切新枝条,表面消毒后剥去树皮,切取芽并接种在木本植物培养基(WPM)上(Lloyd G.McCownBH.1981,Comb.Proc.Intorn.Plant Prop.Soc30:421～427),附加BA0.5mg/L。培养温度25～27℃,每日14小时光照和10小时黑暗,光照强度为4000lx。     

姜花属种间杂交胚拯救研究

为提高姜花属种间杂交胚挽救中幼胚萌发率,以白姜花×金姜花的胚珠为试材,研究不同胚珠发育时期、不同培养基及低温处理果实对幼胚萌发率的影响.结果表明,白姜花×金姜花胚挽救的适宜培养基是MS+0.1 mg/L BA十0.1 mg/L NAA;接种时期以60 d的幼胚培养效果最佳;低温处理果实3～6 d能有效提高幼胚的萌发率.     

唐菖蒲球茎芽的离体培养及快速繁殖

将带1-2个芽眼的唐菖蒲球茎切块接种到附加1.0mg/LBA的MS基本培养基上可诱导休眠芽萌动、无菌芽转移至附加3.0mg/LBA的培养基上可分化产生丛生芽。丛生芽的继代增殖宜采用附加1.5mg/LBA的培养基生根培养,以MS+NAA 0.1-0.5mg/L或MS+IBA 1.5mg/L效果最佳。试管苗移栽存活率可达50%左右。     

三叶半夏种质资源扩繁及保存研究*

目的:通过对三叶半夏扩繁和保存方法的研究,为三叶半夏种质资源的保育和开发利用提供技术支撑。方法: 首先,通过灭菌条件筛选、愈伤诱导及丛生芽诱导等进行扩繁条件探索;其次,通过设置不同基本培养基、蔗糖浓度、不同温度和光照强度等条件探索合适的种质保存条件;最后,探索了休眠块茎唤醒方式和丛生芽再诱导方法,为种质资源再扩繁提供基础。结果: 以叶柄为外植体,升汞灭菌12 min后,接种至添加2,4-D的培养基中可诱导疏松愈伤组织。外植体接种至MS+2.0 mg/L 6-BA+0.1 mg/L NAA+蔗糖30 g/L +琼脂6.0 g/L,pH 5.8中可进行丛生芽诱导。合适的种质保存基本培养基为MS和N6培养基;合适的蔗糖浓度为30 g/L,过低或过高均不利于种质保存;在丛生块茎诱导时需要提供足够的温度和光照,低温及避光条件不利于种质保存。待丛生芽自然倒苗休眠后可进行长达1~2年的离体保存。对休眠块茎进行唤醒诱导时可采用切割块茎后再接种的方式。萌发出来的叶柄直接进行丛生芽诱导增殖,而块茎则接种至MS+6-BA 1.0 mg/L+NAA 0.2 mg/L+蔗糖30 g/L+琼脂6.5 g/L,pH 5.8中进行再分化诱导丛生芽。诱导出来的丛生芽进行规模化扩繁或继续进行离体保存。结论: 通过对三叶半夏的种质扩繁,筛选合适的条件得到休眠丛生块茎,可对三叶半夏进行长时间的离体保存,而后唤醒和再次诱导的相关研究,为其种质资源保存、利用提供技术基础。     

八角莲组织培养研究

以八角莲种子为外植体,MS为基本培养基,通过不同的激素种类和浓度配比,对八角莲进行组织培养研究。结果表明:种子在MS+BA1.0mg/L+IBA0.5mg/L+GA34.0mg/L培养基上容易萌芽,发芽率为72.4 %;培养基MS+BA10.0mg/L+GA30.5 mg/L可诱导种子幼苗形成丛生芽;继代繁殖在MS+BA(8.0～10 .0)mg/L+GA32 .0mg/L与低浓度BA或无BA的培养基上进行循环培养效果较好;MS+NAA1.0 mg/L+AC0.2g/L适宜诱导生根获得再生植株,生根率100%。带叶叶柄在MS+BA1.0mg/L+2-ip(0.5～1.0) mg/L+NAA0.02 mg/L培养基上可诱导愈伤及根,直接形成再生植株。生根苗移栽成活率90 %。     

海南龙血树离体快速繁殖

以3月龄高约25cm的海南龙血树为基本材料,以茎节纵切块为外植体,在改良MS 6-BA2.0mg/L NAA0.1mg/L培养基中培养1个月后萌芽率为78.6%。萌芽在MS 6-BA1.5mg/L NAA0.2mg/L培养基中连续两次继代培养,2个月后芽增殖倍数为2.9。丛芽及单芽都在MS 6-BA1.0mg/L NAA0.2mg/L培养基中进行培养,1个月后丛芽的单芽增殖倍数为4.6,单芽增殖倍数为0.8。萌芽放入MS(改良) NAA0.2mg/L培养基中进行培养,生根率为100%,移栽成活率为100%。     

