柴胡多糖的结构和抗氧化活性分析

用超声波辅助提取法从柴胡中提取、分离得到多糖SAP3。高效液相色谱法测定其相对分子质量,红外光谱、气相色谱和原子力显微镜对其结构进行初步分析。结果表明:柴胡多糖SAP3是组分均一的多糖,由鼠李糖、木糖、甘露糖、葡萄糖、半乳糖组成,平均相对分子质量为3.3×105。红外光谱分析表明:柴胡多糖具有一般多糖类物质的特征吸收峰,单糖残基以吡喃环的形式存在。原子力显微镜显示柴胡多糖糖链具有分支结构,并缠绕形成环状结构。在0.2~1.2 mg/mL的实验浓度范围内,随着多糖质量浓度的升高,柴胡多糖SAP3对.OH的清除率逐渐增大,最大清除率可达45.2%。     

白术多糖WAM-1结构的色谱分析和原子力显微镜观察

通过热水浸提法从草本植物白术根茎提取的水溶性粗多糖,经DEAE-52纤维素柱层析分离和Sephadex G-200凝胶过滤柱层析纯化,得到组分WAM-1.采用高效液相色谱(HPLC)检测WAM-1的纯度,气相色谱(GC)对其单糖组分进行分析,原子力显微镜(AFM)对其分子外貌进行观测.结果显示:WAM-1为均一多糖,由葡萄糖和半乳糖以3.01:1摩尔比构成;在不同浓度溶液条件下,WAM-1分子以不同形态存在,多糖溶液的浓度对WAM-1的分子链构象及链间相互作用形式产生影响,推测可能与WAM-1分子内、分子间的氢键缔合作用有关.多糖浓度为10μg/mL时,可清晰的观察到WAM-1是以刚性链状形态存在,且具有多分支结构.     

夏枯草多糖的分离、纯化及结构初步分析

采用100℃热水提取,得到夏枯草粗多糖。经阴离子交换柱层析、凝胶过滤柱层析对粗多糖进行纯化分级,通过高效凝胶过滤色谱测得了其主要组分PLS3的重均分子量为8.3×10-5Da。对PLS3进行了红外分析,测定了其初步结构;并分别以气相色谱和柱前衍生化高效液相色谱法测定了粗多糖和PLS3的单糖组成,发现两者所含单糖种类一致,都为半乳糖、葡萄糖、甘露糖、木糖、阿拉伯糖、鼠李糖,但两种物质的单糖组成相对摩尔百分比有所差异。     

苦瓜多糖的提取、分离纯化及组成性质

正交实验确定提取工艺后,用热水提取法得到苦瓜多糖(MCP).对MCP进行DEAE-32离子交换层析分离,得到3个多糖组分MCP1、MCP2和MCP3. 进一步采用Sephacryl S-400凝胶层析进行分离,经凝胶层析和高效液相色谱检测表明,MCP1、MCP2为均一性多糖组分.通过高效液相凝胶色谱法测定了两者的相对分子质量分别为1.16×106和7.45×105.用PMP衍生化法测定其单糖,结果表明: MCP1系由Man、Rham、GlcUA、GalUA、Glu、Gal、Xyl、Ara等单糖组成的杂多糖,摩尔比为1.03:2.93:1.00:14.95:2.16:30.70:2.85:4.50.MCP2系由Rham、GalUA、Gal、Xyl、Ara等单糖组成的杂多糖,对应的摩尔比为1.63:21.88:4.66:1.00:1.29.紫外光谱表明该多糖不含蛋白质和核酸.     