酿酒葡萄"梅尔诺"再生系统建立的研究

以酿酒葡萄“梅尔诺”离体胚珠、叶柄为材料．通过控制激素水平、光照和温度等,对建立再生体系的器官发生途径和体胚发生途径进行了研究。结果表明,体胚的诱导和不定芽的再生与基本培养基、叶柄的着生部位、生长调节物质种类和浓度等因素有关。由“梅尔诺”的胚珠愈伤组织再生出体细胞胚的最佳培养基配方为CPSE培养基(CP287 BA 0．2mg／L NOA 1．0mg／L),体细胞胚再生率可达47．50％。“梅尔诺”体细胞胚在CPSE培养基上100％萌发为芽状,将其切断置于培养基MS TDZ 4．0mg／L上可直接诱导出绿色不定芽,再生率为52．25％;同时在培养基MS TDZ2．0mg／L上获得了“梅尔诺”离体叶柄再生不定芽．再生率为62．42％．二者再生的不定芽的最他增殖培养基为MS BA0．5mg／L。“梅尔诺”体细胞胚的萌发芽在WPM培养基中能很好的生根及成苗,并建立了单芽茎段微繁体系。     

马铃薯离体再生及人工种子研究

马铃薯３个品种虎头,克４和Ｆａｖｏｒｉｔａ的茎叶外植体在ＭＳ＋１ｍｇ／ＬＮＡＡ＋１ｍｇ／ＬＢＡ培养基上形成愈伤组织。在ＭＳ＋０２ｍｇ／ＬＮＡＡ＋１ｍｇ／ＬＢＡ培养基上,愈伤组织分化产生不定芽。在ＭＳ＋００５ｍｇ／ＬＮＡＡ培养基上,不定芽生根形成再生完整植株。０２～０３ｃｍ大小的不定芽反复继代可持续增殖。有３个以上叶片的不定芽在ＭＳ＋５ｍｇ／ＬＢＡ＋００５ｍｇ／ＬＩＢＡ培养基上和黑暗条件下,在侧芽或顶芽部位形成微型薯。用４％海藻酸钠和２％氯化钙溶液包裹０２～０３ｃｍ大小的不定芽或直径为０２～０３ｃｍ的微型薯制成微芽人工种子和微薯人工种子。在４℃下贮存２个月后,微芽人工种子和微薯人工种子在有菌腐殖土壤中播种２１ｄ的萌发率分别是１５７％和９６２％。     

扁桃优良砧木离体快繁

对扁桃优良砧木“Hansen”侧芽进行离体快繁研究,结果表明：外植体取材时间不同,成活率差异明显,以春季芽即将萌动的3月下旬为最佳时间,在MS 6-BA1．0mg／L GA30．2mg／L培养基上诱导芽萌发,萌发率在75％以上;以MS 6-BAl．5mg／L IAA0．1mg／L进行芽的增殖培养效果最好;1／2MS IBA0．5mg／L诱导生根,并给以黑暗预处理可使生根率达85％以上,每株生根数量多,根系质量好;采用分步炼苗移栽,提高了小苗成活率,有利于小苗后期生长。     

普通荞麦植株茎段快速繁殖技术的研究

以普通养麦（Fagopyrum esculentum Moench）植株带节茎段为外植体,用正交设计法研究不同激素处理对荞麦腋芽、丛生芽和根的诱导及分化过程的影响,建立了荞麦离体培养快速繁殖技术。极差分析表明,6-BA是诱导荞麦茎段腋芽和根发育的主要因素,TDZ是诱导丛生芽的关键因素。诱导荞麦茎段腋芽发育的最佳培养基为：MS0＋6-BA1．0mg／L＋NAA0．1mg／L,腋芽诱导率为67．9％。其中,以第二、三节位的腋芽诱导率较高,达80％以上。诱导荞麦茎段丛生芽发育的最佳培养基为：MS0＋6-BA4．0mg／L＋TDZ0．06mg／L,丛芽分化率为166．7％。诱导生根的最佳培养基为：1／2MS0＋6-BA1．0mg／L＋NAA1．0mg／L,生根率为82．8％。该组织培养技术的建立为养麦快速繁殖提供了新途径。     

毛刺槐花药培养及再生植株的获得

以毛刺槐的花药为材料,开展其组织培养和植株再生系统的研究。结果显示：将毛刺槐的花药接种在MS附加2,4—D0．1mg／L和BA3．0mg／L的培养基上,20d时花药愈伤组织诱导率可达41．5％。花药愈伤组织在MS附加BA5．0mg／L的分化培养基上继代培养2个月后,可分化出许多绿色的芽点,待不定芽长至2—3cm高时将其切下,转入MS附加IBA1．0mg／L的生根培养基上,2周后即可得到完整的再生植株。同时,研究就4℃低温预处理和蔗糖浓度对毛刺槐花药培养的影响进行了研究和讨论。     

中国石竹离体快繁与试管苗玻璃化研究

研究了培养基组成成分对中国石竹品种Diana F1 White组培程序中种子萌发、诱芽增殖、试管苗玻璃化及生根等重要环节的影响。结果表明:(1)种子适宜的萌发培养基为1/2MS,在此培养基中种子萌发率为83.33%,播种后30d时无菌苗高度达6.99cm,叶片数达26.7。(2)在芽诱导阶段玻璃化苗发生率最高可达53.85%。将光照强度提高至2000lx后,采用培养基MS+6-BA3.0mg/L+NAA0.3mg/L+琼脂8.0g/L+蔗糖8.0g/L进行诱芽培养,玻璃化苗发生率降至3.33%,外植体出芽率达到90%,单个外植体出芽数达到7.2个。(3)适宜的生根培养基为1/2MS+1.0mg/LIBA+琼脂8g/L+蔗糖40g/L,培养30d时生根率为100%,平均根条数达到24.7条,平均根长度达到4.7cm。试管苗在消毒后的腐殖土中移栽,成活率达95%。该研究结果为DianaF1试管苗的快速繁殖提供科学依据。