苦豆子多糖的分离纯化及初步结构北大核心CSCD

本文研究了苦豆子多糖的分离纯化以及初步结构。采用水溶醇沉方法提取粗多糖,然后通过离子交换层析分离纯化,采用高效凝胶渗透色谱、气相色谱、紫外吸收以及红外吸收光谱对多糖组分进行分析研究。获得苦豆子多糖相对分子质量均一性组分SPN和SPA,测得其平均相对分子质量分别为1.217×106Da和4.412×105Da,二者均不含蛋白质,且都具有红外的多糖特征吸收峰,其单糖组成(质量比)分别为阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=7.90∶11.24∶86.24∶18.81∶16.89、鼠李糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=1.50∶5.80∶1.72∶20.10∶1.64∶27.20。本文为苦豆子多糖的进一步研究开发提供理论依据。     

苦豆子多糖的分离纯化及初步结构

本文研究了苦豆子多糖的分离纯化以及初步结构。采用水溶醇沉方法提取粗多糖,然后通过离子交换层析分离纯化,采用高效凝胶渗透色谱、气相色谱、紫外吸收以及红外吸收光谱对多糖组分进行分析研究。获得苦豆子多糖相对分子质量均一性组分SPN和SPA,测得其平均相对分子质量分别为1.217×106Da和4.412×105Da,二者均不含蛋白质,且都具有红外的多糖特征吸收峰,其单糖组成(质量比)分别为阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=7.90∶11.24∶86.24∶18.81∶16.89、鼠李糖∶阿拉伯糖∶木糖∶甘露糖∶葡萄糖∶半乳糖=1.50∶5.80∶1.72∶20.10∶1.64∶27.20。本文为苦豆子多糖的进一步研究开发提供理论依据。     

雪灵芝多糖的分离纯化及免疫活性评价

为分离纯化雪灵芝(Arenaria kansuensis)多糖,并对纯化组分进行分子量测定、单糖组分分析及免疫活性评价。实验采用水提醇沉法提取雪灵芝粗多糖(Arenaria kansuensis crude polysaccharide, AKCP);以DEAE-52纤维素柱对AKCP进行分离纯化,获得5个雪灵芝多糖组分AKP-1～AKP-5,进一步采用葡聚糖凝胶G-75柱对AKP-2进行分离纯化获得AKP-2a多糖组分。苯酚-硫酸法测定AKCP、AKP-2及AKP-2a的总糖含量分别为52%、70%和79%;凝胶渗透色谱-十八角度激光光散射(GPC-MALS)法检测AKP-2a的重均分子量Mw为2.07×10~5Da、数均分子量Mn为9.838×10~4Da;HPLC法检测AKP-2a是由半乳糖醛酸、甘露糖、核糖、鼠李糖、葡萄糖醛酸、葡萄糖、半乳糖、木糖、阿拉伯糖、岩藻糖10种单糖组成,其摩尔比为1∶0.25∶0.01∶0.20∶0.11∶0.25∶0.61∶0.07∶0.21∶0.12;以MTT法检测体外培养小鼠脾淋巴细胞增殖,AKCP、AKP-2及AKP-2a各浓度组SI水平,均明显高于对照组(P<0.05)。经NO释放实验及IFN-γELISA检测,AKP-2a各浓度组小鼠腹腔巨噬细胞培养上清中二者的水平,较对照组呈浓度依赖性增高(P<0.01)。综上结果,本研究通过分离纯化,获得了总糖含量较高的雪灵芝多糖AKP-2a组分,初步确定其分子量范围及单糖组成,并证实其具有激活淋巴细胞增殖、促进巨噬细胞功能的生物活性。     

利用傅立叶红外光谱和原子力显微镜研究超声提取对鸡腿菇多糖结构的影响

利用沸水浴法和超声辅助提取法提取鸡腿菇粗多糖,分别得到对应的多糖水浴提取的多糖(WCP)和超声提取的多糖(UCP)。采用苯酚硫酸法测得WCP和UCP中的总糖质量分数分别为87.997%和72.937%。用季铵盐沉淀法和Sephadex G 200凝胶层析法对WCP和UCP进行分离纯化,得WCP3 1、UCP3 1 2个主要组分,用傅立叶红外光谱(FTIR)和原子力显微镜(AFM)对提取多糖的结构进行表征。结果显示:WCP3 1和UCP3 1均具有一般多糖类物质的特征吸收峰,WCP3 1和UCP3 1的单糖残基均以β吡喃环存在,但超声波可导致部分C O双键断裂形成C—O链接;WCP3 1呈现大量的近似螺旋聚集体和少量球状聚集体,但是UCP3 1是较小的分散球状聚集体,说明超声波可断裂多糖的分子链间或链内氢键,导致近似螺旋聚集体的降解。     

夏枯草多糖分离纯化、相关性质及药效

研究了夏枯草多糖的提取工艺、分离纯化、部分理化性质以及夏枯草多糖的免疫学活性。夏枯草经水提醇沉,去蛋白、脱色、凝胶柱色谱等步骤分离纯化得到夏枯草精多糖（Pure polysaccahrides of Spica prunellae,PPSP）。HPGPC法测其相对分子质量,红外光谱法对其结构进行初步分析,柱前对氨基苯甲酸衍生化HPLC法测其单糖组成。免疫学实验证明夏枯草精多糖单独作用或协同ConA均可显著促进小鼠脾淋巴细胞增殖,夏枯草精多糖在200μg／mL质量浓度下对正常小鼠的廓清指数和吞噬指数有明显促进作用。     

红托竹荪菌托多糖的提取及抗肿瘤活性的初步研究

红托竹荪菌托经热水提取、酒精沉淀、脱蛋白后的粗多糖,其得率远大于其菌丝体和子实体的其他部位及香菇子实体.菌托粗多糖进一步用DEAE纤维素柱和Sephadex G-75分离纯化,得到两个组分DRVP1与DRVP2,对分离得到的主要多糖通过高效液相色谱(HPLC)、红外光谱(IR)等进行结构分析.DRVP1的相对分子质量(Mr)为1.47×104,红外光谱数据显示为β-型甘露糖苷.体外试验表明,红托竹荪菌托多糖的组分DRVP1对小鼠S180肉瘤有一定的抑制作用.     

双歧杆菌及其完整肽聚糖对脐血来源树突状细胞分泌IL-12的影响

目的探讨两歧双歧杆菌和不同剂量双歧杆菌的完整肽聚糖（WPG）对脐血来源树突状细胞（DC）分泌IL-12的影响。方法以双歧杆菌全菌（量）和不同剂量双歧杆菌WPG（1-8μg/ml）与脐血来源树突状细胞共培养,用ELISA的方法测定培养上清中IL-12的量。结果双歧杆菌和其WPG（1-6μg/ml）与树突状细胞共培养后,树突状细胞分泌的IL-12的量显著高于阴性对照组（P〈0.01）,当WPG量为1-5μg/ml时树突状细胞分泌的IL-12的量呈剂量依赖性,其中WPG量为5μg/ml时作用最为显著,WPG量为6μg/ml时分泌IL-12量减少,WPG量为8μg/ml时,分泌的IL-12量与阴性对照组差异无显著性（P〉0.05）。结论两歧双歧杆菌及其WPG能够刺激脐血来源的树突状细胞IL-12分泌;双歧杆菌WPG的免疫刺激作用呈一定的量效关系     

黄粉虫幼虫小分子量抗茵肽的分离纯化

昆虫抗菌肽具有良好的抑菌效果,有望开发成新一代抗生素。本文以金黄色葡萄球菌和大肠杆菌混合液作为诱导源,采用针刺法使黄粉虫TenebriomolitorL．幼虫感染微生物产生抗菌肽,并对抗菌肽进行了提取、色谱分离纯化及抑菌活性检测。结果显示,诱导组和对照组的三氟乙酸粗提物无抑菌活性;经SephadexG50、SuperdexPeptide凝胶色谱分离后,从诱导组和对照组均可获得对革兰氏阳性菌金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌有抑菌作用的组分,而且诱导组活性明显高于对照组;通过Resource15RPC反相色谱分离纯化,从诱导组获得一具有明显抑制革兰氏阳性菌的组分,质谱检测该组分为混合肽,主要由分子量为1876．21u、1904．21u的小肽组成,可能是一种比Thanatin分子量更低的昆虫抗菌肽。     

质谱法分析大鼠精子发生过程中组蛋白H1变异体的多样性

目的为探究连接组蛋白H1在精子发生过程染色体重构中的功能,了解一共有多少种连接组蛋白H1参与各期生精细胞的染色体的构建。方法分离高纯度的SD大鼠的各期生精细胞,提取组蛋白,应用SDS-PAGE分离组蛋白的各组分,组蛋白（H1）经过蛋白酶（Glu-c和Arg-c）酶切,应用质谱进行检测。结果鉴定了组蛋白H1的体细胞亚型（H1.1-H1.5）和睾丸特异的连接组蛋白亚型（H1t）。组蛋白H1t分别表达在精原细胞,精母细胞和圆形精子细胞中。结论大鼠精子发生过程中,其主要连接组蛋白H1的种类是：H1.1-H1.5和H1t。     

Purification and antitumor activity of two acidic polysaccharides from the roots of Polygala tenuifolia

Two acidic polysaccharide fractions (PTPa and PTPb) extracted from the roots of Polygala tenuifolia, were obtained by DEAE-Sephacel anion-exchange, and Sephadex G-100 gel-permeation chromatography. High-performance liquid chromatography (HPLC) identified that PTPa and PTPb was composed of Ara, Glc, Gal, Man and GlcUA in the proportion of 2.4:1.2:0.6:0.4:1.1 and 2.1:1.7:0.5:0.6:1.7, respectively. Their molecular weight was evaluated to be 5.9×10(4) (PTPa) and 2.5×10(4)Da (PTPb) as determined by high performance size exclusion chromatography (HPSEC). Pharmacological studies revealed PTPa and PTPb significantly inhibited the growth of A549 cells in vitro and exhibited significantly higher antitumor activity against solid tumor A549 in vivo than did a blank control. Moreover, treatment with two acidic polysaccharides caused an enhancement of superoxide dismutase (SOD) and catalase (CAT) activities in tumor-bearing mice and a reduction in thiobarbituric acid reactive substances (TBARS) level. Taken together, these results indicated that two acidic polysaccharides from the roots of P. tenuifolia may be useful as potent antitumor agents for the prevention of lung tumorigenesis.     

滑菇多糖wPNP-a1的制备及结构分析

利用传统热水浸提法提取滑菇粗多糖(wPNP),进而用季铵盐沉淀法和Sephadex G-150凝胶色谱柱层析对wPNP进行纯化,得滑菇多糖wPNP-a1.以高效液相色谱(HPLC)、傅里叶变换红外光谱(FIR)、气相色谱(GC)、核磁共振(NMR)、环境扫描电子显微镜(ESEM)和原子力显微镜(AMF)等方法分析wPNP-a1的结构,结果表明,滑菇多糖wPNP-a1的分子量为419310 Da,具有一般类多糖的特征吸收峰,糖苷键为β-型,不含乙酰基,由木糖、甘露糖、半乳糖和葡萄糖组成,其摩尔比为3.91∶2.77∶1.91∶1;wPNP-a1的分子间排斥力较大,分子间吸引力较小,在云母表面呈直链状分布,链宽23 nm左右,链高0.7～0.8 nm.     

蝎毒抗癌组分SVⅡ分离法的优化研究

目的比较三种柱径的分子筛G-50凝胶层析柱分离东亚钳蝎蝎毒的柱效;并对分离所得组分作MTT（酶反应比色法）抗肿瘤活性作用研究,为从中研制和开发出高效、低毒的新型抗癌特效药筛选出目标组分。方法（1）采用三种规格的分子筛层析柱分离蝎毒;（2）HPLC色谱分析比较各组分的指纹图谱;（3）MTT法观察不同浓度（1、10、100mg／L）的蝎毒及其组分对四种肿瘤细胞（HL-60、A549、K562／ADR、K562／S等）的毒性作用。结果经过分子筛柱层析,可从蝎毒（Scorpion venom,SV）获取三个组分SVⅠ、SVⅡ、SVⅢ;经HPLC色谱分析,各组分明显含有四种以上单体成分;MTT法研究表明,SVⅡ对四种肿瘤细胞的细胞毒性较原毒强,剂量-效应关系较好,而SVⅠ、SVⅢ对四种肿瘤细胞抑制作用不明显。结论（1）利用大柱径的层析柱分离蝎毒的柱效较高;（2）组分SVⅡ是蝎毒抗癌的目标组分,且其对耐药细胞株（K562／ADR）的抑制作用比阳性对照组强,有待进一步的分离纯化,筛选出色谱纯的抗癌活性成分（多肽单体）。     

六妹羊肚菌多糖的提取工艺优化及结构表征和抗氧化活性

六妹羊肚菌Morchella sextelata是一种珍贵的食药用真菌,具有重要的经济价值。本研究在单因素试验基础上,采用响应面分析法优化其多糖提取工艺,利用Sevage法及透析法对粗多糖进行初步纯化,获得六妹羊肚菌多糖（Morchella sextelata polysaccharide,MSP）组分。采用凝胶色谱-示差-多角度激光光散射（gel permeation chromatography- refractive index-multi angle laser light scattering,GPC-RI-MALLS）、高效阴离子交换色谱（high performance anion exchange chromatography,HPAEC）、傅里叶变换红外光谱仪（fourier transform infrared spectrometer,FTIR）和气相色谱质谱联用仪（gas chromatography-mass spectrometry,GC-MS）等对其进行结构分析,并检测了该多糖清除自由基活性的能力。结果表明,六妹羊肚菌多糖最优提取工艺为：提取温度89.94℃、液料比31.07mL/g、提取时间162.86min。在此工艺条件下,提取率为23.98%。该多糖主要由分子量为4.655×10 ⁶Da和6.571×10 ⁴Da的两个组分组成,其单糖组成为葡萄糖、甘露糖、半乳糖,摩尔百分比分别为71.60%、23.70%和4.70%。该多糖的糖苷键主要有T-Glc、1,2-Man、1,4-Glc、1,6-Man、1,3,4-Man、1,4,6-Gal。此外,该多糖具有较强的清除2,2‐联氮基双‐3‐乙基苯并噻唑啉‐6‐磺酸[2,2‐azino bis (3‐ethylbenzothiazoline‐6‐sulfonic acid),ABTS]、1,1‐二苯基‐2‐苦基肼（1,1‐diphenyl‐2‐picrylhydrazyl,DPPH）和羟自由基活性的能力。本研究结果为六妹羊肚菌多糖功能食品的开发和利用提供研究基础。     

超声波处理对柴胡多糖提取率、微观形貌特征及生物活性的影响

为了研究超声波辅助提取柴胡多糖的过程中超声波对柴胡多糖的提取率及外观形貌、生物活性的影响,在单因素（超声波功率、超声波作用时间、料液比）的基础上,通过正交实验确定超声波辅助提取最佳工艺条件,并与传统提取方法所得到的结果进行了比较：利用原子力显微镜（AFM）研究超声波作用对柴胡多糖的形貌特征的影响;用邻二氮菲-金属铁离子-H2O2体系检测柴胡多糖对羟基自由基的清除作用。实验结果表明：超声波辅助提取的最佳提取条件为超声功率360W,超声时间15min,料液比1：35,水浴温度90℃,水浴时间1h,提取率为2．58％．所获得的柴胡多糖（SBR）的纯度为44．14％,与传统提取方法相比．不仅节约了时间,而且提高了提取效率。原子力显微镜观察的结果表明,柴胡多糖分子主要以螺旋结构形态存在,超声波作用使得柴胡多糖的分子降解成较小的分子片段。柴胡多糖能有效清除羟自由基,在相同浓度下SBP。的清除效果要优于水提柴胡粗多糖（WBP0）,且质量浓度在80～100ug／mL的范围清除效果最佳,并高于同浓度下抗坏血酸的清除效果。